in vivo遺伝子導入法を用いた血管作動性物質の糸球体障害への影響の検討

使用体内基因转移方法检查血管活性物质对肾小球疾病的影响

• 批准号: 06671139
• 负责人: 今井 圓裕
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06671139/
• 关键词: 遺伝子導入; HVJ-リポソーム法; アンジオテンシンII; レニン; アンジオテンシノーゲン; 糸球体硬化; 形質転換; α-smooth muscle actin

近年「糸球体局所でのアンジオテンシンIIの作用が、糸球体硬化病変の成立・進展に関与する」という仮説が提唱されている。この仮説をin vivoで検証するため、ラット腎臓の糸球体細胞にヒト・レニン・ヒト・アンジオテンシノーゲンの遺伝子を導入し、これらを糸球体局所で過剰発現させることによって、メサンギウム細胞の形質転換ならびに糸球体硬化病変が惹起されるかどうかを検討した。遺伝子導入法としては、HVJ-リポソーム法を採用し、10匹の8週令雄性SDラットの左腎動脈から、上記遺伝子を左腎臓に導入した。遺伝子導入3日後にラット3匹を屠殺し、腎臓におけるヒト・レニンの発現を免疫組織化学で確認した。その結果、左腎の約30%の糸球体にヒト・レニンの発現が認められた。残る7匹のラットは、遺伝子導入7日後に屠殺し、その糸球体病変の有無について検討した。その結果、左腎の一部の糸球体で光顕的に細胞外基質の増加を認めた。また、免疫組織化学により、左腎の一部の糸球体で、I型、III型コラーゲン、α-smooth muscle actinの発現が認められた。これらの発現は正常糸球体では認められず、メサンギウム細胞の形質転換のマーカーとされている。これらの糸球体組織変化は、chloramphenicol acetyltransferase(CAT)遺伝子を導入した対照腎では全く認められなかった。また、ヒト・レニン、ヒト・アンジオテンシノーゲン遺伝子の導入3日後、7日後に全身血圧の上昇は認められず、同日のラット血漿ヒト・レニン濃度は測定感度以下であった。以上の結果から、腎臓糸球体局所のレニン-アンジオテンシン系の亢進が、in vivoでメサンギウム細胞の形質転換ならびに糸球体硬化病変を誘導することが示唆された。

In recent years, "si sphere bureau で の ア ン ジ オ テ ン シ ン II の が, si sphere sclerosis - の was set up, progress に masato and す る" と い う 仮 says the が sing さ れ て い る. Youdaoplaceholder0 仮 says をin Vivo で 検 card す る た め, ラ ッ ト renal viscera somatic に の si ball ヒ ト · レ ニ ン · ヒ ト · ア ン ジ オ テ ン シ ノ ー ゲ ン の heritage 伝 を import し, こ れ ら を si bureau で sphere, a turning 発 now さ せ る こ と に よ っ て, メ サ ン ギ ウ の ム cells form quality planning in な ら び に si sphere sclerosis - が provoked さ れ る か ど う か を beg し 検 た. Heritage 伝 son import method と し て は, HVJ リ ポ ソ ー を ム method using し, 10 の horse eight weeks to male SD ラ ッ ト の left renal artery か ら, written but 伝 を left kidney viscera に import し た. Three days after the introduction of the 伝 seed, にラット3 を were slaughtered and <s:1> and におけるヒト · レニ <s:1> were found in the kidneys. Youdaoplaceholder5 immunohistochemistry で confirmed that た. Youdaoplaceholder0 そ results: about 30% of the <s:1> spheroids of the left kidney にヒト · レニ <e:1> そ are present が recognized められた. After 7 days of the introduction of the remaining る7 <s:1> ラット た and the remaining 伝 seeds, に slaughter the <s:1> and そ of the spheroidians. Check for the disease of the に and て検 て検 and collect the た. The そ そ result showed that a part of the <s:1> spheroid of the left kidney で light 顕 the に extracellular matrix <e:1> increased を recognition めた. ま た, immunohistochemical に よ り, left kidney の a の si で sphere, type I and type III コ ラ ー ゲ ン and alpha smooth muscle actin の 発 が now recognize め ら れ た. こ れ ら の is は 発 the normal si sphere で は recognize め ら れ ず, メ サ ン ギ ウ の ム cells form quality planning in の マ ー カ ー と さ れ て い る. The <s:1> れら globule tissue transformation and chloramphenicol acetyltransferase(CAT) residual 伝 carrier を are introduced into the <s:1> た and the で で of the illuminated kidney fully く recognize められな った った った. ま た, ヒ ト · レ ニ ン, ヒ ト · ア ン ジ オ テ ン シ ノ ー ゲ ン heritage 伝 の import after 3, 7 に future systemic blood 圧 の rise は recognize め ら れ ず, on the same day の ラ ッ ト plasma ヒ ト · レ ニ ン concentration determination は sensitivity following で あ っ た. の above results か ら is crucial, kidney si sphere bureau の レ ニ ン - ア ン ジ オ テ ン シ ン is の hyperthyroidism が, the in vivo で メ サ ン ギ ウ の ム cells form quality planning in な ら び に si sphere sclerosis - induced す を る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

Makoto Arai et al.: "IN VIVO TRANSFECTION OF GENES FORRENIN AND ANGIOTENSINOGEN INTO THE GLOMERULAR CELLS INDUCED PHENOTYPIC CHANGE OF THE MESANGIAL CELLS AND GLOMERULAR SCLEROSIS." Biochemical and Biophysical Research Communications. 206. 525-532 (1995)

Makoto Arai 等人：“将 Forrenin 和血管紧张素原基因体内转染到肾小球细胞中会引起系膜细胞和肾小球硬化的表型变化。”