课题基金 / 基金详情

HMGタンパク質のDNA結合ドメイン構造と認識機構の解析

HMGタンパク質のDNA結合ドメイン構造と認識機構の解析
HMG蛋白DNA结合域结构及识别机制分析
批准号：
07268219
负责人：
吉田 充輝
金额：
$1.66万
依托单位：
Tokyo University of Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1995 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07268219/
关键词：
HMG1タンパク質HMG2タンパク質DNA結合性タンパク質クロマチン表面プラズモン共鳴ヌクレオソームタンパク質工学

项目摘要

项目成果

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1、HMG2のDNA結合領域の構造解析:HMG2のcDNAより、DNA結合ドメインAおよびB、さらにAB(AとBがリンカーを挟んで連結した配列)をコードする配列を発現ベクターに挿入し、大腸菌内で高発現させ、均一になるまで精製する系を確立した。現在、この系を用いて標識した試料につき、大阪大学蛋白質研究所など3研究機関の協力のもと、NMRにより高次構造解析を進行中であり、基礎データを順調に蓄積しつつある。引き続き解析を継続する。また、奈良先端技術大学院大学の協力のもとにX線回折による解析も同時に進行中である。2、表面プラズモン共鳴(SPR)センサ、蛍光測定を用いたHMGタンパク質とDNAとの相互作用の解析:上記の方法でDNA結合ドメインを含む各種配列を高発現、精製した。それらとDNAとの相互作用を、表面プラズモン共鳴現象を測定するBIAcore(Pharmacia)装置を用いて解析をおこない、各DNA結合ドメインに連なる塩基性配列が強い結合と安定性に重要であることを定量的に明かにした。さらに蛍光測定法をもちいた解析より、各芳香族アミノ酸の存在状態を明らかにできた。3、HMGタンパク質によるDNA bending機構の解析:種々の長さをもつBending,Non-bending型のDNAを作成、これらを用いてHMG中のDNAの折れ曲がり反応の機能ドメインを解析、DNA結合ドメインBとそれに連なる配列が機能領域であることを明らかにした。
期刊论文(5)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Shirakawa, H.: "Existence of a transcription factor for the human HMG2 gene positively related to the level of HMG2" Biochemistry. 34. 2521-2527 (1995)
Shirakawa, H.：“人类 HMG2 基因转录因子的存在与 HMG2 水平呈正相关”生物化学。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Yamazaki, F.: "Repression of cell cycle progression by antisense HMG2 RNA." Biochem. Biophys. Res. Commun.210. 1045-1051 (1995)
Yamazaki, F.：“反义 HMG2 RNA 抑制细胞周期进程。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Yamamoto, A.: "Difference in affinity for DNA between HMG proteins 1 and 2 determined by surface plasmon resonance measurements." Biochemistry. 35(in press). (1996)
Yamamoto, A.：“通过表面等离子共振测量确定 HMG 蛋白 1 和 2 之间对 DNA 亲和力的差异。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
HMGタンパク質のDNA結合ドメイン構造と認識機構の解析
  • 批准号：
    09249217
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $1.22万
  • 财政年份：
    1997
  • 负责人：
    吉田 充輝
  • 依托单位：
    Tokyo University of Science
HMGタンパク質のDNA結合ドメイン構造と認識機構の解析
  • 批准号：
    08260218
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $1.54万
  • 财政年份：
    1996
  • 负责人：
    吉田 充輝
  • 依托单位：
    Tokyo University of Science
HMGタンパク質のDNA結合ドメイン構造と認識機構の解析
  • 批准号：
    08260218
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $1.54万
  • 财政年份：
    1996
  • 负责人：
    吉田 充輝
  • 依托单位：
    Tokyo University of Science
HMGタンパク質のDNA結合機構および機能解析研究
  • 批准号：
    06680592
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
  • 资助金额：
    $1.28万
  • 财政年份：
    1994
  • 负责人：
    吉田 充輝
  • 依托单位：
    Tokyo University of Science