細胞骨格系による中枢シナプス機能発現の分子機作に関する研究

细胞骨架系统表达中枢突触功能的分子机制研究

• 批准号: 06253212
• 负责人: 祖父江 憲治
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06253212/
• 关键词: 細胞膜骨格; カルシウム制御; アネキシンVI; カルスペクチン; シナプス小胞蛋白質

1.神経細胞におけるアネキシンVI結合蛋白質:神経細胞の細胞膜骨格機能Ca^<2+>制御機構を明かにすることを目的として、脳に比較的豊富に存在するCa^<2+>、燐脂質結合蛋白質アネキシンVIの標的蛋白質の検索を行なった。その結果、細胞膜骨格蛋白質カルスペクチンがアネキシン結合蛋白質であることを見いだした。さらに、再構成実験からアネキシンVIがCa^<2+>、燐脂質依存性にF-アクチン-カルスペクチンの細胞膜骨格を制御し得ることを明かにした。アネキシンVIが細胞膜骨格のCa^<2+>制御因子として働いている可能性が示唆される。2.シナプス小胞蛋白質シナプトタグミンとカルモデュリンの結合:神経伝達物質放出過程において重要な役割を果たすシナプトタグミンの結合蛋白質の解析を行った。その結果、シナプトタグミンがカルモデュリンと結合することを見出した。この結合は、Ca^<2+>非依存性で高塩濃度でも阻害されないことから、通常の状態で両者か結合していると考えられる。カルモデュリンの結合部位は、シナプトタグミンのC2領域であった。しかしながら、カルモデュリンは、シナプトタグミンとシナプス前膜蛋白質シンタキシン、ニューレキシンとの結合には影響を与えなかった。3.シナプス小胞蛋白質シナプシンIとカルスペクチンとの結合:シナプス前膜には、通常とは異なった形でカルスペクチンが存在し、これにシナプシンIが結合する。この生理的意義の解明を目的として、両蛋白質の結合解析を行なった。この結合はCa^<2+>非依存性で、両者がカルモデュリン結合能を有するにもかかわらずカルモデュリンは影響を与えなっかた。また、シナプシンIのcAMP依存性及びカルモデュリン依存性の燐酸化により、両者の結合は部分的に阻害された。両燐酸化の効果は相加的であった。シナプシンIは、その頭部及び中間部でカルスペクチンと結合する。接合部位の詳細なマッピングによる合成ペプチドを用いることにより、両者の結合の生理機能の解明が期待される。

1. The protein binding of VEGF VI: the function of Ca^<2+> regulatory mechanism of neuronal membrane. The protein binding of VEGF VI is the target protein of VEGF VI. As a result, the cell membrane skeleton protein is divided into two groups: In addition, the re-constitution of the cell membrane structure of Ca^<2+>, phospholipid-dependent F-protein-dependent protein-dependent protein dependent protein dependent The possibility of Ca^<2+> control factors in cell membrane skeleton and cell membrane metabolism is shown. 2. Analysis of binding proteins in small cell proteins: important factors in the release of substances from the brain The results of the study were as follows: The combination of Ca^<2+> is independent of Ca^<2+>. The concentration of Ca^<2+> is high. The combination of Ca ^<2 +> is normal. The binding site of the protein is the C2 domain of the protein. The combination of protein and protein in the membrane affects the development of the disease. 3. The binding of small cell proteins: the binding of small cell proteins. The physiological significance of the protein binding analysis is discussed. This binding is Ca^<2+> independent, and the binding energy is dependent on Ca ^<2 +>. The cAMP dependence and phosphorylation of protein I are partially inhibited by the binding of protein I. The result of the reaction is that The head and middle of the body are connected to each other. The physiological function of the binding site is expected to be clarified.

项目成果

Yano,H.: "Identification of two distinct promoters in the chicken caldesmon gene." Biochemi.Biophys.Res.Commun.201. 618-626 (1994)

Yano,H.：“鸡 caldesmon 基因中两个不同启动子的鉴定。”

Inui,M.: "Annexin VI binds to a synaptic vesicle protein,synapsin I." J.Neurochem.63. 1917-1923 (1994)

Inui,M.：“Annexin VI 与突触小泡蛋白突触蛋白 I 结合。”