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肺病変修復過程の分子生物学的検索一肺表面活性物質アポ蛋白およびコラ-ゲンの遺伝子発現およびそのmRNA動態

肺部病变修复过程的分子生物学研究——肺表面活性剂脱辅基蛋白和胶原蛋白的基因表达和mRNA动态

基本信息

批准号：
03807102
负责人：
須加原一博
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.高濃度酸素負与ラット肺およびストレプトゾトシン・誘発糖尿病ラット肺における肺表面活性物質アポ蛋白SPーA,SPーBおよびSPーCの遺伝子発現:(1)高濃度酸素(>85%)4〜7日間投与したラット肺でin situ hybridization法によりmRNAの局在を検討してみると、コントロ-ル群に比し、SPーAおよびSPーB mRNAの過剰発現が肺胞II型上皮細胞およびクララ細胞に観察されたが、SPーC mRNAではあまり変化がなかった。SPーA mRNAは特に肺胞II型上皮細胞に、SPーB mRNAはクララ細胞に強く発現しており、3つのアポ蛋白に違いがみられそれぞれの遺伝子調節機能の差が示唆された。(2)糖尿病ラット肺では、これまで報告したように形態学的に肺胞II型上皮細胞の粗面小胞体の拡張が観察され、SPーA蛋白の免疫組織化学染色で染色性の低下がみられた。ELISA法によるSPーA蛋白測定でも糖尿病肺組織で低下していたが、in situ hybridization法によるSPーA mRNAの発現を検討してみると、予想に反して過剰発現していた。この過剰発現はノ-ザン・ブロット法による分析でも確認された。SPーB mRNAもSPーAと同様に過剰発現がみられたが、特にクララ細胞に強く発現していた。SPーC mRNAでは逆にコントロ-ル群に比し発現の低下が観察され、3つのアポ蛋白に遺伝子発現の差がみられ、糖尿病病態が3つのアポ蛋白遺伝子発現に関し何らかの制御異常を示しているものと思われた。(3)シリカ投与によるラット肺(肺線維症)でもSPーA mRNAの過剰発現がみられた。2.培養肺胞II型上皮細昶によるDNA修復研究:DNA損傷は癌の発生と密接な関係があると考えられているが、紫外線による肺胞上皮細胞のDNA切断をin situ nick translation法により検討した。コントロ-ル群に比して紫外線暴露(30J/m^2)群では殆どの細胞で銀粒子の集積がみられ、DNA損傷の修復が確認された。今後癌発生過程でDNA損傷の演ずる役割を細胞レベルで解析しようと研究を進めている。

1. The expression of SP A,SP B and SP C mRNA was detected in lung type II epithelial cells by high concentration of acid (>85%) administered during the day from 4 to 7 days. SP A mRNA is specifically expressed in type II epithelial cells, SP B mRNA is strongly expressed in type II epithelial cells, and SP B mRNA is strongly expressed in type III epithelial cells. (2)In diabetes mellitus, the expression of SP A protein was detected by immunohistochemical staining. The expression of SP A mRNA in diabetic lung tissue was studied by ELISA and in situ hybridization. This is the first time I've ever seen one. SP B mRNA is expressed in the same way as SP A. SP-C mRNA expression in the reverse transcription factor-1 group is lower than that in the normal transcription factor-3, protein expression is lower than that in the normal transcription factor-3, and diabetes mellitus is higher than that in the normal transcription factor-3. (3)The expression of SP-A mRNA in the lung (lung disease) is closely related to the expression of SP-A mRNA. 2. DNA repair in type II lung epithelial cells:DNA damage and tumor initiation and close contact Compared with UV exposure (30J/m^2), the accumulation of silver particles in cells and repair of DNA damage were confirmed. In the future, the research on DNA damage in cancer development process will be further developed.