加齢にともなうB細胞免疫グロブリン遺伝子レパトアーの変遷

B 细胞免疫球蛋白基因库随衰老的变化

• 批准号: 05834006
• 负责人: 直江 知樹
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05834006/
• 关键词: 免疫グロブリン重鎖(IgH)遺伝子; 加齢; B細胞レパトアー; CDR-III; B細胞分化; 抗体サブクラス; mutation

加齢に伴うB細胞免疫グロブリン遺伝子レパトアーの変遷を検討するために,10例のCord blood,7歳,21歳,23歳,42歳の正常骨髄細胞,6歳,12歳,21歳,42歳,90歳,95歳の正常末梢血を採取し,リンパ球を分離した.得られた各リンパ球よりDNA,RNAを抽出した.先ず,免疫グロブリン重鎖(IgH)遺伝子において最も多様性に富むcomplementarity determining region-III(CDR-III)の遺伝子配列の比較を行い,その構成成分の加齢に伴う変化について検討した。その結果、DH,JHエレメントの使用頻度、Nセグメントの長さ、mutationの頻度に関しては、cord bloodを除いては、各年齢層において差は認められなかった。つまり、cord bloodにおいては、DHQ52エレメント及び、J2,3,4と比較的3'側に位置するDHエレメントと5'側に位置するJHエレメントの使用頻度が高く、Nセグメント(特にD-J結合部)は極めて短かった。一方、出生後リンパ球においては、小児、青年、壮年、老年期を通して差は認めず、DHエレメントの使用頻度はランダムであり、JHエレメントはJ4,5,6の比較的3'側のエレメントが高頻度で用いられていた。次に、B細胞の分化との関連を調べるために、小児、及び成人の骨髄細胞より、CD10,CD19,IgMの細胞表面への発現の差により、pre-B細胞と成熟B細胞をソーティングし、そのCDR-IIIのシークエンスを決定、比較したところ、DHエレメントの使用頻度はやはり、ランダムであり、Nセグメントの長さも末梢血リンパ球と同様であったが、JHエレメントにおいては、3'側のエレメントが多く使用されていたが、pre-B細胞においては、最も3'側に位置するJ6エレメントの使用頻度が高く、既に我々が報告しているpre-B急性リンパ性白血病における使用頻度と同様であった。以上の結果より、CDR-IIIの構造においては、出生後は各年齢層において差は認め難く、かつ、B細胞の分化においても既にpre-B段階においてほぼその構造は決定されており、出生後の免疫能の変化は、主として可変部(VH)領域の構造、すなわちVHエレメントの種類及びVHエレメントにおけるmutationが強く関与していることが示唆された。そこで、正常成人における抗体産生細胞におけるIgH可変部領域のmutationの頻度を抗体のサブクラス別に比較検討したところ、IgM<IgA<IgGの順にmutationの頻度は高くなり、抗体のサブクラスによってmutationの頻度が異なり、各抗体に要求される抗原特異性を反映していると考えられた。現在各年齢層における抗体産生細胞の可変部領域のmutationの頻度を各サブクラス別に検討中である。

Add 齢 に with う B cell immune グ ロ ブ リ ン posthumous son 伝 レ パ ト ア ー の - moving を beg す 検 る た め に, 10 cases の Cord blood, 7 showed, 21, showed 23, showed 42 の showed normal bone marrow cells, showed 6, 12, showed 21 showed, 42, showed 90, showed 95 を の showed normal peripheral blood taken し, リ ン パ ball を separation し た. Have ら れ た each リ ン パ ball よ り DNA, RNA を spare し た. First ず, immune グ ロ ブ リ ン heavy lock (IgH) heritage 伝 son に お い て most も multiple others に rich む complementarity determining Region - III (CDR III) の heritage 伝 with sequence の is を い, そ の composition の plus 齢 に with う variations change に つ い て beg し 検 た. そ の results, DH, JH エ レ メ ン ト の use frequency, N セ グ メ ン ト の さ, mutation の frequency に masato し て は, cord blood を except い て は, 齢 in each layer に お い て poor は recognize め ら れ な か っ た. つ ま り, cord blood に お い て は, DHQ52 エ レ メ ン ト and び, J2, 3, 4 と compare the 3 'side に す る DH エ レ メ ン ト と 5' side に す る JH エ レ メ ン ト の using high frequency が く, N セ グ メ ン ト (に D - J integration) は extremely め て short か っ た. Party, after the birth of リ ン パ ball に お い て は, small where, youth, maturity, old age を し て poor は recognize め ず, DH エ レ メ ン ト の useful は ラ ン ダ ム で あ り, JH エ レ メ ン ト は J4, 5 or 6 の comparison of the 3 'side の エ レ メ ン ト が high frequency で with い ら れ て い た. に, B cells の と の masato even を adjustable べ る た め に, where, and び の adult bone marrow cells よ り, CD10, CD19, IgM の cell surface へ の 発 now poor の に よ り, pre - B cells と mature B cells を ソ ー テ ィ ン グ し, そ の CDR - III の シ ー ク エ ン ス を decision, comparative し た と こ ろ, DH エ レ メ ン ト の useful は や は り, ラ ン ダ ム で あ り, N セ グ メ ン ト の long さ リ も peripheral blood ン パ と ball with others で あ っ た が, JH エ レ メ ン ト に お い て は, 3 'side の エ レ メ ン ト が more く using さ れ て い た が, pre - B cells に お い て は, most も 3' side に す る J6 エ レ メ ン ト の using high frequency が く, both に I 々が report that the frequency of use of における for pre-B acute リ <e:1> パ leukemia is the same as that of と. の above results よ り, CDR - III の structure に お い て は, after the birth of は 齢 in each layer に お い て は recognize め difficult く, か つ, B cells の に お い て も に both pre - section B order に お い て ほ ぼ そ の tectonic は decided さ れ て お り, after the birth of の immune to の - は, Lord と し て の can variations (VH) field structure, す な わ ち VH エ レ メ ン ト の types and び VH エ レ メ ン ト に お け る mutation が strong く masato and し て い る こ と が in stopping さ れ た. そ こ で, normal adult に お け る antibody generation cells に お け る IgH can - field の mutation の frequency を antibody の サ ブ ク ラ ス don't beg し に compare 検 た と こ ろ < IgA, IgM < IgG の shun に mutation の high frequency は く な り, antibody の サ ブ ク ラ ス に よ っ て mutation の frequency が な Youdaoplaceholder1, each antibody に requires される antigen-specific を to reflect えられた て ると ると to test えられた. Now 齢 in each layer に お け る antibodies produce cellular の - the domain の mutation の frequency を each サ ブ ク ラ ス don't に 検 beg in で あ る.

项目成果

H.Kiyoi,T.Naoe et al.: "Minimal residual disease status in pre-B acute lymphoblastic leukemia patients after chemotherapy and bone marrow transplantation:Assessment of the anti-leukemic effects of chemotherapy and BMT" Leukemia Research. 17. 677-684 (1993

H.Kiyoi，T.Naoe 等：“化疗和骨髓移植后 B 期前急性淋巴细胞白血病患者的微小残留病状态：化疗和 BMT 的抗白血病效果评估”白血病研究。

K.Kubo,T.Naoe et al.: "A human monoclonal antibody that detects HLA-A1,A23 and A24 antigens" Tissue Antigens. 41. 186-189 (1993)

K.Kubo、T.Naoe 等人：“一种检测 HLA-A1、A23 和 A24 抗原的人单克隆抗体”组织抗原。

T.Ichihashi,T.Naoe et al.: "Nucleotide sequences of the variable regions of a human monoclonal antibody against HLA-A1,A23,and A24" Tissue Antigens. 41. 249-254 (1993)

T.Ichihashi、T.Naoe 等人：“针对 HLA-A1、A23 和 A24 的人单克隆抗体可变区的核苷酸序列”组织抗原。

H.Kiyoi,T.Naoe et al.: "Continuing immunoglobulin heavy chain gene rearrangement in chronic myeloid leukemia with recurrent B-lymphoid blast crisis after bone marrow transplantation" Leukemia. (in press). (1994)

H.Kiyoi、T.Naoe 等人：“骨髓移植后慢性粒细胞白血病伴复发性 B 淋巴母细胞危象的持续免疫球蛋白重链基因重排”白血病。