课题基金 / 基金详情

酵母ミトコンドリアを巡るプロテインフラックス

酵母ミトコンドリアを巡るプロテインフラックス
酵母线粒体周围的蛋白质通量
批准号:
13206028
负责人:
遠藤 斗志也
金额:
$5.44万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份:
2001
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
2001 至 --

项目摘要

项目成果

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ミトコンドリアは外膜,膜間部,内膜,マトリクスの4つの区画から構成され,サイトゾルで合成されたタンパク質は外膜のTOM,内膜の少なくとも2種類のTIMとよばれるタンパク質複合体の働きによりミトコンドリアに移行し,適切なミトコンドリア内区画に配置される。取り込まれたタンパク質は,マトリクスの分子シャペロンHsp70,Hsp60の働きで機能化する。本研究では,以上のプロセスの全体像を,全ミトコンドリアタンパク質の流れ(プロテインフラックス)として網羅的に解析し,フラックスの大きさと分岐を制御する因子とメカニズムの解明の突破口を開くことをめざした.具体的にはまず500〜1000種類存在すると考えられるミトコンドリアタンパク質の同定のために,(1)酵母細胞からNycodenz密度勾配遠心を用いて高純度のミトコンドリアを単離精製し,マトリクス画分について二次元電気泳動を行い,CBB染色した各スポットを限定分解→質量スペクトルで同定した(2)単離ミトコンドリアの内在性膜タンパク質画分について,一次元電気泳動後,二次元目に展開せずに,限定分解とMS-MS測定によりタンパク質同定を行った。(3)酵母細胞から全mRNAを単離,in vitroで翻訳しRI標識タンパク質を合成した。これを基質として,in vitroで単離ミトコンドリアへの取り込み実験を行い,プロテアーゼでミトコンドリア内に取り込まれなかったタンパク質を消化した場合としない場合の各々について,ミトコンドリアを回収して二次元電気泳動を行い,標識タンパク質のスポットを検出した。(4)(3)の実験を受容体Tom70の欠損株について行うことにより,Tom70に依存してミトコンドリアに取り込まれるタンパク質を網羅的に解析するために,受容体への結合が律速段階となるようなin vitroインポートの実験条件を確立した。
期刊论文(8)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
A.Kawai et al.: "Loss of the mitochondrial Hsp70 functions causes aggregation of mitochondria in yerast cells"J.Cell Science. 114. 3565-3574 (2001)
A.Kawai 等人:“线粒体 Hsp70 功能的丧失导致酵母细胞中线粒体聚集”J.Cell Science。
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
T.Muto et al.: "NMR identification of the Tom20 binding element in mitochondrial presequences"J.Mol.Biol.. 306. 137-143 (2001)
T.Muto 等人:“线粒体前序列中 Tom20 结合元件的 NMR 鉴定”J.Mol.Biol.. 306. 137-143 (2001)
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
T.Endo, D.Kohda: "Functions of outer membrane receptprs in mitochondrial protein import"Biochim.Biophys.Acta. (in press). (2002)
T.Endo、D.Kohda:“线粒体蛋白输入中外膜受体的功能”Biochim.Biophys.Acta。
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
K.Nakatsukasa et al.: "Mnllp, an α-mannosidase-like protein in yeast Saccharomyces cerevisiae, is required for endoplasmic reticulum-associated degradation of glycoproteins"J.Biol.Chem.(Communication). 276. 8635-8638 (2001)
K. Nakatsukasa 等人:“Mnllp 是酿酒酵母中的一种 α-甘露糖苷酶样蛋白,是内质网相关糖蛋白降解所必需的”J. Biol. 276. 8635-8638 (通讯)。 )
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
8
    Elucidation of the protein trafficking system mediating biogenesis and maintenance of mitochondria
    • 批准号:
      20H00458
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
    • 资助金额:
      $29.2万
    • 财政年份:
      2020
    • 负责人:
      遠藤 斗志也
    • 依托单位:
    酵母ミトコンドリアタンパク質配送における行き先シグナル解読機構の解明
    • 批准号:
      19036007
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额:
      $4.03万
    • 财政年份:
      2007
    • 负责人:
      遠藤 斗志也
    • 依托单位:
    核分裂と核融合に必須な酵母核膜タンパク質Nep98pの機能解析
    • 批准号:
      13043022
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
    • 资助金额:
      $1.54万
    • 财政年份:
      2001
    • 负责人:
      遠藤 斗志也
    • 依托单位:
    酵母ミトコンドリアを巡るプロテインフラックス
    • 批准号:
      12206039
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
    • 资助金额:
      $0.0万
    • 财政年份:
      2000
    • 负责人:
      遠藤 斗志也
    • 依托单位:
    海外基金