細胞増殖におけるプロテインキナーゼC群の機能の分子生物学的解析

蛋白激酶C基团在细胞增殖中作用的分子生物学分析

• 批准号: 04253239
• 负责人: 大野 茂男
• 金额: $ 13.44万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04253239/
• 关键词: プロテインキナーゼC; PKC関連酵素; ホルボールエステル; 転写活性化; ジアシルグリセロール

昨年度来の研究から、我々は線維芽細胞への各PKC分子種の高発現系と転写応答のレポーター遺伝子とを用いて、生きた細胞内でのPKCの活性化状況をモニターする系を始めて開発した。この系を用いて本年度は新たに_aPKCの活性化をもモニター出来る事を確認した。この系を用いて、_cPKC、_nPKC、_aPKCという3種のPKC亜群の各々の分子種について、その活性化機構を解析することが始めて可能となった。そこで本年度はこの点を集中的に解析し、PKCの生理的な重要性の発見以来約10年ぶりともいえる画期的な発見をすることが出来た。それは一言でいうとPKCの活性化経路には、従来から知られていたPLC/DAGを介する経路以外に、PI3キナーゼを介する全く新しい経路が関わっているという点である。チロシンキナーゼ型受容体の代表格と言えるPDGF受容体のシグナル異変体や、PI3キナーゼサブユニットの発現系を用いて、各PKC分子種の活性化に関わる経路を生きた細胞を用いて分子生物学的に始めて解析し、従来のPLCを介した経路が_cPKC、_nPKCの活性化に関わることを確認すると同時に、PI3キナーゼを介する経路がこれらの活性化に関わることを始めて見いだした。更に、_aPKCの活性化にはPLCではなく、PI3キナーゼが関わることを始めて見いだした。

从去年以来的研究中，我们开发了一个系统，该系统使用成纤维细胞中每个PKC分子物种的高表达系统和一个记者基因进行转录反应来监视活细胞中PKC的激活状态。使用此系统，我们确认今年可以监视_apkc的激活。使用该系统，首次有可能分析PKC亚组的三种分子种类的激活机制：_CPKC，_NPKC和_APKC。因此，今年我们已经深入分析了这一点，并进行了开创性的发现，这可以说是自PKC生理重要性以来大约10年来的第一次。简而言之，除了先前已知的PLC/DAG介导的途径外，PKC的激活途径涉及通过PI3激酶的全新途径。使用代表酪氨酸激酶型受体的PDGF受体信号变异和PI3激酶亚基的表达系统，我们首先分析了活细胞中每个PKC分子种类激活所涉及的途径，并确认了常规PLC介导的途径与Quccc and we and we and __cpkc and _cpkc and _cccc and _cccc and _cccc and _cccc and _cccc and _cccc and _cccc and _cccc and _cccc and _cccc and _cccc and _cccc and _cccc and _cccc and。 PI3激酶介导的途径与这些途径有关。此外，我们首先发现PI3激酶而不是PLC参与_apkc的激活。

项目成果

Akita,Y.,Ohno,S.,Yajima,Y.,Konno,Y.,Saido,T.C.,Mizuno,K.,Chida,K.,Osada,S.,Kuroki,T.,Kawashima,S.and Suzuki,K.: "Overproduction of aCa_+-independent protein kinase C isozyme,_nPKC epsilon,increases the secretion of protein from thyrotropin-releasing hormo

秋田Y.、大野S.、矢岛Y.、绀野Y.、斋藤T.C.、水野K.、千田K.、长田S.、黑木T.、川岛S.、铃木

Hata,A.,Akita,Y.,Suzuki,K.and Ohno,S.: "Functional divergence of protein kinase C(PKC)family members:PKC_<gamma> differs from PKC alpha,betaII,and _nPKC epsilon in its competence to mediate 12-O-tetradecanoyl phorbol 13-acetate(TPA)-responsive transcripti

Hata,A.、Akita,Y.、Suzuki,K. 和 Ohno,S.：“蛋白激酶 C(PKC) 家族成员的功能差异：PKC_<gamma> 与 PKC α、βII 和 _nPKC epsilon 的能力不同

Hata,A.,Ohno,S.,and Suzuki,K.: "Transcriptional activation of the gene for the large subunit of human m-calpain by 12-o-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate." FEBS Letters. 304. 241-244 (1992)

Hata,A.、Ohno,S. 和 Suzuki,K.：“12-o-十四烷酰基-佛波醇-13-乙酸酯对人类 m-钙蛋白酶大亚基基因的转录激活。”

Ohno,S.: "Diversity and specificity of multiple protein kinase C." Progress in Endocrinology,Parthenon Press.,

Ohno,S.：“多种蛋白激酶 C 的多样性和特异性。”

大野茂男: "細胞増殖と疾患-細胞増殖の細胞内シグナル伝達機構" Mebio,メジカルビュー社. 10,6. 30-38 (1993)

Shigeo Ohno：“细胞增殖和疾病 - 细胞增殖的细胞内信号转导机制”Mebio，Medical View Inc. 10,6 (1993)。