活性酸素より促進されるEGFレセプターのリン酸化の機構とその意義

活性氧促进EGF受体磷酸化的机制及意义

• 批准号: 06680695
• 负责人: 蒲生 忍
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06680695/
• 关键词: 活性酸素; 上皮増殖因子; レセプター; リン酸化; MAPキナーゼ; 紫外線; 過酸化水素

我々は、多重芳香キノン環を持つ植物色素カルホスチンCが扁平上皮癌細胞株NAや肺腺癌細胞株A549のEGFレセプターのSer/Thrリン酸化とインターナリゼーションを可視光依存的に促進することを見出した。EGFレセプターのリン酸化部位のホスホペプチドマップ法のよる解析から、MAPキナーゼの活性化が示唆された。そこで、カルホスチンC/可視光処理後、MAPキナーゼを免疫沈殿法で解析したところ、Tyrリン酸化が処理後5分で観察された。従って、MAPキナーゼがリン酸化により活性化され、MAPキナーゼによりEGFレセプターがリン酸化されインターナリゼーションの促進に至ると示唆された。カルホスチンCと側鎖の構造が異なる類似体カルホスチンDでもMAPキナーゼリン酸化、EGFレセプターリン酸化が見られたので、一連の応答は両物質に共通の構造、多重芳香キノン環が可視光依存的に活性酸素(一重項酸素)を発生させることに起因すると考えられた。MAPキナーゼのTyrリン酸化が、カルホスチンによるMAPキナーゼの直接の活性化か、あるいはMAPキナーゼをリン酸化する酵素の活性化かについて検討中である。さらに、各種の活性酸素によるEGFレセプターリン酸化の促進について検討した。一重項酸素及びスーパーオキシドを発生させる紫外線(短波長254nm)照射では、EGFレセプターのSer/Thrのリン酸化の促進と、鉄キレート剤ジピリジルによる抑制、MAPキナーゼのTyrリン酸化が観察された。一方、過酸化水素処理では、EGFレセプターの少なくとも4残基のTyrリン酸化の促進と塩化マンガンによる抑制が観察されたが、MAPキナーゼのリン酸化は見られなかった。レセプターTyrリン酸化はEGFの結合に伴うTyrリン酸化よりも顕著で、レセプターキナーゼ自身による自己リン酸化か、またレセプターと会合するTyrキナーゼによるかを検討中である。これらの結果から、活性酸素が未同定の蛋白キナーゼを含め増殖因子レセプターを介する細胞内シグナル伝達系の因子を細胞内標的とすると考えられた。さらに、発生する活性酸素の分子種や発生の細胞内局在の差異により異なる細胞応答を誘導することを示唆している。

In our environment, we maintain plant pigments, pigments, adenocarcinomas, NA, lung adenocarcinoma cell lines, A549 EGF adenocarcinomas, lung adenocarcinoma cell lines, Ser/Thr cells, acidified cells, phospholipid cells, and light-dependent cell lines. The acidified part was acidified by EGF. The method was analyzed and the activation of MAP was detected. After light treatment, MAP immunoprecipitation, Tyr acidification and acidification, 5 minutes after treatment. Acidify, MAP, activate, MAP, activate, acidify, acidify, promote, promote and instigate. The equipment is similar to the one in which the chemical is acidified, the MAP is acidified, the chemical is acidified, the chemical is common, and the multiple aromatics environment is light-dependent. The cause of the chemical reaction is investigated. MAP, MAP, Tyr, acidify, activate, acidify, activate, activate, acidify, acidify, acidify, All kinds of active acids are used to promote the acidification of carbon dioxide and carbon dioxide in EGF solution. Monosodium tryptophan and triiodothyronine are sensitive to UV irradiation (short-wavelength 254nm), EGF to Ser/Thr acidification promotion, to the inhibition of thermal degradation, and to Tyr acidification to observe the effect of UV radiation. On the one hand, the acidified water, EGF, Tyr, acid, acid and acid. The combination of acidizing Tyr and EGF is accompanied by the combination of Tyr acidizing and acidizing. The results show that the active acid is not the same as that of the protein. There is an introduction to the cytokines in the cells. The molecular weight of the active acid molecule, the active acid molecule and the active acid molecule.

项目成果

Gamou,S.: "Calphostin-C stimulates epidermal growth factor receptor phosphorylation and internalization via light-dependent mechanism" Journal of Cellular Physiology. 158. 151-159 (1994)

Gamou,S.：“Calphostin-C 通过光依赖性机制刺激表皮生长因子受体磷酸化和内化”《细胞生理学杂志》。

Mitsumata,M.: "Response of atherosclerotic intimal smooth muscle cells to epidermal growth factor in vitro" Arteriosclosis and Thrombosis. 14. 1364-1371 (1994)

Mitsumata，M.：“动脉粥样硬化内膜平滑肌细胞对体外表皮生长因子的反应”动脉粥样硬化和血栓形成。

Gamou,S.: "Light-dependent induction of early-response gene expression by calphostin-C" Cell Structure and Function. 19. 195-200 (1994)

Gamou,S.：“calphostin-C 早期反应基因表达的光依赖性诱导”细胞结构和功能。

Hashimoto,T.: "Regulation of translocation of the desmoyokin/AHNAK protein to the plasma membrane in keratinocytes by protein kinase C" Experimental Cell Research. in press (1995)

Hashimoto,T.：“蛋白激酶 C 对角质形成细胞中桥粒肌蛋白/AHNAK 蛋白易位至质膜的调节”实验细胞研究。

Chen,J.: "A novel gene delivery system using EGF receptor-mediated endocytosis" FEBS Letters. 338. 167-169 (1994)

Chen, J.：“一种利用 EGF 受体介导的内吞作用的新型基因传递系统” FEBS Letters。