標的指向性分子としてペプチドを用いた次世代光免疫療法薬の開発

2022年度は、まず研究実施計画に沿って、上皮成長因子受容体(EGFR)に親和性を有する環状ペプチドの合成および光感受性色素(IR700)との結合を行った。環状ペプチドは既報の方法により合成を行い、続くIR700との結合は一般的な塩基性条件下での反応により問題なく進行した。続いて、蛍光顕微鏡を用いて得られたIR700結合ペプチドのEGFR陽性がん細胞株であるA431細胞に対する結合確認実験を行った。その結果、化合物処理後の細胞においてIR700由来の蛍光は確認されなかった。この結果から本ペプチドでは結合親和性が低いことが示唆された。そこで当初の計画通りにペプチドを多価とすることを試みた。ここで、蛍光プローブに関して細胞への結合のみを確認する目的でIR700より安価で蛍光が観察しやすいフルオレセインを用いることとした。まず、先ほど用いたペプチドを2価とした化合物を合成し、フルオレセインとの結合を行った。また比較用として1価ペプチドに対してもフルオレセインの結合を行った。これら2種類の化合物の結合を先と同様に評価したところ、2価ペプチドにおいてより強い蛍光が確認されたため、光免疫療法用の薬剤になりうる可能性が高いと考えた。そこで、2価ペプチド-IR700結合体を別途合成し、A431細胞に対して薬剤を結合させた後光照射実験を行い、その治療効果を確認することとした。しかし、光免疫療法様の細胞の形態変化は観察されなかった。この結果から2価ペプチドにおいても、光免疫療法を行うには十分な結合親和性を有していない可能性が考えられた。そこで現在、親和性向上のための4価および8価ペプチドの合成を行っている。

2022年度は、まず研究実施計画に沿って、上皮成長因子受容体(EGFR)に親和性を有する環状ペプチドの合成および光感受性色素(IR700)との結合を行った。環状ペプチドは既報の方法により合成を行い、続くIR700との結合は一般的な塩基性条件下での反応により問題なく進行した。続いて、蛍光顕微鏡を用いて得られたIR700結合ペプチドのEGFR陽性がん細胞株であるA431細胞に対する結合確認実験を行った。その結果、化合物処理後の細胞においてIR700由来の蛍光は確認されなかった。この結果から本ペプチドでは結合親和性が低いことが示唆された。そこで当初の計画通りにペプチドを多価とすることを試みた。ここで、蛍光プローブに関して細胞への結合のみを確認する目的でIR700より安価で蛍光が観察しやすいフルオレセインを用いることとした。まず、先ほど用いたペプチドを2価とした化合物を合成し、フルオレセインとの結合を行った。また比較用として1価ペプチドに対してもフルオレセインの結合を行った。これら2種類の化合物の結合を先と同様に評価したところ、2価ペプチドにおいてより強い蛍光が確認されたため、光免疫療法用の薬剤になりうる可能性が高いと考えた。そこで、2価ペプチド-IR700結合体を別途合成し、A431細胞に対して薬剤を結合させた後光照射実験を行い、その治療効果を確認することとした。しかし、光免疫療法様の細胞の形態変化は観察されなかった。この結果から2価ペプチドにおいても、光免疫療法を行うには十分な結合親和性を有していない可能性が考えられた。そこで現在、親和性向上のための4価および8価ペプチドの合成を行っている。