α_2-アドレナリン受容体のプロテインキナーゼCによる調節機構

蛋白激酶C对α_2-肾上腺素受体的调节机制

• 批准号: 08672501
• 负责人: 黒瀬 等
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08672501/
• 关键词: プロテインキナーゼC; コレラ毒素; α_2-アドレナリン受容体; 百日咳毒素

3種のサブタイプよりなるα_2-アドレナリン受容体(α_<2A>,α_<2B>,α_<2C>)のうち,受容体刺激により脱感作される2種のサブタイプ(α_<2A>,α_<2B>)に対するプロテインキナーゼCの作用を検討した.受容体を発現させたCHO細胞をアゴニストで刺激すると,低濃度域でのcAMP生成の抑制に続いて,高濃度域でのcAMP生成の促進という二相性の応答を示した.α_2受容体は発現しているレベルが高くなると,GiとのカップリングのみならずGsともカップルするようになることから,それぞれGiおよびGsとカップルしているものと推測した.百日咳毒素を作用によりGiの機能を消失させた細胞で,α_2受容体とGsとのカップリングに対するPMAの効果を調べると,2種のα_2受容体を介した応答はPMAを作用させても何ら変化しなかった.これに対し,コレラ毒素を作用させGsを活性化型にさせ,受容体とGsとのカップリングを生じなくさせた場合,PMAを作用させるとα_<2B>のみならずα_<2A>受容体を介した応答も消失した.コレラ毒素を作用させない場合,α_<2A>受容体による応答はPMA処理により何ら影響されないことから,コレラ毒素処理により何らかのタンパク質が誘導されたと推測できた.事実,タンパク質合成の阻害剤シクロヘキシミドを加えるとコレラ毒素の作用は消失した.またcAMP依存性プロテインキナーゼの阻害剤H-89によりコレラ毒素作用は消失した.したがって,コレラ毒素処理により細胞内cAMP量が上昇し,何らかのタンパク質が誘導され,プロテインキナーゼCによりリン酸化されてGiと受容体のカップリングを阻害したものと結論した.

The effects of three kinds of receptor (α_<2A>,α_<2B>,α<2C><2A>_<2B>) on the response of receptors to stimuli were investigated. CHO cells are stimulated by receptor development, inhibited by cAMP production at low concentrations, promoted by cAMP production at high concentrations, and biphasic responses are shown.α_2 receptor appears in the middle of the spectrum, and Gi and Gs are projected. Pertussis Toxin (PT) acts on the Gi and the PMA, and the α_2 receptor acts on the PMA. In the case of PMA, the <2B>α_<2A>receptor is activated. In the case where the α_receptor acts on the α_receptor, the α_<2A>receptor responds to the PMA treatment, and the α_receptor responds to the PMA treatment. The effect of the toxin on the synthesis of the toxin disappears. The cAMP-dependent toxin inhibitor H-89 disappears. The increase of intracellular cAMP in response to the toxin treatment resulted in the inhibition of cellular cAMP production in Gi-2 receptors.

项目成果

Sato Y.: "Molecular characterization of pharmacological properties of T-0509 for β adrenoceptors" European Journal of Pharmacology.315. 363-367 (1996)

Sato Y.：“β 肾上腺素受体 T-0509 药理学特性的分子表征”欧洲药理学杂志.315（1996 年）。

黒瀬 等: "アドレナリン受容体とドパミン受容体" 蛋白質核酸酵素. 42. 316-326 (1997)

Kurose 等人：“肾上腺素受体和多巴胺受体”蛋白质核酸酶。42. 316-326 (1997)

Sato Y.: "Relationship between desensization and downregulation of β-adrenoceptors in cardiac tissues after prolonged in vivo infusion of T-0509" Japanese Journal of Pharmacology. (印刷中). (1997)

Sato Y.：“长期体内输注 T-0509 后心脏组织中 β-肾上腺素受体脱敏和下调的关系”《日本药理学杂志》（出版中）。

Venkatesan C.: "Cellular and subcellular distribution of α_<2A>-adrenergic receptors in the visual cortex of neonatal and adult rats" Journal of Comparative Neurology. 365. 79-95 (1996)

Venkatesan C.：“新生和成年大鼠视觉皮层中α_2A-肾上腺素受体的细胞和亚细胞分布”《比较神经学杂志》365. 79-95 (1996)。