破骨細胞イオンチャネルに対するカルシトニンの作用

降钙素对破骨细胞离子通道的影响

• 批准号: 06671875
• 负责人: 岡部 幸司
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Fukuoka Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06671875/
• 关键词: 破骨細胞; カルシトニン; patch clamp法; 内向き整流K^+電流; 膜電位; 脱分極; 骨吸収抑制; 新生児ラット

破骨細胞に対しカルシトニン(CT)は骨吸収抑制を示すが、この作用機構をイオン動態の面から解明するため、破骨細胞にPatch clamp法を応用し膜電位やイオン電流に対するCTの作用を検討した。破骨細胞は新生児ラットの長管骨より採集しカバーグラス上に培養後、実験に用いた。まず、Current clampモードにおいて、採集した破骨細胞の膜電位を多数例で検討した結果、その分布は-70mV付近と0mV付近のグループに二分された。また、深い膜電位のグループは脱分極刺激により容易に持続的な脱分極状態に移行した。次に、Voltage clampモードに切り換え、保持電位-70mVにおいて膜電流の構成を検討した。その結果、過分極側への電気刺激では内向き整流K^+電流(I_<Ki>)が優位に発生していたが、脱分極側では大きな電流成分の発生は認められなかった。従って、破骨細胞ではI_<Ki>が静止膜電位の形成に強く関与していると考えられた。次にこれらの電流にCT(30nM)を投与すると、I_<Ki>の電流値が平均70まで抑制され、その抑制効果は、CT除去後15分程度では部分的にしか回復が認められなかった。また、Current clampモードにおいて、このCTのI_<Ki>抑制作用が破骨細胞の膜電位をどのように変化させるかを検討したが、CT投与により膜電位は持続的な脱分極状態に移行した。以上のことより、ラット破骨細胞にはI_<Ki>が優位に存在しており、CTはこのK^+チャネルを抑制することにより、膜電位を脱分極させることが解かった。従って、CTがその作用の一貫として、持続的な膜電位変化により破骨細胞の機能を調節している可能性が示唆された。また、補助金により購入した万能倒立顕微鏡は、Patch clamp法において単離細胞を観察する目的に使用した。

The osteoclast cell cycle (CT) bone absorption inhibition assay, the bone absorption inhibition mechanism, the dynamic analysis and the Patch clamp method were used to determine the effect of the membrane potential on the flow current and the CT on the cell surface. The broken bone cell was born and the long tube bone was collected. After the broken bone was cultured, the long tube bone was used. In most of the cases, the results of the results, the distribution of Current clamp and the 70mV of the cell membrane potential in most cases were analyzed, and the 0mV was paid close to the second half of the cycle. The separation of the electric potential of the deep film and the electric potential of the deep film is very important to stimulate the transfer of the device which is easy to maintain. The secondary and Voltage clamp devices cut the voltage and maintain the potential-the film current is affected by the voltage-70mV temperature. The results show that the inward rectifier K^ + current (inward rectification K^ + current) is in the position of high-voltage voltage, and the components of inward rectifier and inward rectifier are very important. The formation of the static membrane potential of bone fracture and bone fracture cell I _ & lt;Ki> is sensitive to the formation of static membrane potential. On average, the current CT (30nM) input is 70 percent higher than that of the control group, and the average reduction effect of the current output is 70 percent. After the removal of the CT, 15 percent of the total current output is reduced. The inhibitory effect of Current clamp, Current clamp, CTI _ & CTI on bone-broken cell membrane potential, cell membrane potential, cellular membrane potential, cell membrane potential, and so on. There is a negative effect on the location of the above broken bone cells (I _ & lt;Ki>), and there is a negative effect on the location of CT, K ^, and so on. In the first place, the potential of the membrane, the broken bone cell, the possibility of failure, and the possibility of failure. The purpose of this study is to use the universal handstand microphone, the Patch clamp method, the microphone, the subvention, the subvention, the universal handstand, the microphone, the microphone.