細胞増殖におけるプロテインキナーゼC群の機能の分子生物学的解析

蛋白激酶C基团在细胞增殖中作用的分子生物学分析

• 批准号: 04253239
• 负责人: 大野 茂男
• 金额: $ 13.44万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04253239/
• 关键词: プロテインキナーゼC; PKC関連酵素; ホルボールエステル; 転写活性化; ジアシルグリセロール

昨年度来の研究から、我々は線維芽細胞への各PKC分子種の高発現系と転写応答のレポーター遺伝子とを用いて、生きた細胞内でのPKCの活性化状況をモニターする系を始めて開発した。この系を用いて本年度は新たに_aPKCの活性化をもモニター出来る事を確認した。この系を用いて、_cPKC、_nPKC、_aPKCという3種のPKC亜群の各々の分子種について、その活性化機構を解析することが始めて可能となった。そこで本年度はこの点を集中的に解析し、PKCの生理的な重要性の発見以来約10年ぶりともいえる画期的な発見をすることが出来た。それは一言でいうとPKCの活性化経路には、従来から知られていたPLC/DAGを介する経路以外に、PI3キナーゼを介する全く新しい経路が関わっているという点である。チロシンキナーゼ型受容体の代表格と言えるPDGF受容体のシグナル異変体や、PI3キナーゼサブユニットの発現系を用いて、各PKC分子種の活性化に関わる経路を生きた細胞を用いて分子生物学的に始めて解析し、従来のPLCを介した経路が_cPKC、_nPKCの活性化に関わることを確認すると同時に、PI3キナーゼを介する経路がこれらの活性化に関わることを始めて見いだした。更に、_aPKCの活性化にはPLCではなく、PI3キナーゼが関わることを始めて見いだした。

Last year to study の か ら, I 々 は line d bud cells へ の PKC molecules each kind of high の 発 department と now planning to write answer 応 の レ ポ ー タ ー posthumous son 伝 と を with い て, raw き た intracellular で の PKC の activation condition を モ ニ タ ー す る is beginning を め て open 発 し た. The る を is the る event を that was derived from the <s:1> new たに_aPKC <s:1> activation を モニタ モニタ モニタ of the を て this year and confirmed as た た. こ の is を with い て, _cPKC, _nPKC, _aPKC と い う three の PKC 亜 group の each 々 の molecules of に つ い て, そ の activeness institutions を parsing す る こ と が beginning め て may と な っ た. そ こ で this year は こ の point を concentrated に analytical し, PKC の physiological importance な の 発 see about 10 years since ぶ り と も い え る painting period な 発 see を す る こ と が た. A word で そ れ は い う と PKC の activeness 経 road に は, 従 か ら know ら れ て い た PLC/DAG を interface す る 経 road outside に, PI3 キ ナ ー ゼ を interface す る く all new し い 経 road が masato わ っ て い る と い う point で あ る. チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ type by let body の と word says え る PDGF by let body の シ グ ナ ル vision - や, PI3 キ ナ ー ゼ サ ブ ユ ニ ッ ト の 発 practice while department を い て, each kind of PKC molecules の activeness に masato わ る 経 road を raw き た cells を using い て in molecular biology に beginning め て parsing し, 従 の PLC を interface し た 経 road が _cPKC, _ NPKC の activeness に masato わ る こ と を confirm す る と に, PI3 キ ナ ー ゼ を interface す る 経 road が こ れ ら の activeness に masato わ る こ と を beginning め て see い だ し た. More に, _aPKC の activeness に は PLC で は な く, PI3 キ ナ ー ゼ が masato わ る こ と を beginning め て see い だ し た.

项目成果

Hirai,S.,Izumi,Y.,Higa,K.,Mizuno,K.,Osada,S.,Kaibuchi,K.,Suzuki,K.and Ohno,S.: "Ras-dependent signal transduction is indispensable but not sufficient for the activation of AP1/Jun by PKCdelta・" EMBOJ.(in press).

Hirai, S.、Izumi, Y.、Higa, K.、Mizuno, K.、Osada, S.、Kaibuchi, K.、Suzuki, K. 和 Ohno, S.：“Ras 依赖性信号转导是必不可少的，但并非如此足以通过 PKCdelta・" EMBOJ 激活 AP1/Jun。（正在印刷中）。

Osada,S.,Hashimoto,Y.,Nomura.,S,Konnno.,Y.,Chida,K.,Tajima,O.,Kubo,K.,Akomoto,K.,Koizumo,H.,Kitamura,Y.,Suzuki,K.,Ohno.,S.and Kuroki,T.: "Predominant expression of novel protein kinase C η,aCa2+-independent isoform of protein kinse C in epithelial tissues

大田 S.、桥本 Y.、野村 S、今野 Y.、千田 K.、田岛 O.、久保 K.、赤本 K.、小泉 H.、北村 Y. ,Suzuki, K., Ohno., S. 和 Kuroki, T.：“上皮组织中新型蛋白激酶 C η,aCa2+ 独立亚型的蛋白激酶 C 的主要表达

大野茂男: "細胞増殖と疾患-細胞増殖の細胞内シグナル伝達機構" Mebio,メジカルビュー社. 10,6. 30-38 (1993)

Shigeo Ohno：“细胞增殖和疾病 - 细胞增殖的细胞内信号转导机制”Mebio，Medical View Inc. 10,6 (1993)。

Akita,Y.,Ohno,S.,Yajima,Y.,Konno,Y.,Saido,T.C.,Mizuno,K.,Chida,K.,Osada,S.,Kuroki,T.,Kawashima,S.and Suzuki,K.: "Overproduction of aCa_+-independent protein kinase C isozyme,_nPKC epsilon,increases the secretion of protein from thyrotropin-releasing hormo

秋田Y.、大野S.、矢岛Y.、绀野Y.、斋藤T.C.、水野K.、千田K.、长田S.、黑木T.、川岛S.、铃木

Hata,A.,Akita,Y.,Suzuki,K.and Ohno,S.: "Functional divergence of protein kinase C(PKC)family members:PKC_<gamma> differs from PKC alpha,betaII,and _nPKC epsilon in its competence to mediate 12-O-tetradecanoyl phorbol 13-acetate(TPA)-responsive transcripti

Hata,A.、Akita,Y.、Suzuki,K. 和 Ohno,S.：“蛋白激酶 C(PKC) 家族成员的功能差异：PKC_<gamma> 与 PKC α、βII 和 _nPKC epsilon 的能力不同