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有機化学的アプローチによるイノシトールリン酸の生理機能解明

使用有机化学方法阐明磷酸肌醇的生理功能

基本信息

批准号：
04220109
负责人：
渡辺裕
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

イノシトール1,4,5-三リン酸(IP_3)の2位あるいは3位を修飾した類縁体の合成とその生物化学的利用について検討した。まず、2位の水酸基をアミノベンゾイル化した類縁体の合成ルートとして、ホスホニウム塩を活性種とする新しいリン酸化法を見いだし、これによって効率的に目的の合成が達成できることとなった。この類縁体に、可視化のためのビオチン部と光分解性基としたアジド基あるいはトリフルオロメチルジアジリニル基を同時に有するリジン誘導体あるいはサリチル酸誘導体をジアゾカップリングで統合させ光親和性標識化合物の合成を完成した。これらとIP_3代謝酵素を混合し光を照射するとタンパクのある部分が標識されることが明らかとなった。今後、この手法で得られる標識部位の特定を行うことにより活性部位の探索が進められるものと期待される。同様に、上記の類縁体を利用してIP_3を樹脂に固定化し、アフィニティークロマトグラフィーを行いIP_3親和性タンパクの単離精製を試みたところ、PLCδと共にこれまで報告されていない新しいタンパク質を発見することができた。このものの機能を中心に種々性質を現在調査しいる。また、前者の酵素もIP_3との親和性の高さが示唆され、生理機能との関連で興味がもたれる。一方、3位ベンゾイルIP_3の合成に成功し、そのものの生物活性を調べたところ、2位類縁体とは異なり5-ホスファターゼに対してのみ活性のあることが明らかとなった。この性質を利用して特定のタンパクの精製や活性部位の検索ができるものと期待される。なお本研究の中で、上述のリン酸化法を検討中に、トリアルキルホスファイトのエステル交換反応がテトラゾールによって触媒を受ける事実を見いだし、同時に交換反応の中間体としてホスホラン誘導体が存在することをNMRの観測により証明した。

The synthesis and biochemical utilization of 1,4,5-trinitrotoluene (IP_3) modified at position 2 and 3 A new method for the synthesis of a class of compounds containing 2-amino-2-carboxylic acid groups was developed. The synthesis of photoaffinity labeled compounds was completed by combining photoaffinity groups with photoaffinity inducers. IP_3 metabolic enzymes are mixed with light. In the future, the method of identification of specific sites, the exploration of active sites, and the expectation In the same way, the IP_3-like substance was immobilized on the resin, and the IP_3 affinity was purified by HPLC. The function of the mobile phone is the center of the investigation. The enzyme IP_3 affinity of the former is high, and the physiological function of the former is interesting. The synthesis of IP_3 was successful, and the biological activity of IP_3 was regulated. The biological activity of IP_3 was regulated by IP_3. The properties of these compounds can be used to refine the active site. In this study, the above method was used to investigate and verify the existence of the intermediate and inducer of the exchange reaction.