RNA干渉法による脊髄運動ニューロンの発生・分化に関わる分子の機能解析

利用RNA干扰法对参与脊髓运动神经元发育和分化的分子进行功能分析

• 批准号: 16015230
• 负责人: 程 久美子
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16015230/
• 关键词: 遺伝子; 神経科学; 脳; 神経; 脳神経疾患; 発生分化; 運動ニューロン; 細胞死

神経細胞は発生の初期に過剰に産生され、分化の過程で約半数が死に至る。このような運動ニューロン自然細胞死に関わる分子、さらには成熟運動ニューロンの分化生存維持に関わる分子を同定し作用機序を解明していくことは、運動ニューロン病を始めとする種々の神経変性疾患発症機構の解明および治療法の開発に結びつくと考える。我々は、ニワトリの運動ニューロン自然細胞死が起こる、胚期の運動ニューロン初代培養に対し生存活性を示す物質を骨格筋抽出物から分離精製したが、得られた物質は、タンパクではなく7SL-RNAのニワトリ相同遺伝子であった。in situ hybridizationにより、7SL-RNAは骨格筋と運動ニューロンに特異的に局在していることがわかった。そこで、エレクトロポレーション法による7SL-RNAのin ovo RNA interferenceを行った結果、7SL-RNAのノックダウンにより脊髄の細胞に細胞死が誘導されたことから、7SL-RNAは脊髄ニューロンの生存に関わる物質であると考えられた。現在、骨格筋からの逆行性輸送についても検討を行っている。また、ニワトリ胚脊髄では、孵卵後4日から10日目の間に、運動ニューロンの自然細胞死がおこり、残った未分化細胞群が劇的な変化を起こし、神経系としての機能を獲得する。この期間に発現量が大きく増減する遺伝子のスクリーニングを行い、新規細胞増殖因子(spinal cord-derived growth factor)を始めとする、数種の興味深い遺伝子を単離し、これらの遺伝子の発現パターンを解析した。現在、これらの遺伝子の機能解析をRNA interference法、等を用いて行っている。

In the early stage of the development of Shinto cells, に pass through に to produce され. During the process of differentiation <e:1>, で about half of the が die に to る. こ の よ う な movement ニ ュ ー ロ ン natural cell death に masato わ る molecules, さ ら に は mature movement ニ ュ ー ロ ン の differentiation survival maintain に masato わ を る molecules with certain し machine sequence を interpret し て い く こ と は, sports ニ ュ ー ロ ン disease beginning を め と す る kind 々 の 経 god - disorder 発 disease agency の interpret お よ び therapy の open 発 に knot び つ く と exam え る. I 々 は, ニ ワ ト リ の movement ニ ュ ー ロ ン natural cell death が こ る, embryonic stage の movement ニ ュ ー ロ ン original culture に し seaborne survival activity を を す material in skeletal muscle extract か ら separation of refined し た が, ら れ た material は, タ ン パ ク で は な く 7 sl - RNA の ニ ワ ト リ same heritage 伝 son で あ っ た. The in situ hybridization に よ り, 7 sl - RNA は skeletal muscle と movement ニ ュ ー ロ ン に specific に bureau in し て い る こ と が わ か っ た. Youdaoplaceholder0 による で, エレ トロポレ トロポレ ショ ショ ショ による method による7SL-RNA <s:1> in ovo RNA Line interference を っ た results, 7 sl - RNA の ノ ッ ク ダ ウ ン に よ り spinal marrow cells の に induced cell death が さ れ た こ と か ら, 7 sl - RNA は spinal marrow ニ ュ ー ロ ン の survival に masato わ る material で あ る と exam え ら れ た. Now, the bone, grid and sinew <s:1> ら <s:1> retrograde transmission に に て て 検 検 for を transmission って る る. ま た, ニ ワ ト リ embryo spinal marrow で は, 4 after incubation か ら に, movement between 10 mesh の ニ ュ ー ロ ン の natural cell death が お こ り and residual っ た undifferentiated cells in が な variations change since を こ し, god 経 と し て の function を get す る. Quantities during こ の に 発 now が き く raised minus す る heritage 伝 son の ス ク リ ー ニ ン グ を い, new rules cells raised colonization factor (spinal cord - derived growth factor) beginning を め と す る, several の tumblers い heritage 伝 son を 単 し, こ れ ら の heritage 伝 son の 発 now パ タ ー ン を parsing し た. Now, the functions of the 伝 sub-<s:1> of the <s:1> cultural heritage are analyzed. Youdaoplaceholder2 RNA interference method, etc. are used in を て て lines って る る.

项目成果

siDirect: highly effective, target-specific siRNA design software for mammalian RNA interference

• DOI: 10.1093/nar/gkh442
• 发表时间: 2004-07-01
• 期刊: NUCLEIC ACIDS RESEARCH
• 影响因子: 14.9
• 作者: Naito, Y;Yamada, T;Saigo, K
• 通讯作者: Saigo, K

Aph-1 contributes to the stabilization and trafficking of the γ-secretase complex through mechanisms involving inter-and intramolecular interactions

Aph-1 通过涉及分子间和分子内相互作用的机制有助于 γ-分泌酶复合物的稳定和运输

• 发表时间: 2005
• 期刊: J Biol Chem 280
• 作者: Niimura M;Isoo N;Takasugi N;Tsuruoka M;Ui-Tei K;Saigo K;Morohashi Y;Tomita T^*;Iwatsubo T^*
• 通讯作者: Iwatsubo T^*

Active sites in the carboxyl-terminal region of the laminn a chain in Drosophila Neuronal cell spreading.

果蝇神经元细胞扩散中核纤层链羧基末端区域的活性位点。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Arch.Insect Biochem.Physiol. 56
• 作者: Aoki Y;Watanabe M;Amikura T;Obata H;Sekine M;Yahata;Tanaka K.;五十嵐 道弘;Sarthy VP.;Sarthy VP.;Sarthy VP.;Huang YH.;Chen W.;Huang Y.;程 久美子;Naito Y.;Takagi Y.
• 通讯作者: Takagi Y.

II.ゲノムネットワークリソースの整備 7.RNAiのメカニズムとsiRNA配列設計法

II. 基因组网络资源开发 7. RNAi机制和siRNA序列设计方法

• 发表时间: 2004
• 期刊: 蛋白質 核酸 酵素 増刊号
• 作者: Aoki Y;Watanabe M;Amikura T;Obata H;Sekine M;Yahata;Tanaka K.;五十嵐 道弘;Sarthy VP.;Sarthy VP.;Sarthy VP.;Huang YH.;Chen W.;Huang Y.;程 久美子;Naito Y.;Takagi Y.;程 久美子;程 久美子
• 通讯作者: 程 久美子

RNAiの原理と有効なsiRNA設計法

RNAi原理和有效的siRNA设计方法

• 发表时间: 2005
• 期刊: 実験医学 23
• 作者: Aoki Y;Watanabe M;Amikura T;Obata H;Sekine M;Yahata;Tanaka K.;五十嵐 道弘;Sarthy VP.;Sarthy VP.;Sarthy VP.;Huang YH.;Chen W.;Huang Y.;程 久美子
• 通讯作者: 程 久美子