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アルビニズム(先天性白皮症)の本態に関する分子生物学的研究

白化病（先天性白化病）本质的分子生物学研究

基本信息

批准号：
05253202
负责人：
柴原茂樹
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

眼皮膚型先天性白皮症(OCA)は常染色体性劣性の代謝異常疾患であり、全身のメラニン色素の減少による典型的な症状(色白、白髪、赤色瞳孔)を呈する。我々はすでに、OCAの病因がメラニン合成の律速酵素であるチロシナーゼの構造遺伝子の変異によることを明らかにした。しかし、チロシナーゼ遺伝子の転写に重要な領域がまだ決定されていないため、未だ当該遺伝子の転写領域の変異の報告はない。一方、チロシナーゼ以外に、メラニン生成に関与する二つのチロシナーゼ関連酵素(TRP1とTRP2)が知られており、それらの機能異常により発症するOCAの存在も示唆されている。そこで、チロシナーゼ蛋白ファミリーの発現制御機構を総合的に解析し、以下のような成果を得た。1)我々はすでに39bpから成るエンハンサー領域を転写開始点より約2kb上流に見いだしており、この39bpをさらに詳細に解析した。すなわち、ホタルのルシフェラーゼ遺伝子をレポーターとして持つエンハンサー解析用の発現ベクターにチロシナーゼ遺伝子のエンハンサーを組み込み、HeLa細胞とメラニン合成という形質を維持しているMeWoヒトメラノーマ細胞に導入・発現させ、同遺伝子のエンハンサーを決定した。また、エンハンサー領域に種々の塩基置換を導入して、色素細胞特異的な発現に必須な塩基配列を決定した。さらに、同色素細胞特異的エンハンサーに作用する蛋白因子が、メラノーマ細胞の核に存在することを、ゲルシフトアッセイにより確認した。しかし、同様な蛋白がHeLa細胞にも存在しており、MeWoの蛋白と区別することができなかった。(投稿準備中)2)ヒトTRP1遺伝子プロモーターの機能解析を1)と同様におこなったが、TRP1遺伝子の色素細胞特異的な発現に必要な領域を決定することができなかった。一方、マウスTRP1プロモーターでは、色素細胞特異的な発現に必要な領域をほぼ決定できた。よって、ヒトとマウスでは調節機構が異なることが示唆される。3)ヒトTRP2cDNAのクローニングに成功し、その機能解析によってTRP2にドーパクロームトートメラーゼ(DT)活性があることを、初めて確認した。4)ヒトTRP2/DT遺伝子を単離し、メラノサイト特異的発現に必要なシスエレメントを決定した。(投稿準備中)

Ocular cutaneous congenital leukosis (OCA) is characterized by autosomal abnormalities and reduced pigment levels throughout the body. We now understand that the cause of OCA is due to variations in the structural genes of the enzymes that regulate the synthesis of guanine and guanine. In the case of a dispute, the court shall determine whether the dispute shall be settled or not, and whether the dispute shall be settled or not. The presence of OCA in the presence of TRP1 and TRP2, which are related to the production of OCA, is detected in the presence of OCA in the presence of OCA. The following results were obtained from the analysis of the integration of the development control mechanism of the protein and protein 1)The 39 bp domain is the starting point of the 39 bp domain. HeLa cell culture synthesis and quality maintenance. HeLa cell culture synthesis and quality maintenance. HeLa cell culture introduction. HeLa cell culture development. HeLa cell culture. HeLa cell culture. HeLa cell culture. In addition, the gene exchange of pigment cells in different regions must be determined. The presence of protein factors in the nucleus of the same pigment cell is confirmed. The same protein exists in HeLa cells, and the same protein exists in MeWo cells. (Submission preparation) 2) Functional analysis of TRP1 gene 1) Determination of necessary fields for pigment-cell-specific development of TRP1 gene One side, TRP 1, TRP 1, TRP 1 The regulation mechanism is different. 3) TRP2 cDNA was successfully cloned and its function was analyzed. The activity of TRP2 cDNA (DT) was initially confirmed. 4) TRP2/DT is a unique and unique feature that must be determined. (In preparation for submission)