細胞増殖におけるプロティンキナ-ゼC群の機能の分子生物学的研究

蛋白激酶C群在细胞增殖中作用的分子生物学研究

• 批准号: 01614535
• 负责人: 大野 茂男
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01614535/
• 关键词: 細胞増殖; プロテンキナ-ゼC; カルシウムイオン; ホルボ-ルエステル; 転写調節

前年度までにPKC群の各分子種についてCOS細胞等を用いたcDNA発現系を利用して生化学的諸性質の検討を行なってきた。本年度はこれをさらにおし進めキナ-ゼ活性の基質的異性、ホルボ-ルエステルに対する特異性、細胞膜との相互作用といった諸性質において特にPKCとnPKCεとで大きな質的な差のある事をみいだした。さらにcDNAを用いてPKC分子種をover exprossionさせた細胞内での各分子種の動態を検討した所、nPKCεに関しても細胞膜への移行とdown-regulationとが観察された。ところでDG産生を引き起こしPKCを活性化する事が知られる一群の増殖因子(コンピテンス因子)は同時に、一群の遺伝子の活性化を引き起す事が知られている。すなわちPKCの細胞増殖に対する作用の一つはこの遺伝子活性化能にあると考えられる。そこで種々のTPA応答性シスアクティング因子の活性化の及ぼす各PKC,nPKC分子種の関与を解析するin vivo系を開発した。この系を用いた解析の結果PKC,nPKC共に遺伝子活性化能を示す事が明らかとなった。すなわちPKCが実際に遺伝子活性化へのシグナル伝達系に関わっている事が確認された。同時にこの系を利用した種々の生理的シグナルに対する各PKC分子種の応答をモニタ-する事が可能となった。そしてPKCと同様nPKCとも増殖因子の刺激に応答する事が明らかとなった。一方各分子種の種々のシスアクティング因子に対する効果を検討した結果、各PKC,nPKC分子種がその転写活性化能について異なった特異性を示す事が明らかとなった。すなわち、PKC,nPKC分子は各々異なった生化学的性状を示すものの、DGやホルボ-ルエステルの細胞内受容体として各々異なったシグナル伝達に関与している事がin vitroのcell-free系、in vivoの生細胞を用いた系を用いて最終的に証明された。

Before the annual ま で に PKC group の each molecule of に つ い て COS cells such as を with い た cDNA 発 department を now use し て biochemical nature of the の 検 line for を な っ て き た. This year は こ れ を さ ら に お し into め キ ナ - ゼ の active matrix of the opposite sex, ホ ル ボ - ル エ ス テ ル に す seaborne る specificity and cell membrane と の interaction と い っ た the nature に お い て, に PKC と nPKC epsilon と で big き な qualitative poor な の あ る matter を み い だ し た. さ ら に cDNA を with い て PKC molecules of を over exprossion さ せ た intracellular で の various molecular dynamic を の beg し 検 た, nPKC epsilon に masato し て も membrane へ の transitional と down - regulation と が 観 examine さ れ た. Production と こ ろ で DG を lead き こ し PKC を activeness す る matter が know ら れ る a group of の raised colonization factor (コ ン ピ テ ン ス factor) は に at the same time, a group of の but 伝 の activeness を す things which bring き が know ら れ て い る. The effect of すなわちPKC <s:1> cell proliferation に on する is えられる - the activation energy of 伝 offspring in <s:1> 伝 えられる cultural heritage can be examined えられる. そ こ で kind 々 の TPA 応 a sexual シ ス ア ク テ ィ ン グ factor の activity の and ぼ す PKC, nPKC molecules of の masato and analytical す を る in vivo started を 発 し た. こ の is を with い た parsing の result PKC, nPKC altogether に heritage can を shown す 伝 son activeness が Ming ら か と な っ た. す な わ ち PKC が be interstate に heritage 伝 son activeness へ の シ グ ナ ル 伝 da system に masato わ っ て い る が sure さ れ た. At the same time に こ の is を using し た kind 々 の physiological シ グ ナ ル に す seaborne る PKC molecules each kind of の 応 answer を モ ニ タ - す が る things may と な っ た. そ し て PKC と with others nPKC と も raised の colonization factors stimulate に 応 answer す る matter が Ming ら か と な っ た. Side each molecular species の 々 の シ ス ア ク テ ィ ン グ factor に す seaborne る unseen fruit を beg し 検 た results, various PKC, nPKC molecules of が そ の planning can write activeness に つ い て different な っ た specificity を が す things in Ming ら か と な っ た. す な わ ち, PKC, molecular は 々 each different な nPKC っ た を biochemical traits and shown す も の の, DG や ホ ル ボ - ル エ ス テ ル の by volume in the cell body と し て 々 each different な っ た シ グ ナ ル 伝 da に masato and し て い が る things in vitro の cell - free, in The final に proof of された of vivo vivo vivo cells by を た and を by て て.

项目成果

Akiko Hata: "Direct evidence that the Kinase activity of protein Kinase C is involved in transcriptional activaton through a TPA-responsive element." FEBS Lett.252. 144-146 (1989)

Akiko Hata：“直接证据表明蛋白激酶 C 的激酶活性通过 TPA 响应元件参与转录激活。”

大野茂男: "生化学" 日本生化学会, (1989)

大野茂夫：《生物化学》日本生化学会，（1989）

Hitoshi Wada: "Cell-type-specific expression of the genes for the protein Kinase C family." Biochem.Biophys.Res.Commun.165. 533-538 (1989)

Hitoshi Wada：“蛋白激酶 C 家族基因的细胞类型特异性表达。”

大野茂男: "分子生物学の進歩、細胞増殖・細胞運動" 丸善, (1989)

Shigeo Ohno：“分子生物学、细胞增殖和细胞运动的进展”Maruzen，（1989）

Yasuhiko Konno: "Enzymatic Properties of a phorbol ester receptor/protein kinase distanthy related to the protein kinase C family." J.Biochem.106. 673-678 (1989)

Yasuhiko Konno：“与蛋白激酶 C 家族相关的佛波酯受体/蛋白激酶的酶学特性。”