权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

筋収縮中のミオシンの分子運動の蛍光標識および蛍光抗体標識による検出と解析

使用荧光标记和荧光抗体标记检测和分析肌肉收缩过程中的肌球蛋白分子运动

基本信息

批准号：
01657508
负责人：
宮西隆幸
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01657508/
关键词：
筋収縮ミオシン ATP 分子内運動蛍光標識蛍光色素筋原線維

项目摘要

ミオシン頭部重鎖の高反応性システイン残基(SH_1)に選択的に導入した蛍光色素ロ-ダミンが硬直状態にある筋線維中で一定の方向を向いており、ADPの添加に伴ってその向きを変えることは先にBorejdoらによって報告されている通りである。SH_1基の極近傍にあるSH2基に選択的にロ-ダミンを今回導入することに成功した。その選択性は、ミオシンのEDTA(K^+)-ATPase活性、Ca^<++>ーATPase活性などのパラメ-タの変化およびペプチドマッピング法による局在により確認された。SH_2基上にロ-ダミンを導入したミオシン頭部部分をグリセリン処理筋に加えると硬直状態ではロ-ダミン色素は筋線維の長軸に対して42度の角度で配向した。この筋肉に十分濃度のMgADPを加えた場合でもロ-ダミン色素は同じく42度に配向していた。この頭部部分はアクチン線維と結合しさらにADPとも結合できることも確かめられた。この頭部のSH_1基上に別のラベルが入っているかどうかはこれらの結果に関係しなかった。SH_2基上のロ-ダミンのADPに対する反応はADPに対する感受性が化学修飾によって変化したためでなく、SH_1基上のそれともともと異なるためであると結論した。このように極近傍にある二つのアミノ酸残基のADPに対する対応の不一致はそれらの残基の相対的位置が変化していること、言い替えると少なくともその周辺には然るべきフレキシビリティが存在し、特定の基質類似体の存在下では検出できることを示唆している。

A highly reactive protein residue (SH_1) in the head of the protein was introduced into the protein and the protein was re-aligned. SH_1-based and SH_2-based selection process is successful. The selectivity, EDTA(K^+)-ATPase activity, Ca^++-ATPase activity, and enzyme activity of the three enzymes were determined. SH_2 base on the introduction of the first part of the second part of the second part of the second In the case of adding MgADP to the muscle, the pigment is aligned at 42 degrees. The head part of the head is connected to the ADP. The head of the SH_1 base is divided into two parts. The sensitivity of SH_2-based ADP is higher than that of SH_1-based ADP. The position of the residues in the vicinity of the ADP is different from that of the residues in the vicinity of the ADP.