白血病に関わる染色体転座部位の構造解析による転座メカニズム研究

白血病相关染色体易位位点结构分析研究易位机制

• 批准号: 08671225
• 负责人: 直江 知樹
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08671225/
• 关键词: 転座メカニズム; 染色体転座; 急性前骨髄球性白血病; 治療関連二次性白血病

治療関連二次性白血病の発症メカニズムを研究する目的で、治療関連二次性急性前骨髄球性白血病(T-sAPL)での染色体転座t(15;17)におけるPMLおよびRARA遺伝子切断点を解析し、de novo APLでの切断点と比較した。対象はJALSGおよび厚生省白血病治療班に登録された成人de novo APL120例およびランゲルハンス細胞組織球症(LCH)診断後、T-sAPLを発症した4例(男1例、女3例、平均年齢3.1歳)で、いずれもt(15;17)転座を有していた。LCHからT-sAPL発症までの期間は3〜8.5年でVP16総投与量4.8〜50.0g/m^2であった。de novo APLではPML遺伝子切断部位は約30%がイントロン3に、約70%がイントロン6・エクソン6に存在し、RARA遺伝子切断部位はすべてイントロン2存在した。8例においてder(15)およびder(17)の連結領域をシークエンスしたところ、共通する塩基モチーフを見出すことは困難であった。しかし、半数以上の連結部位においてPML遺伝子とRARA遺伝子が1〜7塩基を共有していることから、再結合モデルとして、非特異的なDNA二重鎖切断に続いて突出した一本鎖DNAどうしのペアリングが起きてDNAの結合に進む過程が考えられた。一方、T-sAPLの4症例の切断点は、サザンプロットの結果いずれもPML遺伝子のイントロン6、RARA遺伝子のイントロン2(EcoR1-BamH1の1.1kb)にあると予想された。つぎにPCRを行い切断領域を含むRARA-PMLおよびPML-RARA融合遺伝子のクローニングを行なった。その結果、4例とも約5.5kbのDNA増幅され、Eco R1で処理したところ、3.5kb、0.7kb、0.3kbの共通なbandの他に1.0〜2.1kbの異なる大きさのbandが検出された。各症例のder(15)のシークエンスが終了し、現在der(17)及びRARA遺伝子ゲノムクローンのシークエンスを行っているが、これまでのシークエンスでは転座部位に共通する塩基モチーフを見出すことは困難であったが、T-sAPLの発症メカニズムはde novo APLとは異なると考えられた。

Objective: To study the pathogenesis of treatment-related secondary acute promyelocytic leukemia (T-sAPL). To analyze and compare the PML and RARA gene cutoff points at chromosome locus t(15;17) in T-sAPL. In contrast, 120 adult de novo APL cases were diagnosed as leukemia histiocytosis (LCH) and 4 cases (1 male, 3 female, average age 3.1 years) were diagnosed as T-sAPL. The duration of onset of LCH T-sAPL is 3 ~ 8.5 years, and the total dose of VP16 is 4.8 ~ 50.0g/m^2. About 30% of PML gene cleavage sites, 70% of PML gene cleavage sites, and 70% of RARA gene cleavage sites exist. 8 examples of link fields in der(15) and der(17) More than half of the linkage sites are PML genes and RARA genes, and 1 to 7 bases are shared, re-combined, and non-specific DNA double-lock breaks are highlighted. In one case, the cutoff point of T-sAPL in 4 cases was detected, and the results showed that the PML gene was detected in 6 cases, and the RARA gene was detected in 2 cases (EcoR1-BamH1 and 1.1kb). The PCR sequence contains the RARA-PML sequence and PML-RARA sequence. The results showed that 4 cases had DNA amplification of about 5.5kb, Eco R1 treatment had a common band of 3.5kb, 0.7kb, 0.3kb and other 1.0 ~ 2.1kb. In each case, der(15) and der(17) and RARA have the same symptoms as those in the previous case. In each case, der(15) and der (17) have the same symptoms as those in the previous case.

项目成果

O.Marukawa et al.: "Molecular cloning of the breakpoints of t(11;22)(q23;q11) chromosome translocation in an adult acute myelomonocytic leukemia" Brit J Haemat. 92. 687-691 (1996)

O.Marukawa 等人：“成人急性髓单核细胞白血病 t(11;22)(q23;q11) 染色体易位断点的分子克隆”Brit J Haemat。

H.Yoshida et al.: "Accelerated degradation of PML-RARA oncoprotein by all-trans retinoic acid acute promyelocytic leukemia : possible role of the proteasome pathway" Cancer Res. 56. 2945-2948 (1996)

H.Yoshida 等人：“全反式视黄酸急性早幼粒细胞白血病加速 PML-RARA 癌蛋白的降解：蛋白酶体途径的可能作用”Cancer Res。

K.kubo et al.: "Differently selected T cell receptor repertoires between lesions and peripheral blood in acute graft-versus-host disease" Blood. 87. 3019-3026 (1996)

K.kubo 等人：“急性移植物抗宿主病中病变和外周血之间不同选择的 T 细胞受体库”血液。

G.Chen et al.: "In vitro studies on cellular and molecular mechanism of arsenic trioxide (As2O3) in the treatment of acute promyelocytic leukemia : As3O3 induces NB4 cell apoptosis with down-regulation of Bcl-2 expression and alteration of PML-RARa/PML pr

G.Chen等人：“三氧化二砷（As2O3）治疗急性早幼粒细胞白血病细胞和分子机制的体外研究：As3O3通过下调Bcl-2表达和改变PML-RARa诱导NB4细胞凋亡

H.Kiyoi et al.: "Comparable gene structure of the immunoglobulin heavy chain variable region between normal and malignant plasma cells" Leukemia. 10. 1804-1812 (1996)

H.Kiyoi 等人：“正常和恶性浆细胞之间免疫球蛋白重链可变区的可比较基因结构”白血病。