神経細胞死におけるリソゾームシステインプロテアーゼの役割り

溶酶体半胱氨酸蛋白酶在神经元细胞死亡中的作用

• 批准号: 04258221
• 负责人: 内山 安男
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04258221/
• 关键词: 遅延型神経細胞死; システイプロテアーゼ; ユビキチン; アポトーシス; 神経発生

1.スナネズミ海馬にみられる遅延型神経細胞死とユビキチン:モンゴルスナネズミの両側総頸動脈を5分間閉塞負荷後、12、24時間、3、7、14日で潅流固定し、海馬を含む脳組織を採取した。海馬CA1領域の錐体細層では、虚血負荷後カテプシンB、LおよびHの免疫反応性が上昇することをこれまでに明らかにしてきた。本年度は、細胞質蛋白の分解のシグナルとして知られるユビキチンの動態を免疫組織化学的に検索した。海馬の錐体細胞の核と細胞質は強いユビキチンの免疫反応性を示すが、負荷12時間後には核における反応性が、さらに24時間後には細胞質における反応性が消失した。CA1以外の領域の錐体細胞におけるユビキチンの免疫反応性は虚血後3日でほぼともに復した。CA1領域の錐体細胞では、負荷後24時間でユビキチン陽性の微小な顆粒が細胞質に出現し、3日後には大小の陽性顆粒が多数認められた。錐体細胞に認められたユビキチンの陽性顆粒は、システインプロテアーゼの免疫陽性顆粒に類似していた。また、電子顕微鏡レベルの免疫組織化学で検索すると、24時間後、3日後でユビキチンの局在を示す金コロイドがCA1錐体細胞のリソゾームに認められた。これらのことより、細胞質蛋白も虚血負荷によって、細胞質で分解されるのみならずリソゾームで分解され、虚血に伴いCA1錐体細胞のリソゾームが活性化されることが明らかとなった。2.胎生期における神経細胞死:胎生期の器官形成の過程で認められる予定細胞死にはDNAの断裂化が生じることが知られている。断裂したDNAの3'端をビオチン化dUTPでラベルして細胞死を起こす細胞を組織中に検討する方法を用いて、ラットの胎生期の神経細胞および神経上皮細胞を観察した。胎生15日以降の脊髄前角にみられる反応陽性の核は貪食細胞に取り込まれたもので神経細胞の核には陽性反応はみられなかった。現在、上述した方法で得られた結果とシステムインプロテアーゼの局在の結果とを詳細に検討中である。

1. After 5 minutes of suspension, 12, 24, 3, 7, and 14 days after the suspension of the load, 12, 24, 3, 7 and 14 days after the suspension of the load, 12, 24, 3, 7 and 14 days after the suspension of the load, 12, 24, 3, 7, 14 hours, 12, 24, 3, 7, 14, 12, 24, 3, 7, 14. In the field of CA1, the body is suffering from the disease, and the deficiency blood is overloaded. B, L, H, the immune response, the immune response, the body, the blood, the body, the body, the body This year, the cellular protein is broken down and the protein is broken down. This year, we are aware of the changes in the dynamics and immuno-histochemistry of the cells. After 12 hours of loading, the reactivity of the cells of the cells of the sea fish, 12 hours after loading, and 24 hours later, the response of the cells disappeared after 24 hours. Outside the field of CA1, the body cells were immunized with anti-asthenia blood 3 days later. In the field of CA1, microcytopathic cells were detected within 24 hours after loading, and most of them were found after 3 days. The size of the body cell is similar to that of the immune system. After 24 hours and 3 days, the immuno-histochemical method was used to show that the cells of CA1 cells were not affected. The protein of deficiency blood, the protein of cell, the protein of deficiency blood, the protein of deficiency, the protein of deficiency blood, the two。 Fetal death: fetal organ formation, postnatal organ formation, predetermined cell death, DNA cleavage, fetal death, postnatal organ formation, fetal organ formation, fetal organ formation, At the 3 'end of the DNA, the cells of dUTP were detected by the method of cell death and cell death. After 15 days of birth, the anterior horn of the spinal cord, the anterior At present, the results of the above methods show that the results show that there are significant differences between the results and the results.

项目成果

Taniguchi K, Tomita M, Kominami E, Uchiyama Y: "Cysteine proteinases in rat dorsal root ganglion and spinal cord, with special referenceto the co-localization of these enzymes with calcitonin gene-related peptide (CGRP) in lysosomes." Brain Research. 601.

Taniguchi K、Tomita M、Kominami E、Uchiyama Y：“大鼠背根神经节和脊髓中的半胱氨酸蛋白酶，特别是这些酶与溶酶体中降钙素基因相关肽 (CGRP) 的共定位。”

Nitatori T, Shibanai K, Karasawa Y,Araki H, Kominami E, Uchiyama Y: "Changes in immunreactivity for ubiquitin and heat shock proteins in the grebil hippocampus following trngent ischemia." Neuroscience Research. Suppl17. S187 (1992)

Nitatori T、Shibanai K、Karasawa Y、Araki H、Kominami E、Uchiyama Y：“紧急缺血后，海马中泛素和热休克蛋白的免疫反应性变化。”

内山 安男: "システインプロテアーゼと神経細胞死" 神経研究の進歩. 36. 10-21 (1992)

内山康夫：《半胱氨酸蛋白酶与神经元细胞死亡》神经学研究进展 36. 10-21 (1992)。

Taniguchi K, Kominami E, Uchiyama Y: "Localization of cysteine proreinases and their activities in the developing rat spinal cord." Neuroscience Research. Suppl17. S176 (1992)

Taniguchi K、Kominami E、Uchiyama Y：“半胱氨酸蛋白酶原的定位及其在发育中的大鼠脊髓中的活性。”

内山 安男,似鳥 徹,木南 英紀: "脳虚血とプロテアーゼ" カレントテラピー. 11. 135-139 (1993)

Yasuo Uchiyama、Toru Nitori、Hideki Kinami：“脑缺血和蛋白酶”当前疗法。11. 135-139 (1993)