脂肪滴形成へのオートファジーの関与について
关于自噬参与脂滴形成
基本信息
- 批准号:21659050
- 负责人:
- 金额:$ 1.98万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
- 财政年份:2009
- 资助国家:日本
- 起止时间:2009 至 2010
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
前年度に、オートファジー関連タンパク質のLC3が脂肪滴表面に局在することを絶食負荷時に出来る肝細胞や心筋細胞に形成される脂肪滴で証明した。特に、Atg7を欠損するとLC3が絶食負荷時に脂肪滴形成が抑制されることを示した。本年度は、培養がん細胞(PC12, HeLa, HepG2, 3T3-L1細胞)を用いて、これら細胞を70%コンフルエントの条件で培養し、12時間後にBODIPY陽性の脂肪滴と中性脂肪の量を調べると有意に増加することを利用し、この脂肪滴にLC3が局在することを示した。次いで、LC3をRNAi法でノックダウンしてタンパク質レベルで10~20%まで発現を抑制した細胞株を樹立した。これら細胞を用いて、同様に培養して脂肪滴が形成されるかを検討した結果、LC3mRNAがノックダウンされた細胞では、脂肪滴のみならず中性脂肪の量もMock細胞と比べて、50%以下に抑制されることが分かった。さらに、脂肪細胞の前駆細胞である3T3-L1細胞をホルモン刺激して脂肪細胞に分化させた。その結果、正常細胞では、LC3mRNAは、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体Y等の分化因子と共に、処理後、時間と共に上昇することが分かった。また、LC3mRNAノックダウンL1細胞株では、脂肪細胞に分化した処理後6日目で検討した所、BODIPY陽性の脂肪滴の形成は全く起きないことが明らかとなった。現在、LC3欠損マウスを用いて、本結果を検証中である。
Previous years, the relationship between lipid and LC3 lipid droplets was demonstrated when the liver cells and muscle cells were exposed to fasting. In particular, Atg7 is deficient in LC3 and fat droplet formation is inhibited during fasting. This year, cultured cells (PC12, HeLa, HepG2, 3T3-L1 cells) were used in the medium and under the conditions of 70% culture. After 12 hours of culture, the amount of BODIPY-positive fat drops and neutral fat was adjusted and intentionally increased. In addition, the LC3 RNAi method was used to inhibit the development of cell lines by 10 - 20% The amount of LC3 mRNA in Mock cells was inhibited by 50% or less. In addition, adipocyte differentiation is stimulated by the presence of T3-L1 cells. The results showed that normal cells, LC3 mRNA, proliferation factors, activated receptor Y and other differentiation factors increased after treatment and time. LC3 mRNA expression in L1 cells was detected 6 days after treatment. Now, LC3 is missing.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Atg9A Protein, an Autophagy-related Membrane Protein, Is Localized in the Neurons of Mouse Brains
- DOI:10.1369/jhc.2010.955690
- 发表时间:2010-02
- 期刊:
- 影响因子:3.2
- 作者:Hirosumi Tamura;M. Shibata;M. Koike;M. Sasaki;Y. Uchiyama
- 通讯作者:Hirosumi Tamura;M. Shibata;M. Koike;M. Sasaki;Y. Uchiyama
The novel lipid raft adaptor p18 controls endosome dynamics by anchoring the MEK-ERK pathway to late endosomes
- DOI:10.1038/emboj.2008.308
- 发表时间:2009-03-04
- 期刊:
- 影响因子:11.4
- 作者:Nada, Shigeyki;Hondo, Akihiro;Okada, Masato
- 通讯作者:Okada, Masato
Morphological features of programmed cell death across the eukaryotic kingdom
真核王国程序性细胞死亡的形态特征
- DOI:
- 发表时间:2009
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Shioda S;Kageyama H;Takenoya F;Shiba K;内山安男
- 通讯作者:内山安男
Phosphorylation of highly conserved NF-M KSP repeats is not required for myelin-dependent radial axonal growth
高度保守的 NF-M KSP 重复序列的磷酸化对于髓磷脂依赖性径向轴突生长来说不是必需的
- DOI:
- 发表时间:2009
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Garcia M;Rao M;Fujimoto J;Garcia V;Shah S;Crum J;Gotow T;Uchiyama Y;Ellisman MH;Calcutt N;Cleveland D
- 通讯作者:Cleveland D
Very-high-dose alpha-tocopherol supplementation increases blood pressure and causes possible adverse central nervous system effects in stroke-prone spontaneously hypertensive rats
极高剂量的α-生育酚补充剂会增加血压,并可能对易发生中风的自发性高血压大鼠的中枢神经系统产生不良影响
- DOI:
- 发表时间:2009
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Miyamoto K;Shiozaki M;Shibaita M;Koike M;Uchiyama Y;Gotow T
- 通讯作者:Gotow T
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内山 安男其他文献
皮膚センシング技術を用いた電動義手の定量評価
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砂堀毅彦
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- DOI:
- 发表时间:
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- 作者:
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14028037 - 财政年份:2002
- 资助金额:
$ 1.98万 - 项目类别:
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オートファジー(自食作用)誘導活性の測定法の開発に関する研究
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原型癌遺伝子bcl-2の遺伝子発現による神経細胞死の回避とその生理的意義
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06272229 - 财政年份:1994
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- 资助金额:
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Genetic study of molecular characteristic of autophagy-related proteins LC3A and LC3B
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