マウス胚保未分化細胞での効率より遺伝子トラップ法の開発

开发小鼠胚胎未分化细胞中更高效的基因捕获方法

• 批准号: 04206207
• 负责人: 相沢 慎一
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04206207/
• 关键词: ES細胞; ジーントラップ; 神経発生; PCR; 5'-RACE; 3'-RACE

マウス変異ES細胞ライブラリーの作成を念傾にES細胞でのジーントラップ法の開発を行った。(1)マーカー遺伝子導入体の中でジーントラップを起していないものの頻度を減少させるためのメガティブ選別ベッターの開発を行い、ポリAゲット等によりその頻度を40%に高めることが出来た。(2)マーカー遺伝子としてのβ-Galの発型特異性を指標に神経系で特異的に発現するジーントラップクローンの同定を進めた。同定したクローンについては子孫マウスを作成し、また5'RACE法による押入部位遺伝子産物の同定を行った。(3)マーカー遺伝子導入体中でのジーントラップ体を3'RAEE法により富便に同定し得ることを明らかにした。本法によればマーカー遺伝子の発現検索によらずジーントラップ体をES細胞の段階で同定し得る。同定したクローンについて子孫マウスの作成、遺分子構造の氾守を行った。

The development of ES cell culture is under way. (1)The frequency of the introduction of the gene is reduced by 40%. (2)The development of β-Gal in the brain is characterized by the development of β-Gal in the brain. 5'RACE method is used to determine the identity of the product of the injection site. (3)3'RAEE method is used to determine whether a person is rich or not. This method can be used to detect the development of ES cells. In the same way, the generation and evolution of molecular structures are carried out.

项目成果

Fictay Y,dt al: "Preloukewic byperplonyeration of tuilieeage eewatopaietic cells in tuensgenic wice" Sep,Hewatal.

Fictay Y，dt al：“Tuensgenic wice 中 tuilieeage eewatopaietic 细胞的 Preloukewic byperplonyeration”Sep，Hewatal。

Hivabayshi,Y,et al: "Hemotopoietic ueoplasms in lettally insadiatod mice vepopulated with" Sep,Heuatol. 20. 167-172 (1992)

Hivabayshi，Y，等人：“充满了”Sep，Heuatol 的致命 insadiatod 小鼠的造血细胞质。

Saga,Y,et al: "Mice liuelop nounally without teuascin." Genes & doi. 6. 1821-1833 (1992)

Saga，Y，et al：“小鼠 liuelop 名义上没有 Teuascin。”

Fruta,Y.et al: "Degeueaten of skeletal and caideac muscle in c-uhb tuceussence wice" Teusgenie Reseaid.

Fruta，Y.et al：“c-uhb tuceussence wice 中骨骼肌和 caideac 肌的退化”Teusgenie Reseaid。

Haita,K,et al: "A Nouce tuossne kinase,bye,eepressol in muine enbreonie stom calls," Bioclem Bioply Res Gmmen.189. 1747-1753 (1982)

Haita,K,et al：“Nouc​​e tuossne 激酶，再见，小鼠 enbreonie stom 呼叫中的浓缩醇”，Bioclem Bioply Res Gmmen.189。