ウイルス蛋白質による転写調節とその細胞標的因子の解析

病毒蛋白及其细胞靶因子的转录调控分析

• 批准号: 09277206
• 负责人: 鈴木 健之
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09277206/
• 关键词: 細胞癌化; 転写調節; 細胞周期

本研究は、成人T細胞白血病の原因ウイルスであるHTLV-1の転写制御因子Taxによる転写調節やその標的因子の解析を通して、細胞の増殖、分化に重要な転写制御因子の同定と活性調節機構の解明を目的とする。本年度は、Taxによる転写抑制の分子機構の解析、Taxと相互作用する新規標的因子のスクリーニングおよびTaxの突然変異誘発活性について解析を試みた。これまでに、Taxがサイクリン依存性キナーゼの阻害分子であるINK4ファミリーのp16ink4a,p15ink4bに結合し、それらの活性を阻害することでG1-S期進行に寄与しうることを報告してきた。今回、Taxは同ファミリーに属するp18ink4cとは結合しないが、その遺伝子発現を抑制することが示された。すなわち、作用機構は異なるものの、Taxが細胞周期の進行を負に調節する因子群の活性を阻害することがわかった。酵母Two-Hybrid法により、Taxと結合する新しい標的蛋白質群としてPDZドメインをもつ複数の蛋白質を同定した。このうち、hDLGはDrosophila成虫原基の癌抑制遺伝子産物として単離されたDLGのヒトcounterpartであり、大腸癌の癌抑制遺伝子産物APCとの結合が報告されている。私は、TaxとhDLGがHTLV-1感染細胞内で複合体を形成していること、TaxのC末端とhDLGのPDZドメインが結合に重要であることを見いだした。Taxは細胞をトランスフォームする活性をもつ。しかし、ATLはウイルス感染後長い潜伏期を経て発病し、その白血病細胞にはTaxなどのウイルス抗原の発現がほとんど認められない。そこで私は、Taxが細胞の癌化を運命づける際に、細胞に遺伝的不安定性を誘発する可能性を想定し、Tax発現による点突然変異率の変化を検定した。大腸菌lacI遺伝子をラットの細胞株に組み込んだシステムを用いたところ、Taxの発現により約3倍の点変異率の上昇が観察された。

This study aims to elucidate the mechanism of HTLV-1 regulatory factor Tax and regulatory factors that are important for cell proliferation and differentiation in adult T cell leukemia. This year, we will try to analyze the molecular mechanism of tax inhibition and the new target factors of tax interaction and the sudden change of tax induction activity. In this case, INK4, p16 ink4a,p15 ink4b, and p16 ink4b are linked to each other, and the activity of each of them is inhibited. Now, Tax is the same as the p18ink4c. It is the same as the p18ink4c. It is the same as the p18 ink 4c. The mechanism of action is different, and the activity of the factor group is blocked by the negative regulation of the cell cycle. Yeast Two-Hybrid Method for Identification of New Target Protein Groups and PDZ Protein Groups The expression of hDLG cDNA in human Drosophila adult primordia was reported in this paper. The formation of complexes in HTLV-1 infected cells is important for the combination of Tax and hDLG. Tax is a cell activity. ATL has a long incubation period after infection and develops the disease, and leukemia cells have a long history of the expression of Tax and Nielsen antigens. The probability of induction of cellular instability and the rate of abrupt change in the occurrence of tax are determined. A 3-fold increase in the rate of variation in the production of E. coli lactones was observed.