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新しいトランスジェニック魚を用いた網膜生理学研究の展開

新しいトランスジェニック魚を用いた網膜生理学研究の展開
利用新型转基因鱼开展视网膜生理学研究
批准号：
14658267
负责人：
加藤 聖
金额：
$2.24万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2002 至 2004
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14658267/
关键词：
金魚ゼブラフィッシュ神経再生クローニングプルプリントランスグルタミネースRNAiリコンビナント蛋白遺伝子過剰発現中枢神経再生ゲノムDNAライブラリーレチノール結合タンパク

项目摘要

项目成果

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魚は哺乳類と異なり中枢神経軸索の損傷を受けても再生する。我々は視神経をモデルとして魚類の神経両生分子をクローニングし、プルプリン、トランスグルタミネース等をクローニングした。これら分子のcDNA全長を得、まずプラスミドに組み込み大腸菌にトランスフェクションし(1)リコンビナント蛋白を精製した。(2)この蛋白からペプチド抗体やウサギに免疫し抗体を作製した。(3)更に標的遺伝子特異的なRNAiを行なうためsiRNA用のプライマーを設計した。ルシフェラーゼ遺伝子をレポーターとして、標的遺伝子のルシフェラーゼ活性を指標に遺伝子発現の抑制量より適するプライマーを取得した。網膜組織培養切片を用いて神経突起の伸長(神経の再生)を見た所、プルプリンやトランスグルタミネースのリコンビナント蛋白の添加により著明な神経突起の伸長が見られた。逆に抗体の添加により神経突起の伸長が抑えられた。また、リポフェクタミン2000の共存下にsiRNAを添加したところ、ランダムプライマーによるmock実験と比べて著明に神経突起の伸展が抑制された。以上の結果より、見つかったプルプリン、トランスグルタミネースが網膜の神経節細胞の軸索伸長(視神経の再生)に大きく関わっていることが判明した。現在、ウィルスベクターによる過剰発現の影響と哺乳類網膜への導入実験を行っている。この様に魚で得られた遺伝子の導入や抑制実験により新しい網膜での機能が明らかにされた。
期刊论文(22)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Takizawa, N., Tanaka, M., Liu, Z.W., Kato, S.: "A dissociation of γ-butyrolactone-induced absence seizure and ORE- and AP-1 DNA-binding activities in the developing rat brain"Neurosci.Res.. 45・4. 483-490 (2003)
Takizawa, N.、Tanaka, M.、Liu, Z.W.、Kato, S.：“发育中的大鼠大脑中 γ-丁内酯诱导的失神发作以及 ORE- 和 AP-1 DNA 结合活性的解离” Neurosci.Res ..45・4。483-490（2003）
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Sugitani, K., Devadas, M., Liu, ZW., Sugawara, K., Matsukawa, T., Ishita, S., Kato, S.: "The Goldfish Visual System as a Useful Model for CNS regeneration : from Gene to Behavior"Recent Research Developments in Neurochemistry. (In press). (2003)
Sugitani, K.、Devadas, M.、Liu, ZW.、Sugara, K.、Matsukawa, T.、Ishita, S.、Kato, S.：“金鱼视觉系统作为中枢神经系统再生的有用模型：来自基因
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
金魚の神経再生モデル
金鱼神经再生模型
DOI： --
发表时间： 2004
期刊： Clinical Neuroscience 22
影响因子： --
作者： [郡山恵樹, 松川 通, 安田里愛, 加藤 聖]
通讯作者： 加藤 聖
Matsukawa, T., Arai, K., Koriyama, Y., Liu, Z.W., Kato, S.: "Axonal regeneration of fish optic nerve after injury"Biological & Pharmaceutical Bulletin. (In press). (2004)
Matsukawa, T.、Arai, K.、Koriyama, Y.、Liu, Z.W.、Kato, S.：“鱼视神经损伤后的轴突再生”生物学
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 10 条
    視神経再生分子を用いた損傷網膜神経節細胞の軸索再伸長
    • 批准号：
      19659447
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $1.98万
    • 财政年份：
      2007
    • 负责人：
      加藤 聖
    • 依托单位：
      Kanazawa University
    レチノイン酸が成熟金魚の視神経再生を引き起こす
    • 批准号：
      16027218
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $3.84万
    • 财政年份：
      2004
    • 负责人：
      加藤 聖
    • 依托单位：
      Kanazawa University
    中枢神経軸索再生のシナプス編成機構に関する研究
    • 批准号：
      02F00273
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for JSPS Fellows
    • 资助金额：
      $1.22万
    • 财政年份：
      2002
    • 负责人：
      加藤 聖
    • 依托单位：
      Kanazawa University
    金魚再生視神経は成熟視蓋において如何にシナプス再機構化を獲得するか
    • 批准号：
      14034219
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $4.35万
    • 财政年份：
      2002
    • 负责人：
      加藤 聖
    • 依托单位：
      Kanazawa University
    海外基金