胸腺内分化モデルの確立による自己認識T細胞クローンの選択に関する分子免疫学研究

建立胸腺内分化模型选择自我识别T细胞克隆的分子免疫学研究

• 批准号: 05272106
• 负责人: 垣生 園子
• 金额: $ 3.2万
• 依托单位: Tokai University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05272106/
• 关键词: トランスジエニックマウス; T細胞抗原レセプター(TCR); positive selection; negative selection; MHC拘束性; 胸腺細胞

1)TCR transgenic(Tg)マウスの系統置換とそれを用いたin vitroに於けるpositive selectionの誘導:MHC11及びMHC1拘束性に分化するT細胞クローンからなるTCR TgマウスをMHCの異なる系統と戻し交配し、MHC拘束性のある系統(positivebackground=PB)と拘束性のない系統(nautral background=NB)を樹立した。これらマウス胸腺から得たCD4^+CD8^+(DP)細胞を2DG処理によってリンパ球を除去した胎仔胸腺葉(FTL)或いは細胞株のmonolayerと共培養した。その結果、CD4^+(4SP)・或いはCD8^+(8SP)細胞の誘導は2DG-FTLとの培養系に於いて成功した。すなわち、【.encircled1.】MHC11拘束性 OVA認識TCR-TgマウスのDP胸腺細胞はPB-FTLでのみ4SP細胞へ分化し、NB-FTLでは分化しなかった。従って、誘導された4SP細胞は、TCR-MHC相互作用によって選択的に分化したT細胞と考える。来年度は4SPへの分化阻止を誘導する系により関連分子を明らかにする。【.encircled2.】MHC1拘束性 Ld認識のTCR-TgマウスのDP胸腺細胞はPB-FTLで 8SP細胞に分化した。しかし、NB-FTLとの培養に於いても、頻度は低いながら、8SP細胞が検出された。誘導された8SP細胞は、Tg-TCRとNBのMHC 1と交差反応の結果出現したのか、或いはTCRを介さないシグナルによって分化した可能性がある。この点は、8SP細胞の選択分化を考えるうえで重要な課題であるので、来年度解析を続ける。2)in vitroに於ける negative selectionの誘導:OVA-TCR-Tgマウス胸腺と種々の細胞株との培養系にOVA peptideを加えると、PB或いはNB由来いずれのDP細胞でも、当該peptideがPBのMHC-11によって提示される場合のみapoptosisによる死滅減少が誘導された。peptide提示細胞は胸腺ストローマ細胞に限定されず、I-Ad+であればB細胞でも繊維芽細胞でもapoptosis誘導可能であった。今後同一peptideによる成熟T細胞とのapoptosisとの比較より関連分子を検索する。

1)TCR transgenic(Tg) system replacement and use in vitro in the induction of positive selection:MHC11 and MHC1 binding differentiation of T cells, TCR Tg system MHC binding system (positive background =PB) and binding system (neutral background=NB) established. CD4^+CD8^+(DP) cells were removed from fetal thymus (FTL) or isolated from fetal thymus by 2DG treatment. CD4^+(4SP) or CD8^+(8SP) cells were successfully induced in 2DG-FTL culture lines.すなわち、【.encircled1.】MHC-11 binding OVA recognizes TCR-Tg and DP thymocytes, PB-FTL and NB-FTL differentiate. TCR-MHC interaction is the key to the differentiation of 4SP cells. In the future, the differentiation of 4SP can be induced by related molecules.【.encircled2.】MHC-1 binding Ld recognizes TCR-Tg and DP thymocytes and PB-FTL-8SP cells. NB-FTL cells were cultured at low frequency and 8SP cells were cultured at low frequency. 8SP cells were induced to differentiate into Tg-TCR and MHC 1 cells. The selection and differentiation of 8SP cells are important topics for future analysis. 2) Induction of negative selection in vitro:OVA-TCR-Tg was induced by the addition of OVA peptide to DP cells in culture lines, PB or NB was induced by the addition of OVA peptide to MHC-11. Peptide suggests that cells may be induced by apoptosis in thymic cells. Comparison of apoptosis of mature T cells with the same peptide

项目成果

B.C.Sydora,S.Habu and M.Taniguchi: "Intestinal intraepithelial lymphocytes preferetially repopulate the intestial epithelium." Int.Immunol.5. 743-751 (1993)

B.C.Sydora、S.Habu 和 M.Taniguchi：“肠上皮内淋巴细胞优先重新填充肠上皮。”

H.Tamauchi,T.Sasahara,and S.Habu.: "CD4^+CD8^+cells lacking self-Mis reactiove T cells are induced in mesentric lymph nodes of Salmonella enteritidis infected mice." Immunol.Letters.8. 123-130 (1993)

H.Tamauchi、T.Sasahara 和 S.Habu.：“在肠炎沙门氏菌感染小鼠的肠系膜淋巴结中诱导缺乏自身反应性 T 细胞的 CD4^ CD8^ 细胞。”

M.Akiyama,M.Yokoyama,M.Katsuki,S.Habu and T.Nisimura: "Lymphocyte infiltration of the skin in transgenic mice carrying the human interleukin-2 gene" Arch Dermatol.Res.285. 379-384 (1993)

M.Akiyama、M.Yokoyama、M.Katsuki、S.Habu 和 T.Nisimura：“携带人白细胞介素 2 基因的转基因小鼠皮肤的淋巴细胞浸润”Arch Dermatol.Res.285。

K.Hozumi、A.Kobori,T.Sato,H.Nozaki,S.Nishikawa,T.Nishimura and S.Habu.: "Pro-T cells in fetal thymus express c-kit and RAG-2 but lack TCR-gene re-arrangement" Eur.J.Immunol.(In press). (1994)

K. Hozumi、A. Kobori、T. Sato、H. Nozaki、S. Nishikawa、T. Nishimura 和 S. Habu.：“胎儿胸腺中的 Pro-T 细胞表达 c-kit 和 RAG-2，但缺乏 TCR 基因(1994)

T.Sato,T.Sasahara,Y.Nakamura,T.Osaki,T.Takakuma.Y.Arata,Y.Kumagai,M.Katsuki and S.Habu.: "Naive T cells can mediate delayed-type hypersensitivity(DTH)response in transgenic mice" Eur.J.Immunol.(In press). (1994)

T.Sato、T.Sasahara、Y.Nakamura、T.Osaki、T.Takakuma.Y.Arata、Y.Kumagai、M.Katsuki 和 S.Habu.：“幼稚 T 细胞可以介导迟发型超敏反应 (DTH)