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血管内皮細胞と細胞外マトリックス分子の生物学的機能

血管内皮细胞和细胞外基质分子的生物学功能

基本信息

批准号：
04263227
负责人：
二宮善文
金额：
$ 1.73万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、内皮細胞の代謝と機能を知る目的で細胞外マトリックスを視点として、血管内皮細胞が如何なる細胞外マトリックス(主にコラーゲン)分子を合成し、この分子が如何なる様式で他の細胞外マトリックス分子と作用して高分子会合体を形成し、または内皮細胞と相互作用して生物学的機能を発揮するかを知ることにある。本年度は、細胞外マトリックスのうちで、内皮細胞の合成するコラーゲン分子を同定し、特にこのうちでも短鎖コラーゲンの範疇に入ると思われる新しい内皮コラーゲン鎖構造、それが構成する分子構造、さらにその遺伝子構造と発現様式についての解析を行った。ウシ胎児大動脈由来初代内皮細胞、ウシ頸動脈由来内皮細胞よりmRNAを抽出、cell-translation法よってmRNAの翻訳活性を測定した。翻訳産物を純化した細菌性コラゲナーゼ感受性試験、SDS-ポリアクリルアミドゲル電気詠動によりコラーゲンポリペプチドを同定すると、180kDaあたりに数本、75kDaあたりに二三本が存在することが判定した。さらにこれらのmRNAを用いてα2(I),α1(III),α2(V),α2(IV),α1(VIII)コラーゲン鎖特異的cDNAでハイプリダイズするmRNAを同定したところ、各々反応を示し、両内皮細胞が、α2(I),α2(V),α2(IV),α2(VIII),α1(XI)コラーゲン鎖特異的mRNAを転写していることがわかった。VIII型コラーゲン分子がウシ大動脈内皮、大脳毛細血管内皮に存在するかを明かにする目的で、ウシ大動脈内皮、大脳毛細血管内皮、ウシ角膜内皮細胞が合成するデスメ膜を材料に生化学的、免疫学的方法で解析した。その結果、ウシ大動脈にはタンパク化学的にVIII型コラーゲンが存在することが明らかになった。現在その分子の鎖構成について検索している。

The aim of this study is to understand the metabolism and function of endothelial cells in vitro, how vascular endothelial cells synthesize extracellular molecules, how these molecules interact, how they form extracellular polymer assemblies, how endothelial cells interact, and how biological functions develop. This year, we have analyzed the molecular structure, molecular structure, molecular structure and expression of endothelial cells in vitro, synthesis of endothelial cells, identification of molecular structure, and special short-chain structure in vitro. The mRNA expression in primary endothelial cells derived from fetal artery and carotid artery was measured by cell-translation method. The bacterial susceptibility test, SDS-PCR and SDS-PCR were used to determine the presence of the purified product. In addition, the mRNA expression of α2(I),α1(III),α2(V),α2(IV),α1(VIII) and α 2 (V) is similar to that of endothelial cells, α2(I),α2(V),α2(IV), α2(VIII),α1(XI) and α2(V). The molecular structure of type VIII is analyzed by biochemical and immunological methods. As a result, it is possible to change the chemical structure of the system. Now the molecular lock composition is in the middle of the search.