权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

HMGタンパク質のDNA結合ドメイン構造と認識機構の解析

HMG蛋白DNA结合域结构及识别机制分析

基本信息

批准号：
09249217
负责人：
吉田充輝
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Tokyo University of Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1,HMG1のDNA結合ドメインのDNA認識機構の解析HMG1タンパク質のDNA結合に主役的に働くBox Bの中で、DNAへのインターカレーションが予測される101F、102Fの結合における重要性を実験的に明らかにした。さらに分子動力学シミュレーションにより、これらの側鎖の配位と結合との関連を解析した。その結果、Box BのDNAへの結合が102F側鎖のDNAへのインターカレーションにより高められること、この側鎖の方向性を101Fが規定していることが明らかとなった。2,HMG1、2がもつDNAインテグレーションの促進機能の発見研究の過程で、HMG1、HMG2が外来遺伝子の宿主ゲノムDNAへの組込み(インテグレーション)を促進する活性を有することを初めて見い出し、促進反応について詳細な検索を行った。HMG1、2を発現するネオマイシン耐性遺伝子を持つプラスミドをHeLa細胞に導入し、G418で選択した。G418耐性コロニー数を計測したところ、コントロールプラスミドを導入の場合と比較して約10倍に増加していた。G418耐性細胞内にインテグレートされたプラスミドのコピー数も約2倍に増加していた。さらに、HMG1、2mRNAに対するアンチセンスRNAをHeLa細胞で発現させるとコロニー数は約1/2に減少した。以上の結果より、HMG1、2が外来遺伝子の宿主ゲノムへのインテグレーションの促進反応に直接関与していることが明らかになった。3,HMGタンパク質によるDNA依存性プロテインキナーゼ活性促進機構を詳細に解析した。

1. Analysis of DNA recognition mechanism of HMG1 DNA binding protein: Box B, 101F, 102F, 102F, 1F, 102F. Molecular dynamics analysis of the coordination and binding of the two molecules As a result, the DNA binding of Box B is 102F. The DNA binding of Box B is 102 F. 2. HMG1 and HMG2 are involved in the study of the development of DNA promoter function. HMG1 and HMG2 are involved in the development of DNA promoter activity in host DNA promoter system. HMG1 and 2 were found to be resistant genes that were introduced into HeLa cells and selected from G418. The G418 has a 10-fold increase in the number of measurements and applications. The number of cells in G418-tolerant cells increased by about 2 times. HMG1 and 2mRNA expression in HeLa cells decreased by about 1/2 As a result, HMG1 and HMG 2 are directly related to the host of the alien gene. 3. Detailed analysis of DNA-dependent mechanisms for promoting HMG activity