权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

軟骨細胞分化を誘導する因子のクローニングに関する研究

软骨细胞分化诱导因子克隆研究

基本信息

批准号：
10877227
负责人：
二宮善文
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877227/
关键词：
軟骨細胞分化誘導因子クローニング cDNA

项目摘要

本研究は、肢芽発生過程において、軟骨新生を誘導する分化機構を分子の変化として捉えるために、軟骨分化誘導因子をクローニングすることを目的として、現在までに鶏胚の肢芽Stagc20(間葉系細胞)とStage24(軟骨細胞系)からmRNAを抽出し、前者からcDNAライブラリーを作製、後者から引き算し、残りのcDNAをPCRで増幅することにより前者に陽性であって後者に陰性であるクローンを選び出し、これらのクローンについて、そのポリペゾチド構造、遺伝子構造と発現様式を検索し、性質を調べ、軟骨を誘導する機能を有するか否かを調べてきた。取得クローンについて:1)間葉系細胞mRNAと軟骨細胞系mRNAを用いたノザンプロット、2)データーベースによる既報の情報の入手、3)重複久ローン単離により翻訳部位のアミノ酸配列、4)鶏胚全身in situハイブリダイゼーションによる発現パターンの検索、を行ってきた。間葉系細胞と軟骨細胞RNAを抽出し、引算ハイブリダイゼーションPCR法によって、前者に陽性であって後者に陰性であるcDNAクローンを選び出した結果、このなかで興味ある発現パターンを示すいくつかのクローンについて重点的に、ポリペプチド構造と発現部位の同定、他の軟骨特異的遺伝子群との発現時期の比較、等の性質を詳細に検討してきた。得られた複数のクローンが間葉系細胞RNAに強くハイブリダイズし、これらのなかに間葉系細胞を軟骨へと分化を誘導する因子が含まれていることを示唆した。

In this study, we investigated the molecular transformation of differentiation mechanisms during limb bud development and cartilage regeneration induction. We also investigated the molecular transformation of differentiation inducing factors in limb bud Stagc20(mesenchymal) Stage24(chondrocyte). The PCR amplification of the cDNA fragment is positive, negative, selective, selective, and variable. The expression of the cDNA fragment is detected, its properties are modulated, and its function is induced. To obtain the following information:1) Mesenchymal cell mRNA and chondrocyte cell mRNA are used in the middle of the study; 2) Information is reported in the study; 3) Repeat the study and acid alignment in the site of the study; 4) Embryo whole body is in situ; RNA was extracted from mesenchymal cells and chondrocytes. PCR was used to detect the positive and negative cDNA fragments. The results showed that the interesting cDNA fragments were identified. The structure and location of the fragments were identified. The characteristics of the fragments were discussed in detail. A number of factors that induce differentiation in mesenchymal cells are identified.