接着分子の糖鎖リモデリングの生物学的意義の検討

粘附分子聚糖重塑的生物学意义的检验

基本信息

批准号：
12033207
负责人：
松浦成昭
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12033207/
关键词：
接着分子インテグリンカドヘリン糖鎖糖転移酵素癌の転移

项目摘要

糖転移酵素の中でN-glycanにGlcNAcをβ1-4結合でbisectingの形で付加するβ1,4-N-acetylglucosaminyltransferase III(GnT-III)を種々の癌細胞に遺伝子導入した。細胞形態の著明な変化およびEGF刺激後のβカテニンの局在の変化を認めたが、糖鎖付加によりβカテニンのチロシンリン酸化が低下したためであった。活性化c-srcの遺伝子導入によるβカテニンのチロシンリン酸化も低下していた。ツニカマイシン処理でこれらの変化がすべて消失したことから、E-カドヘリン・βカテニン複合体へのbisecting GlcNAcの付加で細胞内の情報伝達が抑制され、細胞の運動性や癌転移の阻害に働くことが示唆された。N-glycanにGlcNAcをβ1-6結合で付加するGnT-Vの種々の癌組織における発現を免疫組織化学的に検討した。正常組織ではGnT-Vの発現はほとんど見られないが、多くの癌組織や前癌病変、さらに炎症反応や再生性変化の激しい部位でGnT-Vが強く認められた。肝癌症例ではGnT-V高発現群で有意に良好な予後を示した。正常肝組織にはGnT-Vは認められず、肝炎、肝硬変と進行するに連れて、発現が亢進し、高分化〜中分化型肝細胞癌で最も高い発現を示し、低分化型肝細胞癌で減弱することから、GnT-Vは肝癌発癌の初期の過程に重要な役割を果たしている可能性が示唆された。N-glycanのGlcNAcにフコースを付加するα1-6 fucosyltransferase(α1-6FucT)を肝癌細胞へ遺伝子導入して、転移における意義を検討した。α1-6FucTを発現した肝癌細胞株はマウス脾内注射による肝転移実験で、有意に転移の抑制が見られた。マウス肝細胞およびフィブロネクチンへの接着性が低下しており、インテグリンα5β1分子のα1-6フコシル化が著明であるためと考えられた。以上より、接着分子は糖鎖の修飾を受けることにより、機能が調節されていることが明らかにされた。

在糖基转移酶中，将β1,4-N-乙酰葡萄糖氨基转移酶III（GNT-III）转染为与β1-4结合的形式，将glcNAC添加到N-聚糖中，将其添加到N-聚糖中，转染到各种癌细胞中。观察到EGF刺激后的细胞形态的显着变化和β-catenin的定位变化，但这是因为糖基化降低了β-catenin的酪氨酸磷酸化。通过转染活化的C-SRC对β-catenin的酪氨酸磷酸化也降低了。当穿刺霉素治疗导致GlcNAC消失到E-钙粘蛋白-β-catenin复合物时，所有这些变化被消除，从而抑制细胞内信号传导，从而导致细胞运动和抑制癌症转移。在各种癌症组织中研究了GNT-V的表达，该GNT-V具有β1-6结合的N-Glycan，并在N-Glycan中添加了β1-6结合。尽管在正常组织中几乎看不到GNT-V的表达，但在许多癌症组织，癌前病变以及具有严重炎症反应和再生性变化的地区强烈观察到GNT-V。在肝癌的病例中，GNT-V高表达的组显示出明显更好的预后。 GNT-V在正常肝组织中未发现，并且随着肝炎和肝硬化的发展，其表达增加，显示出在良好分化的肝细胞癌癌中的最高表达，并且在较差的肝细胞癌癌中衰减，表明GNT-V可能在早期的liver癌症中起重要作用。该基因被α1-6岩藻糖基转移酶（α1-6Fuct）转移到肝癌细胞中，该基因将Fucose添加到N-聚糖GlcNAC中，并将其在转移中的重要性。转移在表达α1-6Fuct的肝癌细胞系中的脑内注射α1-6粘液中的肝转移实验中得到了显着抑制。这被认为是因为对小鼠肝细胞的粘附和纤连蛋白的粘附降低，并且标记了整联蛋白α5β1分子的α1-6岩藻糖基化。从上面可以看出，粘附分子的功能受聚糖修饰的调节。