ナンセンスmRNA分解系の特異的な抑制による変異遺伝子機能回復の可能性の検討

通过特异性抑制无义 mRNA 降解系统来检查恢复突变基因功能的可能性

• 批准号: 14657610
• 负责人: 大野 茂男
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657610/
• 关键词: mRNA; mRNA分解; 遺伝子変異; ナンセンス変異; プロテインキナーゼ; 阻害剤; コラーゲン; 筋ジストロフィー症

遺伝子変異の1/4程度はナンセンス変異である。ナンセンス変異はトランケート型のタンパク質をコードするが、実際にはこのようなタンパク質が検出されない。これはナンセンス変異を有するmRNAが選択的に分解されていることに起因する。この現象は、nonsense mediated mRNA decay, NMDと呼ばれ、修復を逃れた遺伝子変異に由来する異常タンパク質に起因する毒性から細胞を守る、細胞の防御機構の一つである。近年、このNMDという現象やその分子機構の解析が始まっているが、そのほとんどは酵母、線虫の変異体の解析に留まっており、特に高等生物におけるその生理的意義や医学・生命科学への応用性に関しては、ほとんど不明である。私たちはプロテインキナーゼhSMG-1が、NMDに必須であること、これを阻害するとNMDを抑制できることを見いだし、ほ乳類におけるNMDの役割の検討が始めて可能となった。本研究では、NMD阻害が、1)実際にトランケート型のタンパク質の合成を介して、機指的な分子の合成を引き起こすこと。2)NMD阻害とナンセンス抑制とを同時に起こすことにより、全長のタンパク質の合成を引き起こすこと。3)これが機能回復に至るか。の3点を検証することを目的とした。Ullrich's病は、Type Vlcollagenのナンセンス変異により、筋ジストロフィー様の重度の症状を来す。この疾患の原因はおそらく基底膜の異常に起因し、患者由来の繊維芽細胞は、試験管内できわめてはがれやすい。この細胞にNMD阻害剤を加えると、普段合成されないトランケート型のタンパク質が実際に合成されることを確認した。さらに、ここで合成されたトランケート型のType Vlcollagen分子が、細胞と基質との接着を改善させることを確認した。少なくともこの患者の症状を改善する対処法の唯一の候補となりうることが明らかとなった(この研究は、水俣病研究センターの臼杵博士と、鹿児島大学神経内科との共同研究である)。

The remaining 1/4 degree of the original child is different.ナンセンス変different はトランケートtype のタンパクquality をコードするが、実记にはこのようなタンパク性が検出されない.これはナンセンス変isoを有するmRNAが选択的にdegradationされていることにcauseする.このphenomenon, nonsense mediated mRNA decay, NMD is called, repaired, escaped, left 伝子変different, origin, abnormal, タンパク性にcause, toxicity, cells, defense mechanism, cells, defense mechanism, one, one, and one. In recent years, analysis of the molecular structure of the NMD phenomenon, analysis of the molecular mechanism of the phenomenon, and analysis of allosomes of yeast and nematodes have been carried out. The significance of the physiology of special higher organisms and the practicality of medical and life sciences are unknown. Private たちはプロテインキナーゼhSMG-1が, NMD にnecessary であること, これを hinder するとN MDをSuppressionできることを见いだし、ほmilkにおけるNMDのservice cutの検が开めてpossibleとなった. In this study, NMD hinders, 1) にトランケート-type のタンパク性の综合をmediated して, and the なmolecule のsynthetic をinduced きこすこと of the machine finger. 2) NMD blocks the とナンセンス suppresses the とをsimultaneous にrise こすことにより, the full-length のタンパクquality の综合をinducing きこすこと. 3) The function of これが is restored to るか.の3点を検证することをpurposeとした. Ullrich's disease は, Type Vlcollagen のナンセンス変different により, Muscle ジストロフィー様の Severe symptoms を come す. The cause of the disease is the abnormality of the basement membrane, the origin of the patient is the germ cell, and the test tube is the cause of the abnormality.このCell NMD blocking agent えると, general section synthesis されないトランケートTYPE のタンパクquality が実界に综合されることをconfirmed した.さらに, ここでSynthetic されたトランケートType のType Vlcollagen molecule が, Cell and matrix との Then をImprove させることをConfirmation した. The patient's symptoms have improved and the patient's symptoms have improved. Dr. この Research, Minamata Disease Research センターのUsuki Dr., Kagoshima University Department of Internal Medicine, Kagoshima University Joint Research である).

项目成果

Baba, M., Hirai, S-I., Yamada-Okabe, H., Hamada, K., Tabuchi, H., Kobayashi, K., Kondo, K., Yoshida, M., Yamashita, A., Kishida, T., Nakaigawa, N., Nagashima, Y., Kubota, Y., Yao, M, Ohno, S: "Loss of von Hippel-Lindau protein causes cell density-dependen

Baba，M.，平井，S-I.，山田冈部，H.，滨田，K.，田渊，H.，小林，K.，近藤，K.，吉田，M.，山下，A.，岸田，T

山下暁朗, 大西哲生, 大野茂男: "mRNAサーベイランス"蛋白質・核酸・酵素版. 47(2). 101-112 (2002)

Akio Yamashita、Tetsuo Onishi、Shigeo Ohno：“mRNA 监视”蛋白质/核酸/酶版 47(2) (2002)。

Suzuki, A., Ishiyama, C., Hashiba, K., Shimizu, M., Ebnet, K., Takai, Y., Ohno, S: "aPKC kinase activity is required for the asymmetric differentiation of the premature junctional complex during epithelial cell polarizatioin"J.Cel Science. 115. 3565-3573

Suzuki, A.、Ishiyama, C.、Hashiba, K.、Shimizu, M.、Ebnet, K.、Takai, Y.、Ohno, S：“aPKC 激酶活性对于过早连接复合物的不对称分化是必需的。

Kitamura, K., Mizuno, K., Etoh, A., Akita, Y., Miyamoto, A., Nakayama, K-I, Ohno, S.: "The second phase activation of protein kinase Cd at late G1 is required for DNA synthesis in serum-induced cell cycleprogression"Genes to Cells. (in press).

Kitamura, K.、Mizuno, K.、Etoh, A.、Akita, Y.、Miyamoto, A.、Nakayama, K-I、Ohno, S.：“DNA 需要在 G1 晚期蛋白激酶 Cd 的第二相激活

Hirai, S-I., Kawaguchi, A., Hirasawa, R., Baba, M., Ohnishi, T., Ohno, S.: "UK) regulates the radial migration of immature neurons in"Development. 129. 4483-4495 (2002)

Hirai, S-I.、Kawaguchi, A.、Hirasawa, R.、Baba, M.、Ohnishi, T.、Ohno, S.：“英国）调节发育中未成熟神经元的径向迁移。