細胞接着と細胞増殖におけるC-キナーゼの役割

C-激酶在细胞粘附和细胞增殖中的作用

• 批准号: 06283222
• 负责人: 大野 茂男
• 金额: $ 23.68万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06283222/
• 关键词: プロテインキナーゼC; S6キナーゼ; ストレス応答; NFkB; メタロプロティナーゼ; PI3キナーゼ; ホスホリパーゼC; プロテインキナーゼC結合タンパク質; 血清飢餓; DNA合成; PKC関連酵素; ホルボールエステル; 転写活性化; ジアシルグリセロール

PKCは細胞内シグナル経路の調節因子として極めて重要であることが様々な実験から推測されてきたが、未だにその具体的な作用点は不明である。本研究では、従来の研究で集積したPKCに関する独自の材料を用いて、PKCの具体的な作用点を解明することを目的とし、以下の二つの方向からのアプローチを行い、以下の結果を得た。1)PI3キナーゼ経路の代表的な下流因子、p70S6キナーゼの活性化機構を解析し、これにaPKCλが関わっていることを明らかにした。2)nPKCδ結合蛋白質として細胞膜貫通型のタンパク質を同定した。これはメタロプロテイナーゼ/ディスインテグリンファミリーの仲間であり、PKCδはこの細胞質ドメインに特異的に結合する。細胞接着とシグナル伝達経路との接点となっている事が予測され、きわめて興味深い。3)aPKCλ結合タンパク質として、PDZドメインを有する新規タンパク質を見いだした。これは線虫の卵の不等分裂に関わる遺伝子のほ乳類版であった。4)Rafを介したMAPキナーゼの活性化過程において、Ras以外に必要な因子として、PKCδを同定した。5)ストレス応答MAPキナーゼ(SAPK/JNK)経路の上流キナーゼとして、MUK、MST/MLK2を同定し、これらがSEKを介してSAPK/JNKを活性化することを示した。SAPK/JNKの上流には、MEKKに加えてMUK/MLKファミリーが存在する。6)SAPK/JNK上流因子の一つであるMEKKがTNFαによるNFkBの活性化経路に関わることを見出した。

PKC は intracellular シ グ ナ ル 経 road の adjustment factor と し て め extremely important で て あ る こ と が others 々 な be 験 か ら speculation さ れ て き た が, not だ に そ の specific な point は unknown で あ る. This study で は, 従 research で の set product し た PKC に masato す る の material を alone with い て, PKC の specific な point を interpret す る こ と を purpose と し, the following の つ の direction か ら の ア プ ロ ー チ を い, the result of the following の を た. 1) PI3 キ ナ ー ゼ 経 の represent な dirty road factor, p70S6 キ ナ ー ゼ の activeness を analytic し, こ れ に aPKC lambda が masato わ っ て い る こ と を Ming ら か に し た. 2)nPKCδ -binding protein と て て cell membrane permeable <s:1> タ タ パ パ を homogeneous を た た. こ れ は メ タ ロ プ ロ テ イ ナ ー ゼ / デ ィ ス イ ン テ グ リ ン フ ァ ミ リ ー の between secondary で あ り, PKC delta は こ の cytoplasm ド メ イ ン に specific に combining す る. The cells then とシグナ 伝 伝 reach the と <s:1> contact of the <s:1> pathway となって る る the が event が pretest され and わめて わめて are of great interest. 3) aPKC lambda タ ン パ ク qualitative と し て, PDZ ド メ イ ン を have す る new rules タ ン パ ク qualitative を see い だ し た. <s:1> れ 伝 the eggs of nematodes are unequal, the に is related to わる, the 伝 remains ほ are ほ, and the milk version であった. 4) Raf を interface し た MAP キ ナ ー ゼ の activation process に お い て, Ras に な necessary factor と し て, PKC delta を with fixed し た. 5) ス ト レ ス 応 a MAP キ ナ ー ゼ (SAPK/JNK) 経 road の upper キ ナ ー ゼ と し て, MUK, MST/MLK2 を with し, こ れ ら が SEK を interface し て SAPK/JNK を activeness す る こ と を shown し た. SAPK/JNK に に and MEKKに plus えてMUK/MLKファ が リ が が する exist. 6) SAPK/JNK high factor の つ で あ る MEKK が TNF alpha に よ る NFkB の activeness 経 road に masato わ る こ と を shows し た.

项目成果

Osada, S.: "YSK1, a novel mammalian protein kinase structurally related to Ste20 and SPS1, but not involved in the known MAPK pathways." Oncogene. 14(in press.).

Osada, S.：“YSK1，一种新型哺乳动物蛋白激酶，在结构上与 Ste20 和 SPS1 相关，但不参与已知的 MAPK 途径。”

Kim,H-M.,Hirota,S.,Chung,H-T.,Onouc.II.,Ito,A.,Morii,E.,Hirata,T.,Ohno,S.,Osada,S.,Kitamura,Y.and Nomura,S.: "PKCγ gene expression is dclayedin postnatal ccntral nervous system ofmi/mi mice." J.Molecular Neuroscience.4(4). 245-254 (1994)

Kim, H-M.、Hirota, S.、Chung, H-T.、Onouc II.、Ito, A.、Morii, E.、Hirata, T.、Ohno, S.、Osada, S.、Kitamura, Y. 和Nomura, S.：“PKCγ 基因表达是 mi/mi 小鼠出生后中枢神经系统的调节因子。”J.Molecular Neuroscience.4(4) (1994)。

Ohno,S.and Suzuki,K.: "Protein KinaseC(vertebrates)Ca^<2+>-& phospholipid-dependent protein kinase." The protein kinase Factbook,Academic Press Limlted.(in press ).

Ohno,S. 和 Suzuki,K.：“蛋白激酶 C（脊椎动物）Ca^<2 >-

Suzuki,K.,Akita,Y.,Ohno,S.: "Structural and functional diversities of protein kinaseC family members." Recent Advances in Molecular and Biochemical Research on proteins,World Scientific Pub.Co.157-166 (1994)

Suzuki,K.、Akita,Y.、Ohno,S.：“蛋白激酶C 家族成员的结构和功能多样性。”

Hirano,M.,Hirai,S-I.,Mizuno,K.,Osada,S.,Hosaka,M.and Ohno,S.: "A protein kinase C isozyme,nPKCε,is involved in the activation of NF-κB by 12-0-tetradecanoylphorbol-13-acetate(TPA)in rat 3Y1 fibroblasts." Biochem.Biophys.Res.Commun.206. 429-436 (1995)

Hirano, M.、Hirai, S-I.、Mizuno, K.、Osada, S.、Hosaka, M. 和 Ohno, S.：“蛋白激酶 C 同工酶 nPKCε 参与 NF-κB 的激活 12大鼠 3Y1 成纤维细胞中的 -0-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯 (TPA)。”Biochem.Biophys.Res.Commun.206. 429-436 (1995)