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α_2-アドレナリン受容体の調節機構

α_2-肾上腺素受体的调节机制

基本信息

批准号：
07672348
负责人：
黒瀬等
金额：
$ 1.41万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

α_2-アドレナリン受容体(α_2AR)を強制的に発現させた細胞に、受容体キナーゼ(GRK)のアンチセンス鎖を発現させ、α_2発現しているがGRKを発現していない細胞株を樹立することを試みた。しかしながら、α_2を発現させた後、次のアンチセンス鎖のGRKを発現させるため薬剤による選択を行っている間に、α_2の発現レベルが急速に消失することが明らかとなった。また、細胞にもともと存在するGRKの発現レベルがそれ程高くないために、通常のウエスタンブロットではアンチセンスDNAを発現させた後の減少量(率)を定量的に評価することが困難であった。このためうさぎの抗血清で細胞よりえられた抽出液を免疫沈降し、マウス由来の抗体で検出することを計画し、マウスよりモノクローナル抗体を作製した。また、ウイルス由来のプロモーターは細胞内で不活化されやすいこと、血清中に存在する少量のカテコラミンがα_2を脱感作させているためにα_2量が減少する等の可能性を考え合わせ、無血清培地で増殖する細胞に哺乳動物のプロモーターを持つプラスミドを用いてトランスフェクションすることを試みようとしている。このために、α_2およびGRKを発現させるそれぞれのプラスミドに薬剤選択性を与える遺伝子および哺乳動物由来のプロモーターを持つベクターを新たに作製した。

The prefabricated cells of the α _ 2-receptor (α _ 2AR), the receptor (GRK), the receptor (GRK), and the alpha-2 (α _ 2), the cell lines, the cells, the cells. After the health check, the alpha _ 2 error has been detected, and the GRK has been selected for the first time, and the alpha _ 2 error will disappear rapidly. There is a small amount (rate) of quantitative information in terms of the number of cases in which there is an increase in the number of patients, such as the number of patients, the rate, the GRK, the rate, the rate. The antiserum, the cell, the extract, the immune, the antibody, the antiserum, the extract, the antibody, the antibody. The cause of the disease, the cause of the disease, the possibility of inactivation in the cell, the presence of a small amount of α _ 2 in the serum, the loss of α _ 2 in the serum, and so on. The serum-free culture of breast-feeding animals was used to treat breast-feeding animals. Please tell me how to treat breast-feeding animals, such as the causes of breast-feeding animals, and so on.