ショウジョウバエ神経系細胞株を用いた変態ホルモン除去による細胞死誘導機構の解析

果蝇神经系统细胞系去除变态激素诱导细胞死亡机制分析

• 批准号: 10161210
• 负责人: 程 久美子
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nippon Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10161210/
• 关键词: Drosophila; apoptosis; 20-hydroxyecdysone; reaper; hid; EcR

昆虫は、変態基に幼虫組織を排除し成虫組織を形成する。必要がなくなった幼虫組織は死に至るが、これはアポトーシスと呼ばれる能動的な死であると考えられている。このような細胞死の機構を解析することは、変態の機構を解明する上で重要と考える。ショウジョウバエにおける細胞死は胚発生期、さらに中枢神経系においては変態期、羽化直後に起こることが報告されている。これらの細胞死は変態ホルモンであるecdysteroidの生体内濃度の変化と発現しているecdysone受容体タイプが深く関わっている可能性が示唆されている(Robinow,et.al.,1993)。一方、ショウジョウバエにおいては突然変異系統の解析から、reaper,hid(head involution defective),grimという細胞死を誘導する遺伝子が単離されている(White,et.al.,1994;Grether,et.al.,1995;Chen,et.al.,1996)が、これらの遺伝子の発現がどのように制御されているかはまだ明らかではない。本研究では、昆虫の変態における細胞死の機構を、樹立した細胞株をモデル系として用いて解析し、20-hydroxyecdysone(HE)による細胞死の制御、それに伴う細胞死誘導遺伝子の発現の変化を検討した。結果は以下に示す。(1)20-HEを加えると、胚由来細胞株S2に細胞死が誘導された。(2)20-HEを除去すると、幼虫中枢神経系由来細胞株BG2-c2に細胞死が誘導された。(3)20-HEは、少なくともreaper,hidの発現を制御する作用があることが明らかとなった。調べた細胞株においては20-HEはgrimの発現には影響を与えなかった。(4)20-HEによって誘導されるS2の細胞死では、reaper,hidが強く発現し、caspase-3様活性が上昇した。これは主にEcRBを介する可能性が考えられる。(5)20-HEで細胞死が誘導されないBG3-c2ではhidの発現が抑制され、主にEcR Aを介してる可能性が示唆された。(6)20-HE除去により細胞死が誘導されるBG2-c2では、EcR AとBが強く発現しており、20-HE除去により、EcR Aを介したhidの発現抑制が解除され、EcR AまたはBを介して発現していたreaperと共に細胞死が引き起こされるものと考えられる。

Insect larva tissue formation It is necessary for the larva to die. The analysis of the mechanism of cell death is important for understanding the mechanism of cell death. Cell death, embryonic development, central nervous system, post-emergence, post-emergence and post-mortem The possibility of ecdysone receptor concentration in vivo changes due to cell death (Robinow,et.al., 1993)。A side, a side, a 1994;Grether,et.al., 1995;Chen,et.al., 1996), the development of the Chinese people's heritage, the development of the In this study, we investigated the mechanism of cell death in insects, the establishment of cell lines, the use of 20-hydroxyecdysone(HE), the control of cell death, and the evolution of cell death-inducing genes. The results are shown below. (1)20-HE was added to S2 cell line, which was derived from embryo. (2)20-HE was removed and the larval central nervous system was induced by cell death from cell line BG2-c2. (3)20-HE, less than two reaper,hid development and control of the role of two. 20-HE cell strain is affected by the development of grims. (4)20-HE induced cell death, reaper,hid increased and caspase-3 activity increased. The possibility of this is examined. (5) The possibility of 20-HE inducing cell death, BG3-c2 inhibiting hid expression and EcRA mediating cell death was suggested. (6)20-HE removal of BG2-c2, EcR A and B strongly inhibited cell death induction, 20-HE removal of BG2-c2, EcR A and B strongly inhibited cell death induction, 20-HE removal of BG2-c2, EcR A and B strongly inhibited cell death induction, 20-HE removal of BG2-c2, EcR A and B strongly inhibited cell death induction, 20-HE removal of BG2-c2, EcR A and B strongly inhibited cell death induction.

项目成果

Masanari Takamiya: "Identification of RNA as a substance responsible for the survival of chick spinal motoneurons in vitro." Proc.Japan Acad.in press.

Masanari Takamiya：“鉴定 RNA 作为负责小鸡脊髓运动神经元体外存活的物质。”

Yasumitsu Takagi: "Laminin-dependent integrin clustering with tyrosine-phosphorylated molecules in a Drosophila neuronal cell line." Neurosci. Lett.244. 149-152 (1998)

Yasumitsu Takagi：“果蝇神经元细胞系中层粘连蛋白依赖性整合素与酪氨酸磷酸化分子聚集。”

Kumiko Ui-Tei: "Induction of apoptosis in a Drosophila neuronal cell line by calcium ionophore." Neurosci. Lett.203. 191-194 (1996)

Kumiko Ui-Tei：“钙离子载体诱导果蝇神经细胞系凋亡。”

Kumiko Ui-Tei: "Purification of a novel substance from skeletal muscles with motoneuron survival activity : It is non-peptidergic." Proc.Japan Acad.in press.

Kumiko Ui-Tei：“从骨骼肌中纯化一种具有运动神经元存活活性的新物质：它是非肽能的。”

Masatoshi Nagano: "H-7-induced apoptosis in the cells of a Drosophila neuronal cell line through affecting unidentified H-7-sensitive substance(s)." Neurosci. Res.31. 113-121 (1998)

Masatoshi Nagano：“H-7 通过影响未鉴定的 H-7 敏感物质诱导果蝇神经细胞系细胞凋亡。”