細胞骨格系による中枢シナプス機能発現の分子機作に関する研究

细胞骨架系统表达中枢突触功能的分子机制研究

• 批准号: 05260214
• 负责人: 祖父江 憲治
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05260214/
• 关键词: アクチン; カルデスモン; ゲルゾリン; 細胞接着; 細胞運動性; アネキシンVI; カルスペクチン; 細胞膜骨格

1.神経系細胞の動的な細胞基質間接着構造とアクチン及びアクチン結合蛋白質神経細胞とアストロサイトにおけるアクチンフィラメント・ゲルゾリン・アクトミオシン系蛋白質(ミオシン・カルデスモン・トロポミオシン)の細胞内局在を検索した。その結果、神経成長円錐にゲルゾリンとカルデスモン・トロポミオシンがアクチンフィラメントとともに局在していることを見い出した。この所見は、成長円錐のCa依存性の活動性にゲルゾリンおよびアクトミオシン系収縮要素が関与していることを示している。また、培養アストロサイトがアクチンフィラメントを豊富に含む活発に運動する基質接着構造を形成することを明らかにした。この接着構造には、ゲルゾリンとアクトミオシン系蛋白質が集積しておりその運動性の物質的基盤となっていることが示唆された。2.神経細胞におけるアネキシンVI結合蛋白質神経細胞膜骨格のCa制御機構を明かにすることを目的として細胞膜直下に局在することが知られているCa結合蛋白質アネキシンVIの標的蛋白質の検索をラット脳の細胞骨格分画を用いて行った。その結果、アネキシンVIは、細胞膜骨格主要構成員カルスペクチンとCa及びリン脂質依存性に結合することを見いだした。この結合は、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸に特異的で、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノルアミンでは認められなかった。カルスペクチンは、F-アクチンと結合し、F-アクチン架橋作用を有することが知られている。このカルスペクチンの機能へのアネキシンVIの効果を落下球法による粘度測定及び遠心法により調べた。アネキシンVIのCa及びリン脂質依存性のカルスペクチンへの結合が、カルスペクチンのF-アクチンへの結合を阻害し、カルスペクチンのF-アクチン架橋作用を阻害することが明かとなった。このように、アネキシンVIは、細胞膜直下で細胞膜骨格の消失、再構築といった細胞膜骨格機能制御におけるCaセンサーとして働き得る可能性が示された。

1. God 経 system cells of な の dynamic matrix indirectly the tectonic と ア ク チ ン and び ア ク チ ン binding protein god 経 cells と ア ス ト ロ サ イ ト に お け る ア ク チ ン フ ィ ラ メ ン ト · ゲ ル ゾ リ ン · ア ク ト ミ オ シ ン is protein (ミ オ シ ン · カ ル デ ス モ ン · ト ロ ポ ミ オ シ ン) の cells inside bureau in を 検 cable し た. そ の results, god 経 growth has drifted back towards ¥ cone に ゲ ル ゾ リ ン と カ ル デ ス モ ン · ト ロ ポ ミ オ シ ン が ア ク チ ン フ ィ ラ メ ン ト と と も に bureau in し て い る こ と を see い out し た. こ は, growth has drifted back towards ¥ の see cone の Ca dependency の active に ゲ ル ゾ リ ン お よ び ア ク ト ミ オ シ ン department 収 shrinkage factor が masato and し て い る こ と を shown し て い る. ま た, cultivating ア ス ト ロ サ イ ト が ア ク チ ン フ ィ ラ メ ン ト を contains aboundant に む live 発 に movement す る matrix and then construct を form す る こ と を Ming ら か に し た. こ の then construct に は, ゲ ル ゾ リ ン と ア ク ト ミ オ シ ン is protein が set product し て お り そ の motility の material base plate と な っ て い る こ と が in stopping さ れ た. 2. God 経 cells に お け る ア ネ キ シ ン VI binding protein god 経 membrane skeleton の Ca system royal institution を Ming か に す る こ と を purpose と し て membranes by に bureau in す る こ と が know ら れ て い る Ca binding protein ア ネ キ シ ン VI の target protein の 検 cable を ラ ッ ト 脳 の cells bone points draw を using い て line っ た. そ の results, ア ネ キ シ ン main constitute part VI は, cell membrane skeleton カ ル ス ペ ク チ ン と Ca and び リ ン lipid dependency に combining す る こ と を see い だ し た. こ の は, ホ ス フ ァ チ ジ ル セ リ ン, ホ ス フ ァ チ ジ ン acid に specific で, ホ ス フ ァ チ ジ ル コ リ ン, ホ ス フ ァ チ ジ ル エ タ ノ ル ア ミ ン で は recognize め ら れ な か っ た. カ ル ス ペ ク チ ン は, F - ア ク チ ン と し, F - ア ク チ ン bridging role を have す る こ と が know ら れ て い る. こ の カ ル ス ペ ク チ ン の function へ の ア ネ キ シ ン VI の unseen fruit を falling ball method に よ る viscosity measurement and び far art に よ り adjustable べ た. ア ネ キ シ ン VI の Ca and び リ ン lipid dependency の カ ル ス ペ ク チ ン へ の が, カ ル ス ペ ク チ ン の F - ア ク チ ン へ の combining を resistance against し, カ ル ス ペ ク チ ン の F - ア ク チ ン bridging role を resistance against す る こ と が Ming か と な っ た. こ の よ う に, ア ネ キ シ ン VI は, cell membrane by で membrane skeleton の disappear, then construct と い っ た membrane skeleton function suppression に お け る Ca セ ン サ ー と し て 働 き risk る が shown さ れ た.

项目成果

Sobue,K.: "Ca2+-dependent regulation of the neuronal cytoskeleton.in Neuronal Cytoskeleton." CRC Press, 335 (1993)

Sobue,K.：“神经元细胞骨架中的 Ca2 依赖性调节。神经元细胞骨架。”

Tanaka,J.: "Morphological and biochemical analyses of contractile proteins(actin,myosin,caldesmon and tropomyosin)in normal and transformed cells." J.Cell Sci.104. 595-606 (1993)

Tanaka, J.：“正常细胞和转化细胞中收缩蛋白（肌动蛋白、肌球蛋白、钙结合蛋白和原肌球蛋白）的形态学和生化分析。”

Sobue,K.: "Molecular approach for smooth muscle differentiation:association of caldesmon isoformal interconversion with phenotypic modulation of smooth muscle cells." Biomed.Res.14. 147-153 (1993)

Sobue,K.：“平滑肌分化的分子方法：卡尔德斯蒙异构体互变与平滑肌细胞表型调节的关联。”

Haruna,M.: "Common structural and expressional properties of vertebrate caldesmon" Biochem.Biophys.Res.Commun.197. 145-153 (1993)

Haruna,M.：“脊椎动物 caldesmon 的常见结构和表达特性”Biochem.Biophys.Res.Commun.197。

Tanaka,J.: "Localization and characterization of gelsolin in nervous tissues--gelsolin is specifically enriched in myelin-forming cells--" J.Neurosci.(in press). (1994)

Tanaka, J.：“凝溶胶蛋白在神经组织中的定位和表征——凝溶胶蛋白在髓磷脂形成细胞中特别富集——”J. Neurosci.（出版中）。