酵母ミトコンドリアタンパク質配送における行き先シグナル解読機構の解明

阐明酵母线粒体蛋白递送中的目的地信号解码机制

• 批准号: 19036007
• 负责人: 遠藤 斗志也
• 金额: $ 4.03万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19036007/
• 关键词: ミトコンドリア; 酵母; 行き先シグナル; NMR; 膜透過

酵母細胞内にamberサプレッサーtRNAとこれに非天然アミノ酸BPA(p-benzoyl-L-phenylalanine)をチャージできるアミノアシルtRNA合成酵素(BpaRS)を発現させると, 目的タンパク質内のamberコドンで指定した位置にBPAを組み込むことができる。この細胞または細胞抽出液に紫外光を照射するとBPAと近傍のタンパク質間に架橋が形成されるので, 架橋産物の相手を同定すれば, 目的タンパク質についてどの位置でどんなタンパク質と相互作用しているかをマッピングすることができる。この手法を酵母ミトコンドリア外膜のトランスロケータTOM40複合体構成因子Tom22に適用した。Tom22は一回膜貫通型タンパク質で, N端ドメインをサイトゾルに, C端ドメインを膜間部側に持つ。Tom22分子全体に5残基毎にBPAを導入し, 光架橋を行い, TOM40複合体構成因子および内膜のトランスロケータ構成因子の抗体を用いて, 架橋相手を同定した。Tom22のサイトゾルドメインはTOM40複合体の二種類の受容体, Tom70とTom20と相互作用していた。詳細なマッピングから, Tom22はTom20が認識する前駆体の行き先シグナルを別な角度からサンドイッチする形で認識している可能性が示唆された。Tom22の膜貫通ドメインはTOM40複合体の膜透過チャネルTom40と相互作用し, 複合体を安定に保っているらしいこと, 一分子のTom22は二分子のTom40と相互作用していることが分かった。さらに, Tom22の膜間部ドメインは内膜のトランスロケータTIM23複合体の受容体サブユニットTim50と相互作用していることが分かった。

Yeast intracellular amber enzyme (p-benzoyl-L-phenylalanine), acid BPA (p-benzoyl-L-phenylalanine), tRNA synthesis enzyme (BpaRS), tRNA synthesis enzyme (BpaRS) were detected. Objective to specify the location of amber enzyme in yeast cell. The liquid extracted from the cell is exposed to ultraviolet light to irradiate the BPA near the shelf to form a device, and the frame is the same as the other. The purpose is to determine the location of the device, the position of the cell, the interaction of the cell, the interaction of the cell, the cell. The manipulations were performed by yeast, yeast, adventitia, adventitia, TOM40 complex, factor Tom22. In Tom22, there is a general circuit of the film, the N-terminal is connected, and the C-terminal is connected to the membrane. All the 5 residues of Tom22 molecules were inserted into the BPA, the light frame was used, and the TOM40 complex became a factor, the intima, the intima, the antibody, the antibody, and the antibody. There are two kinds of Tom22-like receptacles, such as the TOM40 complex, and the Tom70-Tom20 interaction. Tom22

项目成果

Pathways and machineries for mitochondrial protein import in yeast.

酵母中线粒体蛋白输入的途径和机制。

• 发表时间: 2007
• 作者: Ono N;Noda M;et al.;杉山俊平;筒井和義;遠藤斗志也
• 通讯作者: 遠藤斗志也

タンパク質輸送と酸化的リン酸化の接点:NMRを用いたTim21-Qcr6間の相互作用解析

蛋白质转运和氧化磷酸化之间的交叉点：使用 NMR 分析 Tim21-Qcr6 之间的相互作用

• 发表时间: 2007
• 作者: 横山多可志;森下佳子;前田正洋;百瀬隆喜;遠藤斗志也
• 通讯作者: 遠藤斗志也

小胞体関連分解に関与するMnllpの局在と相互作用因子の解析

Mnllp参与内质网相关降解的定位及相互作用因素分析

• 发表时间: 2007
• 作者: Nishikawa;S.;山本雅也;中戸川万智子
• 通讯作者: 中戸川万智子

Tom20 and Tom22 share the common signal recognition pathway in mitochondrial protein import

• DOI: 10.1074/jbc.m708339200
• 发表时间: 2008-02-15
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Yamano, Koji;Yatsukawa, Yoh-Ichi;Endo, Toshiya
• 通讯作者: Endo, Toshiya

Structural basis of molecular recognition in mitochondrial protein import.

线粒体蛋白质输入分子识别的结构基础。

• 发表时间: 2009
• 作者: Noguchi H;Matsumoto S;et al.;遠藤斗志也
• 通讯作者: 遠藤斗志也