タンパク質の膜透過に伴う高次構造の制御に関する研究
タンパク質の膜透過に伴う高次構造の制御に関する研究
批准号:
04259211
负责人:
遠藤 斗志也
金额:
$1.28万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份:
1992
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
1992 至 --
中文摘要
タンパク質のミトコンドリア膜透過に伴う高次構造変化を制御する因子である、熱ショックタンパク質hsp70の機能の局在部位特異性を、in vivoとin vitroで明らかにした。ミトコンドリアのhsp70(mhsp70)をサイトゾルに局在するように遺伝子レベルで改変し、サイトゾルのhsp70(chsp70)の発現を制御できるようにした酵母株に導入した。この形質転換株は、chsp70の発現を停止させると増殖できなくなり、mhsp70はたとえサイトゾルに局在させても、chsp70の機能を代替できないことが明らかになった。hsp70は二つのドメインからなるドメイン構造をとっているが、chsp70とmhsp70の各々二つのドメインのうち一つを入れ替えたキメラタンパク質でも、やはりchsp70の機能を代替することはできなかった。コムギ胚芽抽出液を用いた無細胞タンパク合成系で翻訳した前駆体タンパク質は、単離したミトコンドリアに加えても、chsp70が存在しないとミトコンドリア内部に取り込まれない。このin vitroの実験系を用いて、chsp70の代わりにmhsp70が取り込みを促進できるかどうか調べた。その結果、in vitroでもmhsp70はchsp70の代わりの働きをすることはできないことが分かった。したがって、mhsp70とchsp70は、各々ミトコンドリアの中と外と働くべき場所が決まっており、互いに交換はできないことが明らかになった。このhsp70の局在部位特異性を決めている因子として、例えばサイトゾルのYdjlp等の可能性があるので、大腸菌からYdjlpを大量に精製し、in vitroの実験系に加えて、その影響を検討している。
英文摘要
タンパク質のミトコンドリア膜透過に伴う高次構造変化を制御する因子である、熱ショックタンパク質hsp70の機能の局在部位特異性を、in vivoとin vitroで明らかにした。ミトコンドリアのhsp70(mhsp70)をサイトゾルに局在するように遺伝子レベルで改変し、サイトゾルのhsp70(chsp70)の発現を制御できるようにした酵母株に導入した。この形質転換株は、chsp70の発現を停止させると増殖できなくなり、mhsp70はたとえサイトゾルに局在させても、chsp70の機能を代替できないことが明らかになった。hsp70は二つのドメインからなるドメイン構造をとっているが、chsp70とmhsp70の各々二つのドメインのうち一つを入れ替えたキメラタンパク質でも、やはりchsp70の機能を代替することはできなかった。コムギ胚芽抽出液を用いた無細胞タンパク合成系で翻訳した前駆体タンパク質は、単離したミトコンドリアに加えても、chsp70が存在しないとミトコンドリア内部に取り込まれない。このin vitroの実験系を用いて、chsp70の代わりにmhsp70が取り込みを促進できるかどうか調べた。その結果、in vitroでもmhsp70はchsp70の代わりの働きをすることはできないことが分かった。したがって、mhsp70とchsp70は、各々ミトコンドリアの中と外と働くべき場所が決まっており、互いに交換はできないことが明らかになった。このhsp70の局在部位特異性を決めている因子として、例えばサイトゾルのYdjlp等の可能性があるので、大腸菌からYdjlpを大量に精製し、in vitroの実験系に加えて、その影響を検討している。
期刊论文(3)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Endo,T.,Kawamura,K.,Nakai,M.: "The chloroplast-targeting domain of plastocyanin transit peprde can form a helical structure but does not have ahigh affinity for lipid bilayers." European Jourral of Biochemistry. 207. 671-675 (1992)
Endo,T.、Kawamura,K.、Nakai,M.:“质体蓝蛋白转运肽的叶绿体靶向结构域可以形成螺旋结构,但对脂质双层不具有高亲和力。”
DOI:
--
发表时间:
期刊:
影响因子:
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作者:
[]
通讯作者:
Nukai,M.,Tanaku,A.,Omata,T.,Endo,T.: "Cloning and characterization of the scc Y gene from the cyanobacterium Synechococcus PCC 7942" Biochimica et Biophysica A da. 1171. 113-116 (1992)
Nukai,M.,Tanaku,A.,Omata,T.,Endo,T.:“蓝藻聚球藻 PCC 7942 中 scc Y 基因的克隆和表征”Biochimica et Biophysicala Da。
DOI:
--
发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
Elucidation of the protein trafficking system mediating biogenesis and maintenance of mitochondria
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批准号:20H00458
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
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资助金额:$29.2万
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财政年份:2020
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
酵母ミトコンドリアタンパク質配送における行き先シグナル解読機構の解明
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批准号:19036007
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$4.03万
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财政年份:2007
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
酵母ミトコンドリアを巡るプロテインフラックス
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批准号:13206028
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
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资助金额:$5.44万
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财政年份:2001
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
核分裂と核融合に必須な酵母核膜タンパク質Nep98pの機能解析
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批准号:13043022
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$1.54万
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财政年份:2001
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
酵母ミトコンドリアを巡るプロテインフラックス
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批准号:12206039
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
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资助金额:$0.0万
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财政年份:2000
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
ミトコンドリア行きターゲティングシグナル受容体による分子認識機構の解析
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批准号:12019226
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$1.22万
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财政年份:2000
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
核ゲノム及び葉緑体ゲノムにコードされたタンパク質の協調したチラコイド移行の解析
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批准号:12025213
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$2.24万
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财政年份:2000
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
核ゲノム及び葉緑体ゲノムにコードされたタンパク質の協調したチラコイド移行の解析
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批准号:11151214
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$2.24万
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财政年份:1999
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
ミトコンドリア行きターゲティングシグナル受容体による分子認識機構の解析
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批准号:11132223
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1999
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
核外膜・内膜融合過程のアッセイ系の確立と新規シャベロンJemlpの機能解析
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批准号:10878104
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$1.34万
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财政年份:1998
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
核ゲノム及び葉緑体ゲノムにコードされたタンパク質の協調したチラコイド移行の解析
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批准号:10170212
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1998
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
遺伝学的アプローチによる酵母ミトコンドリアの形態制御に関する研究
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批准号:09878127
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$1.34万
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财政年份:1997
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
ミトコンドリアタンパク質の細胞内局在化におけるストレスタンパク質hsp70の役割
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批准号:05268219
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1993
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
タンパク質の膜透過に伴う高次構造の制御に関する研究
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批准号:05252215
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1993
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
オルガネラ表層におけるタンパク質の構造認識と膜透過機能
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批准号:04220219
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.41万
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财政年份:1992
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
酵母シトクロムC_1のアセンブリーの分子機構
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批准号:04266209
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.02万
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财政年份:1992
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
オルグネラ表層におけるタンパク質の構造認識と膜透過機能
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批准号:03236219
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1991
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
タンパク質の膜透過に伴う高次構造の制御に関する研究
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批准号:03264209
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1991
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
オルガネラ表層におけるタンパク質の構造認識と膜透過機能
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批准号:02250209
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1990
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
分光学的手法による,葉緑体指向シグナルの構造と性質に関する研究
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批准号:02858047
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项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额:$0.51万
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财政年份:1990
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负责人:遠藤 斗志也
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依托单位:
海外基金