カルシウムイオンによる血小板細胞内顆粒分秘の制御機構

钙离子控制血小板细胞内颗粒分泌的机制

• 批准号: 01641524
• 负责人: 高澤 温彦
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01641524/
• 关键词: カルシウム; 分泌反応; 分泌顆粒; 血小板

細胞膜透過性を高めた血小板を用い、カルシウム刺激に応答しておこる顆粒分泌に伴う細胞内構造の変化を、超薄切片法による電子顕微鏡観察により調べた。その結果、未刺激細胞では分泌顆粒の約40%が細胞膜のごく近傍(平均約10nm)に存在していること、分泌刺激により細胞膜近傍の顆粒が分泌による顆粒の減少に見合うだけ選択的に減少していることを見い出した。細胞膜近傍に存在する顆粒が選択的に分泌されるという可能性は、膜近傍に存在する顆粒の割合と最大分泌量(%)が無傷および膜透過性を高めた血小板で一致することから支持された。さらに細胞膜と顆粒を結ぶ構造を詳細に調べると、カルシウム刺激以前にはフィラメント様でない不定形の構造物が膜と顆粒の間に存在しており、刺激によりこの不定形構造が規則的な間隔を示す橋状の構造に変化することを見いだした。他方、細胞内マイクロフィラメントは分泌刺激の前後で大きく変化していなかった。これらの結果に基づいて、顆粒分泌の新しいモデル、即ち分泌される顆粒はすでに細胞膜の近傍に存在しており、両者を結ぶ不定形構造物がカルシウム刺激により構造変化することで分泌が起こる、を提唱している。このモデルで最も重要な点である細胞膜と顆粒を結ぶ構造については現在免疫電顕の手法を用いて検討している。また分泌にはATPが必要であるが、ATPは顆粒を細胞膜近傍に保持するために必要である可能性がある。即ち、ATPのない条件で固定した標品では膜近傍に存在する顆粒数が著しく減少していた。今後顆粒と細胞膜の間に存在する物質を同定することにより、カルシウムの標的タンパク質およびATPの役割を明らかにしたい。

Cell membrane permeability を high め た platelet を い, カ ル シ ウ ム stimulus に 応 answer し て お こ secretion に る particles with tectonic の う cell - を and ultrathin sectioning に よ る electronic 顕 micromirror 観 examine に よ り adjustable べ た. そ の results, not to stimulate cell で は secretory granules の about 40% が membrane の ご く nearly alongside (an average of about 10 nm) に し て い る こ と, secretion stimulation に よ り membrane nearly alongside の particles が secretion に よ る particles の reduce に see us う だ け sentaku に reduce し て い る こ と を see い out し た. Cell membrane nearly exist alongside に す る particles が sentaku に secretion さ れ る と い う は, membrane nearly alongside に possibility exists す る particles の cut close と biggest production (%) が no injury お よ び membrane permeability を high め た platelet consistent で す る こ と か ら support さ れ た. さ ら に membrane と particles を "を ぶ structure detailed に adjustable べ る と, カ ル シ ウ ム stimulus before に は フ ィ ラ メ ン ト others で な い amorphous の structure が membrane と に exist between particles の し て お り, stimulating に よ り こ の amorphous structure な interval を が rules in す に bridge の structure - the す る こ と を see い だ し た. The large で く く changes before and after <s:1> stimulation of <s:1> secretion in the other side and within the cell で <s:1> ロフィラメ ロフィラメ ト ト ト った った. こ れ ら の results に づ い て secretion, particle の new し い モ デ ル, namely ち secretion さ れ る particles は す で に membrane の nearly exist alongside に し て お り, struck を "ぶ amorphous structure が カ ル シ ウ ム stimulus に よ り structure - the す る こ と で secretion が up こ る, を sing し て い る. こ の モ デ ル で も most important な point で あ る membrane と particles を "ぶ tectonic に つ い て は now immune electric 顕 の gimmick を with い て beg し 検 て い る. ま た secretion に は ATP が necessary で あ る が, ATP は particles を membrane nearly alongside に keep す る た め に necessary で あ る possibility が あ る. Namely ち, ATP の な い conditions で fixed し た standard product で は membrane nearly exist alongside に す る particle number が the し く reduce し て い た. に exist between particles in future と membrane の す を る material with constant す る こ と に よ り, カ ル シ ウ ム の mark タ ン パ ク qualitative お よ び ATP の "を cut Ming ら か に し た い.

项目成果

T.Morimoto: "Secretion competent dense granules are located close to the plasma membrane before secretory stimulation in bovine electropermeabilized platelets." Cell Struct.Funct.14. 951 (1989)

T.Morimoto：“在牛电透血小板中，在分泌刺激之前，具有分泌能力的致密颗粒位于靠近质膜的位置。”

T.Morimoto: "Anchorage of secretion-competent dense granules on the plasma membrane of bovine platelets in the absence of secretory stimulation." J.Cell Biol.

T.Morimoto：“在没有分泌刺激的情况下，具有分泌能力的致密颗粒锚定在牛血小板的质膜上。”

A.Yoshida: "Bi-directional regulation of dephosphorylation of cAMPdependent phosphorylated proteins by cAMP and calcium in permeabilized rat heart cells." J.Biochem.106. 894-899 (1989)

A.Yoshida：“在透化的大鼠心脏细胞中，cAMP 和钙对 cAMP 依赖性磷酸化蛋白的去磷酸化进行双向调节。”