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ピリジルアミノ化法を用いた脳特異的糖鎖の構造解析と脳内分布

使用吡啶胺化方法对脑特异性糖链和脑内分布进行结构分析

基本信息

批准号：
05274218
负责人：
長谷純宏
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05274218/
关键词：
脳マウス二次元マップピリジルアミノ化糖蛋白質糖鎖

项目摘要

糖蛋白質糖鎖の糖鎖構造決定が多く報告され、数多くの糖鎖構造に関する見知が得られて来た。これに伴い、糖蛋白質糖鎖の構造が臓器特異的に現われる例が報告されている(Rademacherら1988)。本研究では、PA糖鎖の二次元マップを用い、動物の組織、特に脳に特異的に量多く発現している糖鎖(脳特異的糖鎖)の検出を行ない、それらの構造決定を行う。次に、これらのPA糖鎖を大量調製し糖鎖に対する抗体の作成やレクチンの選定を行う。得られた抗体やレクチンを用いて脳特異的糖鎖の結合した糖蛋白質を見い出し、これら脳特異的糖鎖や糖蛋白質の、脳組織の発生や分化にともなう増減や脳内分布を調べ、脳におけるこれらの糖鎖の役割解析の基礎とする。本年度は動物(主にマウス)の肝臓、膵臓、胸腺、脳(大脳、小脳、脳幹)、心臓等を凍結乾燥し(池中)、各臓器よりヒドラジン分解-N-アセチル化法により糖鎖を切り出し、ピリジルアミノ化した(長谷)。PA糖鎖を陰イオン交換クロマトグラフィーにより電荷数で分離後、各画分をシアリダーゼ消化し、得られた中性PA糖鎖をサイズ分画HPLCと逆相HPLCを用いPA糖鎖の二次元マップを作成した(長谷)。各臓器より得られた二次元マップを比較し、脳に特異的に量多く検出される糖鎖2種類を選び出した(長谷)。脳特異的糖鎖を、マウスの脳より上記分析と同様な方法を用いて分離精製し、構造決定できる量を調製した。メチル化分析や酵素消化等を組み合わせ構造を決定した(長谷)。

The sugar lock structure of glycoprotein sugar lock determines the structure of sugar lock, and the structure of sugar lock of sugar protein and protein determines the structure of sugar lock. A report on the specific case of glycoprotein and sugar lock structure and device specificity (Rademacher 1988). This study uses a large amount of two-dimensional materials, animal tissues, and specific properties of PA sugar locks.く発appears しているsugar lock (脳specific sugar lock) の検出を行ない, それらのstructural decision を行う. The sugar-locked antibody is prepared in large quantities by the sugar-locked PA sugar-locked antibody. Obtained られたantibody やレクチンを using いて-specific sugar-locked の-binding したglycoprotein を见い出し, これら脳-specific sugar-locked やglycoproteinの, 脳 tissue の発生やdifferentiation にともなうincrease や脳 intra-distribution を Adjustment べ, 脳におけるこれらのsugar lock のservice cut analysis のbasic とする. This year's animal (main) liver, liver, thymus, breast (large breast, small breast, dried breast), heart, etc. are freeze-dried (in the pond) , each boiler よりヒドラジン decomposition-N-アセチル化法によりsugar lock をcutり出し, ピリジルアミノ化した(长谷). PA sugar lock を Yin イオン exchange クロマトグラフィーにより charge number で separation, each draw points をシアリダーゼ digestion し, get られNeutral PA sugar lock をサイズ divided HPLC and reverse phase HPLC were made using いPA sugar lock の two-dimensional マップを (hase). Each device has two kinds of sugar locks, one is the two-dimensional マップを comparison, and the other is the special に多多く検出されるsugar lock 2 kinds of を选び出した (hase). The specific sugar locks and maizesu are analyzed according to the above method, separated and refined using the same method, and the structure is determined by the quantity and modulation. The chemical analysis, enzyme digestion, etc. are the combination of the structure and the determination of the structure (hase).