蝸牛発生の制御機構解明

阐明耳蜗发育的控制机制

基本信息

批准号：
24890099
负责人：
楯谷智子
金额：
$ 1.91万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012-08-31 至 2014-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は哺乳類蝸牛を研究対象とし、実験はすべてマウスを用いておこなった。蝸牛感覚上皮の発生の分子メカニズムの解明のため、まず生体内および試験管内の培養蝸牛においてシグナル伝達系を複数操作し、感覚上皮発生各時期における関与・相互作用を調べた。操作するシグナル伝達系はNotchシグナル伝達系、ヘッジホッグシグナル伝達系、FGFシグナル伝達系、TGFβ/BMPシグナル伝達系であり、①生体内での操作：特定の遺伝子を時期・部位特異的に遺伝子を欠損または過剰発現させるコンディショナルノックアウトマウスまたはコンディショナル持続発現マウス、②試験管内の培養蝸牛での操作：シグナル伝達系の関連遺伝子を過剰発現させるプラスミドベクターを電気穿孔法にて培養蝸牛に導入、③試験管内の培養蝸牛での操作：培地にシグナル伝達を促進あるいは阻害する薬品又はタンパク質添加、を組み合わせた。平成2４年度には、感覚上皮前駆細胞において遺伝子組み替えが起こるマウスを用いて、蝸牛感覚上皮が発生する過程のうち感覚上皮前駆細胞から有毛細胞・支持細胞に分化する段階につき、Notchシグナル伝達系とヘッジホッグシグナル伝達系、ヘッジホッグシグナル伝達系とFGシグナル伝達系F、Notchシグナル伝達系とFGFシグナル伝達系、Notchシグナル伝達系とTGFβ/BMPシグナル伝達系の操作を行なった。このうちNotchシグナル伝達系とヘッジホッグシグナル伝達系、ヘッジホッグシグナル伝達系とFGFシグナル伝達系の組み合わせで得られた結果については論文にまとめ投稿中である。また、薬剤誘発性の遺伝子組み替えを感覚上皮前駆細胞～支持細胞に分化しつつある細胞～特定のサブタイプの支持細胞の任意の段階で起こすことの出来るマウスを導入した。平成25年度以降にはこのマウスも用いて研究を進める予定である。

这项研究的重点是哺乳动物的耳蜗，所有实验均使用小鼠进行。为了阐明耳蜗感觉上皮发育的分子机制，首先在体内和体外培养的耳蜗中操纵多个信号转导系统，以检查感觉上皮发育的每个阶段的参与和相互作用。要设计的信号转导系统是Notch信号转导系统，刺猬信号转导系统，FGF信号转导系统和TGFβ/BMP信号转导系统。体内操作：有条件的敲除小鼠或有条件表达的小鼠，导致特定基因在时间和特定基因中缺失或过表达； 2）体内操作：过表达信号转导系统相关基因的质粒载体使用电穿孔引入培养的耳蜗中； 3）体内操作：将促进或抑制信号转导的药物或蛋白质添加到培养基中。 2012年，使用感觉上皮祖细胞进行遗传重组的小鼠被用来操纵Notch信号系统和刺猬信号系统，刺猬信号系统以及FG信号系统F，Notch信号系统和FG信号系统，Notch信号系统，Notch信号系统和TGFβ/BMP信号系统的感觉，并在fgfβ/bmp信号系统中，tgfβ/bmp信号系统的感觉不同祖细胞进入毛细胞和支撑细胞。从Notch信号系统，刺猬信号系统以及刺猬信号系统和FGF信号系统的组合中获得的结果现已在纸张中编译和提交。此外，在感觉上皮祖细胞的任何阶段都有能够进行药物诱导的遗传重组的小鼠，他们引入了开始分化为支持细胞以支持特定亚型细胞的细胞。计划从2013年开始使用该鼠标进行研究。