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精子形成におけるストレスと精細胞死の関連および分子機構の解明

阐明精子发生过程中应激与精子细胞死亡的关系及分子机制

基本信息

批准号：
15591670
负责人：
小島聡子
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15591670/
关键词：
精子形成ストレスアポトーシス BCL6 MAPK ノックアウトマウス

项目摘要

男性不妊症の原因として、無精子症や乏精子症が挙げられる。近年の分子生物学的研究の飛躍的向上に伴い精子の分化発達のメカニズムが徐々に解明されている。しかし、精細胞死の明らかな機序はいまだ不明である。精巣におけるアポトーシス関連遺伝子としてBax, Bcl-2,Bcl-x、また、精巣分化に必須の遺伝子としてHSP 70-2などが報告されているが精巣分化のコントロールにおける遺伝子機能とその相互関係については、完全には解明されていない。本研究では、ストレスの与える精巣への影響を分子生物学的に解明することを目的とした。(1)Bc16ノックアウトマウスと正常マウスの精巣から凍結切片を作成し、減数分裂中期の精母細胞、パキテン細胞を、マイクロダイセクション装置を用いて分離採取する技術を習得した。さらに、それらの標本からPCR法にて精細胞のlabeled-cDNAを作成した。今後、マイクロアレイを用いてそれぞれの分化階段の細胞における遣伝子発現の比較検討を行う予定である。(2)熱ストレスを与えた精細胞におけるアポトーシスの伝達経路をWestern blotを用いて検討した。Bax, MAPK P38のPhospholylationを認めた。BCL2,p53については明らかな差を認めなかった。今後はさらに、マイクロダイセクション装置を用いて精巣凍結標本から精細胞を分離採取し、精母細胞におけるアポトーシス関連遺伝子の発現の変化をPCR法を用いて検討する予定である。

Causes of male infertility, azoospermia and azoospermia In recent years, the research of molecular biology has made great progress, which is accompanied by the development of sperm differentiation. The mechanism of sperm cell death is unknown. The essential genes for sperm differentiation are Bax, Bcl-2,Bcl-x, Bcl-7, Bcl-8, Bcl-9, Bcl-9, Bcl-9 The purpose of this study is to clarify the relationship between molecular biology and the development of molecular biology. (1) Bc16 is used to prepare frozen sections of spermatocytes and spermatocytes in metaphase of meiosis. The labeled-cDNA of sperm cells was prepared by PCR. In the future, we will discuss the comparative development of the cells in the differentiation stage. (2)The heat and humidity of the sperm cells were measured by Western blot. Bax, MAPK P38 and Phospholylation. BCL2,p53. In the future, we will use the PCR method to detect the development of sperm related genes in sperm cells isolated from frozen sperm cells.