分子生物学的手法を用いた癌の新しい迅速診断法の開発と微小転移の意義の検討

利用分子生物学方法开发癌症快速诊断新方法并检查微转移的意义

• 批准号: 17659386
• 负责人: 松浦 成昭
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659386/
• 关键词: リンパ節転移; 遺伝子診断; 乳癌; RT-LAMP法; 大腸癌

本研究は短時間で効率良く遺伝子増幅が行えるRT-LAMP (reverse transcription-loop-mediated isothermal amlification)法を導入して、迅速で高感度な分子生物学的診断システムを開発していくものである。今年度は乳癌リンパ節について行ってきた基礎研究をもとに、実際の症例での詳細な検討および大腸癌での基礎的な検討を行った。乳癌患者36例から摘出された106個の腋窩リンパ節を対象に、OSNA法によるリンパ節中のCK19mRNA発現量を定量的に測定し、免疫組織学的方法を併用した病理組織診断と比較し、その診断の可能性を検討した。基礎的検討から予め設定したカットオフ値でCK19mRNA発現量を陽性・陰性に分けた結果は2mm間隔で観察した病理組織学的診断と98.1%の一致率が得られた。感度100%、特異度97.6%であり、不一致例はすべて微小な転移症例であった。また、CK19mRNA発現量は転移癌細胞数と良好な相関関係を示し、定量的な評価も可能であると考えられた。大腸癌について、転移陽性の所属リンパ節および陰性リンパ節について検討を行い、感度・特異度の点から用いるマーカーの検討を行った。サイトケラチン(CK)18,19が感度、特異度の点から。CK18、 CEA、その他よりも優れていたので乳癌同様、CK19を用いて検討を行った大腸癌患者20例、56個の所属リンパ節について、乳癌同様にCK19mRNA発現量と2mm間隔で観察した病理組織学的診断とを比較検討した結果、感度100%、特異度98.8%と良好な結果を得た。すべての測定は30分以内に実施可能であった。以上の検討から、乳癌、大腸癌において本法は術中の迅速診断に応用可能と考えられた。

这项研究将引入逆转录环介导的等温分析（RT-LAMP）方法，该方法可在短时间内进行有效的基因扩增，并开发出快速且高度敏感的分子生物学诊断系统。今年，我们根据我们对乳腺癌淋巴结的基础研究进行了一项详细研究，并对实际病例和结肠癌的基本研究进行了详细研究。通过从36名乳腺癌患者中去除的106个腋窝淋巴结中的淋巴结中，通过OSNA方法定量测量淋巴结中CK19 mRNA的表达水平，并使用免疫组织化学方法与组织病理学诊断进行了比较，以检查诊断的可能性。基于基础研究，使用预设截止值将CK19 mRNA表达水平分为正值和负值，结果获得了98.1％的一致率，而在2mm的间隔内观察到的组织病理学诊断。敏感性为100％，特异性为97.6％，所有不一致是小型转移病例。此外，CK19 mRNA的表达水平与转移性癌细胞的数量有良好的相关性，并且认为可以进行定量评估。对于结肠癌，检查了转移阳性的区域和阴性淋巴结，并根据敏感性和特异性检查了所使用的标记。细胞角蛋白（CK）18和19是敏感和特异性的。由于它优于CK18，CEA等，我们以与乳腺癌相同的方式进行了比较并检查了56名结肠癌患者和56个区域淋巴结的56个区域淋巴结，与乳腺癌相似，与乳腺癌相同，在2mm的间隔下观察到的MRNA表达水平和组织病理学水平和组织性诊断为2mm，我们获得了良好的效果，并具有100％和100％的敏感性。所有测量都可以在30分钟内进行。根据上述研究，人们认为该方法可以用于术中快速诊断乳腺癌和结肠癌。

项目成果

New molecular diagnositic method for rapid detection of lymph node metastasis in breast cancer.

快速检测乳腺癌淋巴结转移的新分子诊断方法。

• 发表时间: 2007
• 作者: Matsuura N;Tsujimot M;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Methylation and expression of p16INK4 tumor suppressor gene in primary colorectal cancer tissues.

• DOI: 10.3892/ijo.26.5.1217
• 发表时间: 2005-05
• 期刊: International journal of oncology
• 影响因子: 5.2
• 作者: B. Kim;Hirofumi Yamamoto;K. Ikeda;B. Damdinsuren;Y. Sugita;C. Ngan;Y. Fujie;M. Ogawa;T. Hata

Role of n21wafl/cinl in effects of oxalinlatin in colorectal cancer cells.

n21wafl/cinl 在奥沙林拉丁对结直肠癌细胞的作用中的作用。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Mol Cancer Ther 4・10
• 作者: Hata T;Matsuura N;et al.
• 通讯作者: et al.

リウマチ病セミナー

风湿病研讨会

• 发表时间: 2007
• 作者: 松浦成昭;横山雄起;他
• 通讯作者: 他

Gene expression of colorectal cancer: preoperative genetic diagnosis using endoscopic biopsies.

• DOI: 10.3892/ijo.32.2.367
• 发表时间: 2008-02
• 期刊: International journal of oncology
• 影响因子: 5.2
• 作者: T. Komori;I. Takemasa;M. Yamasaki;M. Motoori;Takeshi Kato;N. Kikkawa;N. Kawaguchi;M. Ikeda;Hirofumi Yamamoto;M. Sekimoto;K. Matsubara;N. Matsuura;M. Monden