原型癌遺伝子bcl-2の遺伝子発現による神経細胞死の回避とその生理的意義

原型癌基因bcl-2的基因表达避免神经细胞死亡及其生理意义

• 批准号: 07264236
• 负责人: 内山 安男
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07264236/
• 关键词: Bcl-2; PC_<T2>細胞; 遺伝子導入; ミトコンドリア内膜; 免疫細胞化学; 小胞体; アポトーシス; ネクローシス

これまでの研究から、Bcl-2蛋白は粗面小胞体や滑面小胞体、核膜、ミトコンドリアの外膜に局在することが報告されている。周知のごとく、アポトーシスは形態的な定義であり、核に初期変化があるとされてきた。特に、核クロマチンの凝縮、アポトーシス小体の形成時においてもミトコンドリアを初めとする細胞内小器官は形態的に正常である。しかし、近年の研究から、核DNAの断裂化が生じる時には、ミトコンドリアの機能も低下しているこが明らかにされている。さらに、Bcl-2はアポトーシスのみならず一部のネクローシス(呼吸鎖阻害により誘導された)をも回避することが分かった。これらの現象を理解するために、Bcl-2(およびBcl-X_L)の正確な局在をbcl-2/bcl-X_L遺伝子を導入したPC12細胞(PC-bcl/PC-bolx細胞)で免疫組織細胞化学的に検討した。免疫反応には、ヒト、マウスBcl-2/Bcl-x蛋白あるいはその合成ペプチドに対するポリクローナルあるいはモノクローナル抗体を用いた。共焦点レーザー顕微鏡でPC-bcl/bclx細胞を観察すると、Bcl-2/Bcl-x蛋白に対する細顆粒状の免疫陽性反応が細胞質や神経突起に見られた。凍結超薄切片-金コロイド法によって、Bcl-2/Bcl-x蛋白の局在をみると、Bcl-2/Bcl-x蛋白の抗原性を示す金コロイド粒子は主にミトコンドリアの内膜上に認められた。金粒子は小胞構造にも見られたが、核膜に沈着する金粒子は認められなかった。神経突起内に存在するミトコンドリアの内膜にも金粒子の局在が認められた。同蛋白陽性の金粒子は核にも見られたが、非特異的な局在との差は見られなかった。脊髄前角細胞、肝細胞においても同様の所見が得られた。現在のところ、Bcl-2およびその関連蛋白がミトコンドリア内膜のいかなる機構と関与するかは不明であるが、本研究結果は、アポトーシスを回避する機構にミトコンドリアが関与する可能性を示唆するものと思われる。

These results indicate that Bcl-2 protein is present in both rough and smooth cells, nuclear membrane and outer membrane. As we all know, the definition of the form of APOTS is clear, and the initial changes in the nuclear industry are clear. In particular, the condensation of the nucleus, the formation of the nucleus, the formation of the nucleus, the In recent years, the research on nuclear DNA fragmentation has been carried out. A part of the production process of Bcl-2 can be avoided. To understand this phenomenon, Bcl-2(Bcl-X_L) gene was introduced into PC12 cells (PC-bcl/PC-bolx cells) and examined by immunohistochemistry. The immune response to Bcl-2/Bcl-x is expressed in the following ways: Microscopic examination of PC-bcl/bclx cells revealed fine granular immunopositive responses to Bcl-2/Bcl-x proteins, cytoplasmic and neuronal processes. Freezing Ultrathin Sections-The Expression of Bcl-2/Bcl-x Protein in the Inner Membrane of the Cell and the Expression of Bcl-2/Bcl-x Protein Antigenicity The gold particles were found in the small cell structure and the nuclear membrane. The presence of gold particles in the inner membrane of the brain is recognized. The same protein positive gold particles are not seen in the nucleus, and the non-specific ones are not seen in the nucleus. The anterior horn cells and liver cells of the spine were found in the same way. The results of this study suggest that the mechanism of Bcl-2 and Bcl-2 related proteins is unknown and that the mechanism of Bcl-2 and Bcl-2 related proteins is avoided.

项目成果

Shibahara,T., Sato,N., et al.: "The fate of effete epithelial cells at the villus tip of human small intestine." Arch. Histol. Cytol.58. 205-219 (1995)

Shibahara,T., Sato,N., et al.：“人类小肠绒毛尖端有效上皮细胞的命运。”

内山安男: "アポトーシス" 日本医学会 玉置憲一、長田重一、金澤一郎, 154 (1996)

Yasuo Uchiyama：“细胞凋亡”日本医学会 Kenichi Tamaki、Shigeichi Nagata、Ichiro Kanazawa，154（1996）

Waguri,S., Sato,N., et al.: "Cysteine proteinases in GH4C1 cells,a rat pituitary tumor cell line, are secreted by the constitutive and regulated secretory pathways." Eur. J. cell Biol.67. 308-318 (1995)

Waguri,S.、Sato,N. 等人：“大鼠垂体肿瘤细胞系 GH4C1 细胞中的半胱氨酸蛋白酶由组成型和调节性分泌途径分泌。”

Nitatori,T., Kominami,E, et al.: "The proceedings of the 10th 1COP Conference lntracellular catabolism" Suzuki,K., Bond, J. Plenum Press(in Press), (1996)

Nitatori,T., Kominami,E, et al.：“第 10 届 1COP 会议细胞内分解代谢的会议记录” Suzuki,K., Bond, J. Plenum Press（出版中），(1996)

Nitatori,T., Sato,N., el al.: "Apoptosis of pyramidal neurons in the CA1 zone of gerbile hippocampus after brift ischemia." J Neuroscience. 15. 1001-1011 (1995)

Nitatori，T.，Sato，N.，等人：“短暂缺血后沙鼠海马 CA1 区锥体神经元的凋亡。”