EGFレセプターの膜貫通領域付近の遺伝子改変による情報伝達機構の解析

EGF受体跨膜区基因修饰信息传导机制分析

• 批准号: 04152045
• 负责人: 山根 和彦
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04152045/
• 关键词: EGF; EGFレセプター; 塩基性領域; 配向性; 膜; チロシンキナーゼ; 活性化; 疎水領域

申請者はヒトEGFレセプターの原形質膜の細胞質表面に存在する塩基性領域を遺伝子改変により除去することでEGFレセプターのEGFによって誘起されるチロシンキナーゼ活性が消失することを発見した。本研究では、1.この塩基性領域を除去されたEGFレセプターの詳細な特徴づけを行なった。すなわち、この変異によって、EGFレセプターのインターナリゼーションが起こっているかが変化しているかどうかを調べた。インターナリゼーションは野生型と同様に起こっていた。2.EGFレセプターの膜貫通素疎水領域をランダムな人工的な疎水領域に置換した場合EGF応答がどうなるかを調べる。人工的な疎水領域への置換という新しい試みをおこなった。変異EGFレセプターを2種類ほど作成することができた。現在、細胞にトランスフェクションを行って、機能変化を観察しようとしている。3.neu癌遺伝子産物は膜貫通疎水領域への一つの親水性アミノ酸の出現によって活性化される。申請者の考える独自の解釈として、親水性のアミノ酸の出現により膜貫通領域の実効的な長さが短くなることが分子に緊張状態をもたらし、活性化の引金となる可能性がある。本研究では、23アミノ酸残基のEGFレセプターの膜貫通領域を段階的に削除し、この領域が8、10、12、14残基などの長さの変異EGFレセプターを作成することができた。現在、細胞にトランスフェクションを行って、機能変化を観察しようとしている。

Applicants は ヒ ト EGF レ セ プ タ ー の prototype plasma membrane surface に の cytoplasm exists す る salt basic field を heritage 伝 child change - に よ り remove す る こ と で EGF レ セ プ タ ー の EGF に よ っ て induced さ れ る チ ロ シ ン キ ナ ー が ゼ disappeared す る こ と を 発 see し た. In this study, で で, 1. <s:1> the basicity domain を, excluding されたEGFレセプタ で <s:1> づけを detailed な characteristics づけを line なった. す な わ ち, こ の - different に よ っ て, EGF レ セ プ タ ー の イ ン タ ー ナ リ ゼ ー シ ョ ン が up こ っ て い る か が variations change し て い る か ど う か を adjustable べ た. The wild type と is similar to に starting from って って た た. 2. EGF レ セ プ タ ー の transmembrane element 疎 water areas を ラ ン ダ ム な artificial な 疎 に water field replacement し EGF 応 た occasions a が ど う な る か を adjustable べ る. Artificial な疎 water field へ <s:1> replacement と う う new な疎 try みをお なった なった なった. The variant EGFレセプタ レセプタ を を2 types ほ are made into する た とがで た た た た. Now, cell に ト ラ ン ス フ ェ ク シ ョ ン を line っ て, function - を 観 examine し よ う と し て い る. 3. The 伝 progeny of neu cancer remains, the 伝 membrane, penetrates the 疎 water domain, へ <s:1>, <s:1>, <s:1> hydrophilic ア, and the ノ acid <e:1> shows によって activation される. Applicants の exam え る の solution alone 釈 と し て, hydrophilic の ア ミ ノ acid の appear に よ り transmembrane domain の be sharper な long さ が short く な る こ と が molecular に tension を も た ら し, leads gold と activeness の な る possibility が あ る. This study で は, 23 ア ミ ノ acid residues の EGF レ セ プ タ ー の transmembrane domain を Duan Jie remove し に, こ の が 8, 10, 12, 14 residue な ど の long さ の - different EGF レ セ プ タ ー を made す る こ と が で き た. Now, cell に ト ラ ン ス フ ェ ク シ ョ ン を line っ て, function - を 観 examine し よ う と し て い る.

项目成果

K.Yamace,C.Toyoshima,and S.Nishimura: "Ligand-induced functions of the epidermal growth factor receptor requlre the positively charged region asymmetrically distributed actoss plasma membrane." Biochem.Biophys.Res.Comm.184. 1301-1310 (1992)

K.Yamace、C.Toyoshima 和 S.Nishimura：“表皮生长因子受体的配体诱导功能需要不对称分布的 Actoss 质膜上的带正电区域。”

山根 和彦: "新生化学実験講座2,271-282(1992) 組換え体の発現" 東京化学同化(株), 12 (1992)

山根和彦​​：“新生物化学实验课程2，271-282（1992）重组体的表达”东京化学化学株式会社，12（1992）