HIV-1nef可溶性蛋白質のHIV感染T細胞に対する作用の解析

HIV-1nef可溶性蛋白对HIV感染T细胞的影响分析

• 批准号: 04269204
• 负责人: 藤井 陽一
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04269204/
• 关键词: HIV; nef; モノクローナル抗体

HIV-1調節遺伝子nefはウイルス遺伝子複製を抑制する遺伝子として報告されてきた。しかし、近年これら実験結果が否定される一方で、サル免疫不全ウイルス(SIV)による感染実験により、nef遺伝子がAIDS発症に必要不可欠であることが示された。nef遺伝子産物、nef蛋白質は25,27kdの分子量を持ち、ミリスチン化により細胞膜に局在するものと、非ミリスチン化により細胞質に局在するものがある。このことは、HIV感染によりnef蛋白が感染宿主血中に遊離する可能性を示している。筆者は、平成2,3年度本補助金により、nef遺伝子のクローニングとnef遺伝子産物の発現を大腸菌を用いて行い、精製蛋白を抗原として、抗nefウサギ抗体を作製し、HIV陽性者の疫学調査とともにnef陽性者の検出を上記抗血清を用い行った。更に、精製蛋白がヒト末梢リンパ球及び大腸リンパ球T細胞のCD4/CD8比を減少させること、また、これはnef蛋白がT細胞増殖を阻害することによることを証明してきた。このことは、可溶性nef蛋白が免疫異常を惹起する原因物質である可能性を示している。従って、可溶性という状態が実際に存在するかが焦点となった。そこで、今年度は更にnef蛋白を昆虫細胞を用い、作製し、モノクローナル抗体を得た。この抗体を用いたところ急性及び持続性HIV感染細胞表面にnef抗原活性が検出された。また、感染患者血中より、加えて持続性HIV感染細胞培養上清よりnef抗原活性の検出に成功した。これらの実験事実は、AIDSの発症にnef蛋白が重要な役割を持つことを示している。加えて、nef蛋白がHIV産生を抑制することを基礎実験として示し、nef蛋白がLatency periodの形成に関与する可能性を追及している。現在筆者は、HIV遅発病は可溶性nef抗原によるT細胞環境の遷移により、HIVトロピズムが変化することで成立する、という仮説を立て、研究をさらに進めている。

HIV-1 regulatory gene nef inhibits replication of HIV-1 genes. In recent years, the results of AIDS have been negative. One side is immune deficiency syndrome (SIV). The other side is infection. The other side is AIDS. Nef protein products, nef protein molecular weight of 25,27kd, and cell membrane, non-cell membrane, and cytoplasmic. This indicates the possibility that nef proteins may be free in the blood of infected hosts. The author of this grant in 2002 and 2003 conducted research on the development of nef gene products, the use of E. coli, the preparation of purified protein antigens, the production of anti-nef gene antibodies, the epidemiological investigation of HIV positive patients, and the detection of nef positive patients. The CD4/CD8 ratio of T cells in the peripheral blood and large intestine was reduced by purified protein, which was proved to inhibit T cell proliferation. The possibility of soluble nef protein as a causative substance for immune abnormalities is indicated.従って、可溶性という状态が実际に存在するかが焦点となった。This year, we are going to change the nef protein in insect cells, and we are going to use it to make antibodies. These antibodies are used to detect nef antigen activity on the surface of acute and persistent HIV infected cells. Successful detection of nef antigen activity in culture supernatant of persistent HIV infected cells from infected patients In fact, nef protein plays an important role in AIDS development. The possibility of nef protein inhibiting HIV production is also discussed. Now, the author believes that HIV infection and soluble nef antigen in T cell environment migration, HIV infection and transformation of the establishment, development, research progress.

项目成果

藤井 陽一: "バキュロウイルスの発現システム-生命科学を推進する分子ウイルス学-" 蛋白核酸酵素. 37. 2701-2706 (1992)

Yoichi Fujii：“杆状病毒表达系统-促进生命科学的分子病毒学-”蛋白质核酸酶37。2701-2706（1992）

Y.Fujii et al.: "Evidence for the role of human immurodeficiency virus type I Nef protein as a growth inhibitor to CD4-positive T lympbocytes and for the blocking of the Nef function by anti-Nef autibodies" Vaccine in press. (1992)

Y.Fujii 等人：“人类免疫缺陷病毒 I 型 Nef 蛋白作为 CD4 阳性 T 淋巴细胞生长抑制剂的作用以及抗 Nef 自身抗体阻断 Nef 功能的证据”正在出版的疫苗。