新機能性RNA,7SL-RNAの神経細胞生存活性と作用機序の解明

阐明新型功能性RNA 7SL-RNA 的神经元存活活性和作用机制

• 批准号: 14035248
• 负责人: 程 久美子
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14035248/
• 关键词: 遺伝子; RNA; 神経; 細胞死; 運動ニューロン; 発生分化

私達は、ニワトリの自然細胞死が起こる胚期の運動ニューロンに対し生存活性を示す物質を骨格筋から分離精製したが、最終的に単離されたものはタンパクではなくRNAであると結論された。そこで、筋よりtotal RNAを抽出してDEAE sepharose fast flow columnにより分画し、活性画分よりcDNAライブラリーを作製した。各クローンの塩基配列を決定して、候補と考えられるcDNA断片を得た。その配列を元に全領域をクローニングした結果、得られた遺伝子は、7SL-RNAのニワトリ相同遺伝子であることがわかった。in situ hybridizationの結果、7SL-RNAはニワトリ胚発生期の神経筋接合形成直後の6日目胚腰部において、骨格筋、脊髄運動ニューロンさらに後根神経節で検出されたが、この時期以前においては、脊髄運動ニューロン・後根神経節でのシグナルは認められ素、骨格筋での特異的発現が認められた。このような局在の特異性は発生が進むに従って消失していった。さらに、ラットにおいても同様の発現パターンがみられた。このことは、運動ニューロン自然細胞死に関わる物質として、タンパクではなくRNAが関与している可能性を示唆するものであり、RNAの新しい機能を示すことになる。現在、7SL-RNAが骨格筋から運動ニューロンへ逆行性に運ばれる可能性、および7SL-RNAによる運動ニューロン生存活性の作用機序を解析している。

The natural cell death of the embryo is the first step in the process of separation and purification of the material. The total RNA was extracted from DEAE sepharose fast flow column, and the cDNA was extracted from the active DNA. The sequence of each gene is determined, and the candidate cDNA fragments are obtained. The sequence of genes in the whole domain is called "gene expression". As a result of situ hybridization, 7SL-RNA was detected in the 6-day-old embryo waist, spinal cord, and spinal cord after the formation of neuromuscular junction in the embryonic period. Before this period, the specific occurrence of neuromuscular junction was detected in the middle, spinal cord, and spinal cord. This is the first time that a person has ever been involved in a crime. In the middle of the day, the same thing happened. This is the first time that a person has ever been involved in a biological activity. Now, the possibility of 7SL-RNA retrogression in skeletal muscle movement and the mechanism of 7SL-RNA retrogression in skeletal muscle movement are analyzed.

项目成果

程久美子: "哺乳類培養細胞でのsiRNAによるRNAiプロトコル"細胞工学. 21. 1058-1061 (2002)

Kumiko Hodo：“在培养的哺乳动物细胞中使用 siRNA 的 RNAi 方案”《细胞工程》21. 1058-1061 (2002)。

Doi N.: "Short-Interfering-RNA-mediated gene silencing in mammalian cells requires Dicer and eIF2C translation initiation factors"Curr Biol.. 13. 41-46 (2003)

Doi N.：“哺乳动物细胞中的短干扰RNA介导的基因沉默需要Dicer和eIF2C翻译起始因子”Curr Biol.. 13. 41-46 (2003)

Hamada T.: "The expression of SCDGF/PDGF-C/fallotein and SCDGF-B/PDGF-D in the rat central nervous system"Mech.Dev.. 112. 161-164 (2002)

Hamada T.：“大鼠中枢神经系统中 SCDGF/PDGF-C/法洛汀和 SCDGF-B/PDGF-D 的表达”Mech.Dev.. 112. 161-164 (2002)

Uwo, M.F.: "Replacement of midgut epithelium in the greater wax moth, Galleria mellonela, during larval-pupal moult"Cell Tissue Res.. 308. 319-331 (2002)

Uwo, M.F.：“幼虫蛹换羽过程中大蜡蛾（Galleria mellonela）中肠上皮的替换”细胞组织研究 308. 319-331 (2002)

高橋史峰: "運動ニューロン生存活性を示す7SL RNAの同定と分布"最新医学. 57. 106-110 (2002)

Fumiho Takahashi：“表现出运动神经元存活活性的 7SL RNA 的鉴定和分布”现代医学 57. 106-110 (2002)。