移植腎の長期生着を目指した遺伝子治療の開発

开发旨在移植肾长期存活的基因疗法

基本信息

  • 批准号:
    14657253
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.18万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2002
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2002 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1.ブタへのHGF遺伝子導入法の確立;ミニブタを、麻酔下で開腹後、腎を摘出し、生理的食塩水で腎臓を還流後、HGF遺伝子を組み込んだ発現ベクター(6mg)を腎静脈をクリップにて結紮し注入した。遺伝子を導入したブタ腎臓を生理的食塩水で満たしたバスタブ型電極に浸し、スクエアー型電圧(30V,100msec)を900msecの休止をおいて、6回行い、エレクトロポレーションにより遺伝子導入を行った。HGF遺伝子導入を行ったブタ腎臓を移植し、遺伝子導入7日後に腎臓を摘出し、腎皮質のHGF活性をELIZA法にて測定した。また、同時に腎組織を抗HGF抗体を用いて、染色した。正常ブタ腎臓では、腎皮質におけるHGFの活性を認めなかったが、遺伝子導入ブタ腎において皮質のHGF活性を認めた。また、腎糸球体での染色を認め、腎糸球体でのHGF遺伝子発現が確認された。2.移植ブタ腎でのHGF遺伝子導入の効果と安全性の評価;HGF遺伝子導入を行ったブタ腎臓を移植した後、対側腎を摘出し、移植モデルブタを作製した。HGF遺伝子およびコントロール遺伝子を導入したブタを1、3、6ヶ月後に安楽死させ、検討した。HGF遺伝子は遺伝子導入を行った腎臓のみに検出され、しかも6ヶ月後まで腎臓に検出された。他の肝臓、肺、脾臓には導入遺伝子は検出されなかった。また、HGF遺伝子を導入した移植モデルブタでは間質線維化が抑制されていた。また、HGF遺伝子を導入した移植モデルブタでは、形質転換のマーカーであるα-smooth muscle actinの発現が抑制されていた。以上、HGF遺伝子によつ安全性及び移植腎保護作用が示唆された。
1. The ブタへ <s:1> HGF remnant 伝 seed introduction method <e:1> was established; ミ ニ ブ タ を, hemp 酔 で under open, kidney を picked out after し, physiology of salt water で after kidney perforatien を also flow, HGF but 伝 を group み 込 ん だ 発 now ベ ク タ ー (6 mg) を renal vein を ク リ ッ プ に て ligation し injection し た. Posthumous son 伝 を import し た ブ タ perforatien を physiology of food salt water で against た し た バ ス タ ブ type electrode に immersion し, ス ク エ ア ー type electric 圧 (30 v, the 100 msec) を 900 msec の resting を お い て, 6 return い, エ レ ク ト ロ ポ レ ー シ ョ ン に よ り heritage 伝 son import line を っ た. Line traces of HGF 伝 son import を っ た ブ し perforatien を タ kidney transplantation, but 伝 import after 7 に renal perforatien を pick out し, renal cortex の HGF active を ELIZA method に て determination し た. Youdaoplaceholder0, at the same time, に renal tissue を anti-hgf antibody を was stained with て て and <s:1> た. Normal ブ タ renal viscera で は, renal cortex に お け る HGF を の activity recognition め な か っ た が, but 伝 import ブ タ renal に お い て cortex の を HGF activity recognition め た. Youdaoplaceholder0, で <s:1> staining of renal spheroids を identified め, で HGF remains of renal spheroids 伝 appeared が confirmed された. 2. Evaluation of the efficacy and safety of transplanting ブタ kidney で <s:1> HGF remnant 伝 seed into 価; Line traces of HGF 伝 son import を っ た ブ perforatien を タ kidney transplant し た, bilateral renal を pick out し seaborne, after transplantation モ デ ル ブ タ を cropping し た. Traces of HGF 伝 son お よ び コ ン ト ロ ー ル heritage 伝 son を import し た ブ タ を に Ann after 1, 3, 6 ヶ joy dead さ せ, beg し 検 た. Traces of traces of HGF 伝 son は 伝 son import line を っ た renal viscera の み に 検 out さ れ, し か も ヶ six months after ま で renal viscera に 検 out さ れ た. He injects the liver, lungs and spleen に に into the body, and the 伝 offspring 伝 検 exudes されな されな った った. ま た, HGF but 伝 を import し た transplantation モ デ ル ブ タ で は interstitial line dimensions が inhibit さ れ て い た. ま た, HGF but 伝 を import し た transplantation モ デ ル ブ タ で は, form quality planning in の マ ー カ ー で あ る alpha smooth muscle actin の 発 now が inhibit さ れ て い た. The above, the safety of HGF 's 伝 offspring によ 伝 and its protective effect on び transplanted kidneys が suggest された.

项目成果

期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Takabatake Y, Isaka Y, Mizui M, et al.: "In vivo transfection of hepatocyte grwoth factor ameliorates early manifestations of experimental diabetic nephropathy"J Am Soc Nephrol. 13. 126A (2002)
Takabatake Y、Isaka Y、Mizui M 等人:“肝细胞生长因子的体内转染改善了实验性糖尿病肾病的早期表现”J Am Soc Nephrol。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Isaka Y, Yamada K, Imai E, et al.: "Electroporation mediated HGF gene transfection for preserving graft survival"J Am Soc Nephrol. 13. 126A (2002)
Isaka Y、Yamada K、Imai E 等人:“电穿孔介导的 HGF 基因转染可保持移植物存活”J Am Soc Nephrol。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Mizui M, Isaka Y, Takabatake Y, et al.: "Electroporation-mediated HGF gene transfer ameliorated cyclosporin A nephrotoxicity in rat"J Am Soc Nephrol. 13. 127A (2002)
Mizui M、Isaka Y、Takabatake Y 等人:“电穿孔介导的 HGF 基因转移改善了大鼠环孢菌素 A 肾毒性”J Am Soc Nephrol。
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 通讯作者:
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  • 通讯作者:
    松尾 清一

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