アミン前駆体アミノ酸輸送の血液脳関門β-アドレナリン受容体による制御

血脑屏障β-肾上腺素能受体对胺前体氨基酸转运的调节

• 批准号: 05808075
• 负责人: 伊藤 忠雄
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05808075/
• 关键词: 血液脳関門; アミノ酸輸送; β-アドレナリン受容体; L-DOPA; dopamine; norepinephrine; L-DOPS

〔目的〕本研究は、パーキンソン病や起立性低血圧の治療薬として用いられているL-DOPAやL-DOPSの脳内移送に対するβ作動薬の効果に注目し、その臨床応用について検討を加えた。〔対象と方法〕動物実験:6〜8週令で、200〜250gのWistar系雄性ラットを用い、24時間の絶食後に、L-dihydroxyphenylalanine(L-DOPA)またはL-dihydroxyphenylserine(L-DOPS)100μmol/kgに生理食塩水のみを加えてラットに腹腔内投与してcontrolとし、これにisoproterenol10μmol/kg、salbutamol10μmol/kg、またはdobutamine50μmol/kgを加えて投与した。β遮断薬propranolol50μmol/kgは、β作動薬投与の20分前に投与した。B作動薬の腹腔内投与後、60分で断頭、躯幹血5mlをheparine-EDTA採血して血漿とし内部標準を含んだ0.7N perchloric acid(PCA)1mlを加えて遠心し、上清を-70℃にて保存し測定に用いた。同時に速やかに脳を摘出、Glowinski-Iverson等の方法により、氷上で大脳皮質、線状体、海馬、視床-視床下部、脳幹に分離した。各脳組織は内部標準を含んだ0.4N PCA1mlを加えhomogenizeして遠心し、上清を-70℃にて保存した。L-DOPS,L-DOPA,norepinephrine(NE),dopamine(DA),dihydroxyphenylacetic acid(DOPAC),homovanillic acid(HVA)の測定は、電気化学検出器を用いたODSカラムによる高速液体クロマトグラフィーによって行った。アミノ酸の測定は、日立835型高速アミノ酸分析器にて行った。〔結果〕L-DOPAの脳内濃度はisoproterenolとsalbutamolによって用量反応性に増加し、10μmol/kgでほぼ最大反応を得た。大脳皮質におけるL-DOPA,DAおよびその代謝物濃度を比較するとisoproterenol,salbutamolともにcontrolに比し、L-DOPA濃度を増加させDA代謝回転を促進させた。しかし、dobutamineは逆にこれらを減少させた。isoproterenolとsalbutamolの作用は、propranololによって抑制された。他の脳組織でも同様の結果を得た。血中のL-DOPA濃度は、controlに比べisoproterenol,salbutamolによって増加傾向を示したが有意でなく、dobutamineによっては減少傾向を示した。海馬におけるL-DOPSとNE濃度もisoproterenolにより有意に増加した。L-DOPAとsalbutamolを同時に投与した場合、脳内L-DOPAの濃度の増加と共にDAの代謝産物であるDOPAC,HVAの有意の増加を認め非特異的なβ-blockerであるpropranolol投与によりそれらの増加作用は消失した。今回の実験結果では、β作動薬により他の芳香族アミノ酸(phenylalanine,tyrosine,tryptophan)と同様にL-DOPAとL-DOPSの脳内濃度が増加し、DAとNEの代謝回転が促進された。従って、β作動薬がL-DOPAやL-DOPSの脳内移行を促進しその中枢作用を増強し、治療の補助薬となる可能性が示された。

[Objective] This study focused on the effects of beta acting agents on L-DOPA and L-DOPS internal transport in the treatment of acute and chronic hypotension and their clinical application. [Methods] Animals were treated with L-dihydroxyphenylalanine(L-DOPA) and L-dihydroxyphenylserine (L-DOPS)100μmol/kg intraperitoneally at 6 ~ 8 weeks old, 200 ~ 250g Wistar male rats, 24 hours after fasting, and 10 μ mol/kg isoproterenol, 10 μ mol/kg salbutamol, and 50μmol/kg dobutamine.β-propranolol50μmol/kg, β-acting propranolol 20 min before administration After intraperitoneal administration of B, decapitation at 60 minutes, collection of 5ml of heparine-EDTA from trunk blood, plasma and internal standard containing 0.7N perchloric acid(PCA)1ml of added solution, and preservation at-70℃At the same time, the method of speed, Glowinski-Iverson, etc. is divided into two parts: cortex, linear body, hippocampus, optic bed-inferior optic bed, and trunk. Each tissue is stored at-70℃ with an internal standard of 0.4N PCA1ml. L-DOPS,L-DOPA,norepinephrine(NE),dopamine(DA),dihydroxyphenylacetic acid(DOPAC),homovanillic acid(HVA) were used in the determination of high speed liquid compounds. Hitachi 835 High Speed Acid Analyzer for Acid Determination [Results] The concentration of L-DOPA increased with the dosage of isoproterenol and salbutamol, and the maximum reaction was obtained at 10μmol/kg. L-DOPA,DA, and other metabolites in the cortex were compared to isoproterenol,salbutamol, and L-DOPA concentrations, which increased DA metabolism. Dobutamine is the best way to reduce the cost of drugs. The effect of isoproterenol and salbutamol is inhibited by propranolol. He organized himself into the same results. L-DOPA concentrations in the blood showed a tendency to increase compared with isoproterenol and salbutamol concentrations, and a tendency to decrease compared with dobutamine concentrations. L-DOPS and NE concentrations in hippocampus were intentionally increased. When L-DOPA and salbutamol were administered simultaneously, the concentration of L-DOPA increased in the plasma, and the metabolites of DA increased intentionally, and the non-specific β-blocker effect of propanolol administration disappeared. The results showed that β-acting agents promoted the metabolism of L-DOPA and L-DOPS, and the concentrations of L-DOPA and L-DOPS increased. The possibility of enhancing the central role of β-acting agents in promoting the migration of L-DOPA and L-DOPS and supporting therapeutic agents is also demonstrated.