Na^+/H^+交換輸送体の構造と機能-細胞外シグナルによる活性化のメカニズム

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動物細胞Na^+/H^+交換輸送体(NHE1)の構造・機能連関とくにその増殖因子による活性化の機構を分子レベルで調べた。我々はまず、NHE1のカルモデュリン(CaM)結合部位の変異タンパク質の解析から、i)刺激がないとき、CaM結合部位は“pHセンサー"に対して阻害ドメインとして機能すること、およびii)増殖因子によって細胞内Ca^<2+>が増加すると、CaMがNHE1に結合して阻害を解除し、NHE1は活性化されることをほぼ明らかにした。さらにpH感受性調節という機能の観点から、NHE1の細胞質ドメインは、1)aa659-815:pH感受性に影響しない領域。2)aa635-659:pHセンサーへのH+結合を阻害する“自己阻害"ドメインで高親和性にCa^<2+>/CaMを結合する領域。3)aa595-635:pH感受性に影響しないが、CaMによるNHE1の活性化の際に重要と考えられる領域。4)aa515-595:pH感受性を維持する“pH maintenance"領域という4つのサブドメインからなることを見出した。また、NHE1とNHE3(Ca^<2+>によって活性化されないアイソフォーム)およびそれぞれの細胞質ドメインを入れ替えたキメラタンパク質を解析し、NHE1のCaM結合部位の存在によってNHE3もまたCa^<2+>によって活性化されるようになることを発見した。こうして、Ca^<2+>による活性化を担うCaM結合部位はNHE1アイソフォームに特徴的であるが、それはまた阻害ドメインとしてNHE3のpHセンサーとも相互作用できることが明らかになった。