細胞骨格系による中枢シナプス機能発現に分子機作に関する研究

细胞骨架系统表达中枢突触功能的分子机制研究

• 批准号: 04267213
• 负责人: 祖父江 憲治
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04267213/
• 关键词: 神経成長円錐; p60^<c-src>; PC12; アクチンフィラメント; カルシウムイオン; ゲルゾリン

神経成長円錐におけるp60^<c-src>は神経系において特に豊富に発現しているが、その生物学的意義は殆ど明らかになっていない。今回我々は神経系におけるp60^<c-src>の役割を探るため、ラット脳内での細胞下分画を特に細胞骨格との関連について詳細に検討した。先に我々が、PC12細胞を用いて明らかにしたようにp60^<c-src>は新生ラット脳の成長円錐分画に豊富に存在した。膜分画に局在するp60^<c-src>は幼若ラット脳においては非イオン性界面活性剤(NP-40)に対して可溶性であるが、脳成熟に伴い不溶性分画に移行した。不溶性分画への移行はアクチンフィラメントへの結合によって生じているものと考えられた。また、アクチンフィラメントへの結合は直接結合ではなく未同定の蛋白質を介していると推測され、免疫沈降と蛋白質リン酸化実験との組合せにより38kDaの蛋白質(p38)がp60^<c-src>と生体内で複合体を形成している可能性を示した。更に、成長円錐の膜分画では120kDaの蛋白質(p120)がその複合体形成に関与している可能性がある。ゲルゾリンの神経成長円錐への集積我々はアクチンフィラメント切断蛋白質であるゲルゾリンが神経系においては、おもにオリゴデロサイトとシュワン細胞に局在しミエリン形成に関わっていることを示した。しかし、成長円錐の活動が活発な幼若なラット脳では神経細胞にゲルゾリン免疫活性が強く観察される。この観察から、ゲルゾリンは成長円錐の運動性及びCa^<2+>感受性に関与していることを予測した。PC12細胞をNGF存在下で培養し抗ゲルゾリン抗体で染色すると、ゲルゾリンの免疫活性は細胞体と神経突起先端部の成長円錐、特に糸状突起に著明に局在していた。この結果は糸状突起のCa^<2+>依存性の活発な伸縮運動にゲルゾリンが関与していることを示すものである。

God 経 growth has drifted back towards &yen; cone に お け る p60 ^ < c - SRC > は god 経 department に お い て, に aboundant に 発 now し て い る が, そ の biological significance は perilous ど Ming ら か に な っ て い な い. Today to my 々 は god 経 department に お け る p60 ^ < c - SRC > cut を の service agent る た め, ラ ッ ト 脳 within で の cells under points draw を に cell bone と の masato even に つ い て detailed に beg し 検 た. に me first 々 が, PC12 cells を い て Ming ら か に し た よ う に p60 ^ < c - SRC > は freshman ラ ッ ト 脳 の growth has drifted back towards &yen; cone points draw に aboundant に exist し た. Membrane points draw に bureau in す る p60 ^ < c - SRC > は if young ラ ッ ト 脳 に お い て は non イ オ ン tonic (NP - 40) interface of sexual activity に し seaborne て soluble で あ る が and mature 脳 に い insoluble points draw に transitional し た. Insoluble points draw へ の transitional は ア ク チ ン フ ィ ラ メ ン ト へ の combining に よ っ て raw じ て い る も の と exam え ら れ た. ま た, ア ク チ ン フ ィ ラ メ ン ト へ の combining は directly で は な く failed with の protein を interface し て い る と speculation さ れ, immune sink と protein リ ン acidification be 験 と の combination せ に よ り 38 kda の protein (p38 lightning) が p60 ^ < c - SRC > と born in vivo で complex を form し て い を る possibility in し た. More points draw で に, growth cone has drifted back towards &yen; の membrane は 120 kda の protein (p120) が そ の complex formation に masato and し て い る possibility が あ る. ゲ ル ゾ リ ン 経 growth has drifted back towards &yen; の god cone へ の set product I 々 は ア ク チ ン フ ィ ラ メ ン ト cut protein で あ る ゲ ル ゾ リ ン が god 経 department に お い て は, お も に オ リ ゴ デ ロ サ イ ト と シ ュ ワ ン cells に bureau in し ミ エ リ ン form に masato わ っ て い る こ と を shown し た. The activity of the が active な, the young なラット脳で, the <s:1>, the にゲ, the ゾリ, and the <s:1> immune activity が are strong and く観 are observed される. こ の 観 examine か ら, ゲ ル ゾ リ ン は growth cone has drifted back towards &yen; の motility and び Ca ^ 2 + < > susceptibility に masato and し て い る こ と を be し た. PC12 cells を で cultivate し ゲ resistance in the presence of NGF plays ル ゾ リ で ン antibody staining す る と, ゲ ル ゾ リ ン の immunocompetence は cell body と god 経 protuberant apex of の growth has drifted back towards &yen; calyx cone, special に si に zhao Ming に bureau in し て い た. こ の results は si protrusion の Ca ^ 2 + > < dependency の live 発 な contractions に ゲ ル ゾ リ ン が masato and し て い る こ と を shown す も の で あ る.

项目成果

Kitagawa,K.: "The synapsin I brain distribution in ischemia." Neuroscience. 46. 287-299 (1992)

Kitakawa,K.：“缺血状态下突触蛋白 I 的大脑分布。”

Hayashi,K.: "Genomic structure of the human caldesmon gene." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 89. 12122-12126 (1992)

Hayashi,K.：“人类 caldesmon 基因的基因组结构。”

Tanaka,J.: "Morphological and biochemical analyses of contractile proteins(actin,myosin,caldesmon and tropomyosin)in normal and trnasformed cell." J.Cell Sci.(1993)

Tanaka, J.：“正常细胞和转基因细胞中收缩蛋白（肌动蛋白、肌球蛋白、钙结合蛋白和原肌球蛋白）的形态学和生化分析。”