ヒトの脂肪酸およびエイコサノイドω水酸化P-450の構造と機能

人类脂肪酸和类二十烷酸 omega-羟基化 P-450 的结构和功能

基本信息

  • 批准号:
    04680202
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.28万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    1992
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1992 至 1993
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1.ヒトの肝ミクロゾームより,脂肪酸ω水酸化酵素(P450HLω)を15nmol P450/mg蛋白質の比含量に迄精製した。本P450HLωはSDS-PAGE上,52,000の見かけの分子量を示した。更にヒトの肝cDNAライブラリーより,ウサギの脂肪酸ω水酸化酵素(CYP4A5)のcDNAをプローブとして,脂肪酸ω水酸化酵素のcDNAクローンを単離した。このcDNAから推定されるアミノ酸残基5から25迄の配列は,未決定の一残基を除いてP450HLωのN末端配列と同一であった。このcDNAは519個のアミノ酸から成る分子量59,347の蛋白質をコードした。本cDNAより推定されるアミノ酸配列はCYP4A5と82%の相同性を示した。ノーザンブロット分析の結果,このcDNAにハイブリダイズするmRNAはヒトの肝臓と腎臓に発現することが認められた。発現ベクターpAAH5を用いて本cDNAを酵母に発現させた蛋白質は,見かけの分子量約52,000で種々の脂肪酸のω水酸化反応を触媒した。これよりこのcDNA(CYP4A11)はヒト肝脂肪酸ω水酸化酵素P450HLωに相当することが証明された。2.ヒト好中球のcDNAライブラリーより,ウサギのプロスタグランジンω水酸化酵素(CYP4A4)のcDNAをプローブとして,ロイコトリエンB_4ω水酸化酵素(P450LTBω)のcDNAを単離した。本cDNAによりコードされる酵素は520のアミノ酸残基よりなり,分子量は59,805である。本酵素を酵母内に発現させたところ,ロイコトリエンB_4のω水酸化を触媒し,そのKm値は0.71μMであった。本酵素のアミノ酸配列は脂肪酸やプロスタグランジンω水酸化酵素(CYP4A)と42-43%の相同性を示し,P450遺伝子スーパーファミリーにおいてファミリー4の中の新しいサブファミリー4F(CYP4F3)の一員であることが明かになった。
1. The specific content of fatty acid omega-hydrated acidifying enzyme (P450HL ω) and 15nmol P450/mg protein was determined. On this P450HL ω-SDS-PAGE, the molecular weight of 52000 μ mol

项目成果

期刊论文数量(16)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Sawamura,Arata: "Catalytic properties of rabbit kidney fatty acid ω-hydroxylase cytochrome P-450Ka2(CYP4A7)" Biochimica Biophysica Acta. 1168. 30-36 (1993)
Sawamura, Arata:“兔肾脂肪酸 ω-羟化酶细胞色素 P-450Ka2(CYP4A7) 的催化特性”Biochimica Biophysical Acta 1168. 30-36 (1993)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Kikuta,Yasushi: "A novel form of Cytochrome P-450 family 4 in human Polymorphonuclear leukocytes:cDNA cloning and expression of leukotriene B_4ω-hydroxylase" The Journal of Biological Chemistry. 268. 9376-9380 (1993)
Kikuta, Yasushi:“人类多形核白细胞中细胞色素 P-450 家族 4 的一种新形式:白三烯 B_4ω-羟化酶的 cDNA 克隆和表达”《生物化学杂志》268. 9376-9380 (1993)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Kusunose,Masamichi: "Fatty acid omega-oxidation and eicosanoid metabolism" Cytochrome P-450. Second edition. 127-141 (1993)
Kusunose,Masamichi:“脂肪酸 omega-氧化和类二十烷酸代谢”细胞色素 P-450。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Fukuda,Tomohiko: "Replacement of thr-303 from P450 2E_1 with serine modifies regioselectivity of its fatty acid hydroxylase activity" The Journal of Biochemistry. 113. 7-12 (1993)
Fukuda, Tomohiko:“用丝氨酸替换 P450 2E_1 中的 thr-303 可改变其脂肪酸羟化酶活性的区域选择性”《生物化学杂志》。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Kikuta,Yasushi: "A novel form of Cytochrome P-450 family 4 in human Polymorphonuclear leukocytes:cDNA cloning and expression of leukotriene B4omega-hydroxylase" The Journal of Biological Chemistry. 268. 9376-9380 (1993)
Kikuta, Yasushi:“人类多形核白细胞中细胞色素 P-450 家族 4 的新型形式:白三烯 B4omega-羟化酶的 cDNA 克隆和表达”《生物化学杂志》。
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