海洋生物由来の細胞接着阻害物質による癌治療への応用

海洋生物细胞粘附抑制剂在癌症治疗中的应用

基本信息

批准号：
13024250
负责人：
松浦成昭
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

血管新生は腫瘍が増大するときに必須の減少であり、血管新生がなければ、腫瘍は1-2mm以上には成長しないと報告されている。これまで、癌の治療薬として種々の抗癌剤が開発されてきたが、副作用の面から限定した使用にとどまっているものが少なくない。一方で、血管新生は正常の個体では起こっていない現象であること、新生血管がターゲットで既存の血管とは異なることより、大きな副作用がないことが血管新生を標的にした治療法の利点である。また、血管新生阻害剤による腫瘍の縮小効果がめざましく報告されてきたために、癌の治療法として血管新生に期待が集まり、種々の薬剤が治験に入っている。昨年度、海洋生物からの有用物質の検索の1つとして、カメノテからの抽出物が血管新生抑制作用があることを見出した。今年度はその基礎をなす研究として基底膜成分であるラミニンの機能性ペプチドIKVAV(イソロイシン-リジン-ヴァリン-アラニン-ヴァリン)が血管新生にどのような作用を持っているかを検討した。検討した細胞としてラット肺動脈血管内皮細胞TRLECを用いた。この細胞に対して、ラミニンの機能性ペプチドであるIKVAVの作用を細胞増殖、細胞接着、細胞運動、管腔能形形成およびin vivoでの血管新生についてDAS、(dorsal air sac)法で検討を行った。1)細胞増殖能の検討としてIKVAVを固層化しWSTアッセイを行ったところ、IKVAVは増殖能に有意な影響を及ぼさなかった。2)IKVAV上での細胞接着能を検討したところ、有意な接着効果を認めた。3)ランダムな細胞運動能をみるwoundアッセイをIKVAV上で行ったところ、運動能の亢進を認めた。4)コラーゲン三次元培養アッセイにより管腔形成能の検討を行ったところ、IKVAVは著明に管腔形成を亢進した。5)DAS法によりin vivoでの血管新生を検討したところ、IKVAVは著明に血管新生を誘導した。以上より、ラミニンの機能性ペプチドIKVAVは血管内皮細胞に対して細胞接着、細胞運動、管腔形成に働き、血管新生能を有することが明らかになった。このペプチドを競合阻害する天然物を見出すことにより、有効な血管新生阻害物質の開発が可能であると考えられた。

血管生成是当肿瘤生长时的必不可少的减少，没有血管生成，据报道肿瘤不会生长在1-2 mm以上。到目前为止，已经开发出各种抗癌剂来治疗癌症，但是许多副作用在副作用方面的使用有限。另一方面，靶向血管生成的治疗的优势在于，新血管形成是一种现象，在正常人中不会发生，并且新的血管与现有的血管有所不同，并且没有重大副作用。此外，已经有了显着报道血管生成抑制剂的作用，预期的新血管形成作为癌症的治疗已经提高了对新血管形成的希望，现在各种药物正在进入临床试验。去年，我们发现来自Camenotes的提取物具有抗血管生成特性，这是对海洋生物有用的物质的搜索之一。今年，我们研究了对血管生成的功能性肽IKVAV（异戊酸 - 赖氨酸 - 丙氨酸 - 丙氨酸 - 谷氨酸）的基本研究。大鼠肺动脉血管内皮细胞TRLEC被用作研究的细胞。 IKVAV是层粘连蛋白的功能性肽的作用，通过DAS和（背空气囊）方法研究了这些细胞，用于细胞增殖，细胞粘附，细胞运动，腔内电位形成和体内血管生成。 1）当IKVAV固化以检查细胞增殖潜力并进行WST测定时，IKVAV对增殖潜力没有显着影响。 2）当检查了IKVAV的细胞粘附能力时，观察到显着的粘附效应。 3）在IKVAV上监测随机细胞运动的伤口测定，并观察到增加的运动性。 4）当使用三维胶原蛋白培养测定法检查形成流明的能力时，IKVAV显着增加了流明的形成。 5）当通过DAS方法检查体内血管生成时，IKVAV显着诱导了血管生成。从上面可以看出，功能性肽IKVAV是一种层粘连蛋白，在细胞粘附，细胞运动和管腔形成中作用于血管内皮细胞，并具有新生血管化的能力。人们认为，通过找到竞争性抑制这种肽的天然产物，可以开发有效的血管生成抑制剂。