6R-テトラヒドロビロビオプテリンによる神経伝達物質放出の調節機構

6R-四氢胆生物蝶呤对神经递质释放的调节机制

• 批准号: 04267210
• 负责人: 三輪 聡一
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 1994
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04267210/
• 关键词: ドーパミン遊離; セピアプテリン; 微小脳; 透析法; 結合実験; スライスパッチ法; イオンチャンネル; テトラヒドロビオプテリン

6R-L-エリスロ-5,6,7,8-テトラヒドロビオプテリン(以下6R-BH_4と省略)は,カテコールアミン合成の律速酵素-チロシン水酸化酵素-の補酵素である。我々は,これまでに,脳透析法を用いて,この6R-BH_4がドーパミン,セロトニンやノルアドレナリンなどのモノアミノ神経伝達物質を生合成に依存することなく直接遊離させる作用を有することを明らかにしてきた。本年度は,まず,6R-BH_4が細胞の外側または内側のいずれから作用しているのかを明らかにする目的で,6R-BH_4の前駆物質でアルセピアプテリンのドーパミン遊離に対する影響を曙透析法を用いて検討した。セピアプテリンを投与すると,細角胞内の6R-BH_4濃度が選択的に増加し細胞外の弟度はほとんど変化しなかったが,この条件ではドーパミン遊離の増加がみられなかった。この結果から,6R-BH_4は細胞の外側から作用していることを明らかにした。また,[^3H]6R-BH_4は作製して,脳の膜分画に対する結合実験を行ない,脳の膜分画に[^3H]6R-BH^4に対する高親和性の結合部位が存在することを明らかにした。この結合部位の[^3H]6R-BH_4に対する解離定数(kd)は21nMであり,また,最大結合数(Bmax)は550fmol/mg proteinであった。この[^3H]6R-BH_4の特異的結合は,6R-BH_4により高親和性に置換されたが、立体異性体である6S-BH_4および合成プテリジン類では置換には高濃度を要した。さらに,脳のスライスパッチ法を用いて,その電気生理学的活性を検討した。6R-BH_4は,神経細胞の発火頻度を著明に増加させるとともに,内向き電流を引き起こすことが明からとなった。以上の結果から,6R-BH_4に対する特異的受容体が存在すること。および,この受容体が活性化されると内向き電流が生じることを明からにした。

6R-BH_4 is omitted. 6R-L-BH_4-BH_4-BH_4 is omitted. In this paper, the use of dialysis method, such as 6R-BH_4, 6R-BH_ This year, the effects of 6R-BH_4 on the outer and inner sides of cells were investigated by dialysis. The concentration of 6R-BH_4 in cells increased with the increase of extracellular concentration. 6R-BH_4 is the outer part of the cell. [^3H] 6R-BH_4 is not produced, and the binding of [^3H] 6R-BH_4 to the membrane is carried out.[^3H] 6R-BH_4 has a high affinity binding site. The dissociation constant (kd) of the binding site [^3H] 6R-BH_4 was 21nM, and the maximum binding number (Bmax) was 550fmol/mg protein. The specific binding of [^3H] 6R-BH_4 is characterized by high affinity for 6R-BH_4, substitution for 6S-BH_4, and substitution for 6S-BH_4. Today, the electrophysiological activity of the enzyme is investigated by using the enzyme method. 6R-BH_4: The frequency of firing in neurons increases, and the frequency of firing in neurons increases. As a result, 6R-BH_4 has a specific receptor. The receptor is activated and the inward current is generated.

项目成果

Kunio Koshimura: "L-DOPA administration enhances exocytotic dopamine release in vivo in the rat striatum" Life Sciences. 51. 747-755 (1992)

Kunio Koshimura：“L-DOPA 给药增强了大鼠纹状体体内胞吐多巴胺的释放”生命科学。

Tetsuya Ohue: "Enhancement of acetylcholine release in the hippocampus by 6R-L-erythro-5,6,7,8-tetrahydro-biopterin is mediated by 5-hydroxyrtyptamine" Brain Research. (1993)

Tetsuya Ohue：“6R-L-erythro-5,6,7,8-四氢生物蝶呤增强海马中乙酰胆碱的释放是由 5-羟色胺介导的”大脑研究。

Kunio Koshimura: "A dopamini-releasing action of 6R-L-erythro-tetrahydrobiopterin" Frontiers and new horezons in amino acid research. K. takae, ed.(Elsevier Science publishers B.V.). 537-540 (1992)

Kunio Koshimura：“6R-L-赤型四氢生物蝶呤的多巴胺释放作用”氨基酸研究的前沿和新视野。

Yasuyoshi Watanabe: "Basic study on 6R-tetrahydrobipoterin treatment for infantele autism and neuro-psychiatic disorders" Neurpbiology of Infantile Autism.H. Naruse and E.M. Ornitz,editors.(Elsevier Science Publishers B.V.). 317-331 (1992)

Yasuyoshi Watanabe：“6R-四氢双蝶呤治疗婴儿自闭症和神经精神疾病的基础研究”婴儿自闭症的神经生物学。H。